课题2　土壤中分解尿素的细菌的分离与计数 (2)

1、分解土壤中乙醚的细菌的分离和数量，课题2，乙醚(NH2) 2的重要农业氮肥不能直接被农作物吸收，必须被土壤中的细菌分解为NH3，才能被植物吸收。土壤中的细菌能合成脲酶，因而分解尿素。CO(NH2)2 H2O CO2 2NH3，尿素粒子，尿素分子立体结构，尿素酶，牙齿部分的学习目标，1。从土壤中分离出可以分解尿素的细菌。2牙齿技术应使用高温强的DNA聚合酶。毽子的问题是如何找到高温DNA聚合酶？寻找高温环境的问题解决想法。原因：高温条件消除了大部分微生物。得到启示：寻找目的菌种时，要根据生存环境的要求去相应的环境寻找。2 .实验室微生物的筛选原理为目的菌的生长提供了有利条件(包括营养、温度、pH

2、等)，同时抑制或阻止其他微生物的生长。本课题使用的培养基kh2po 4 1.4G nahpo 4 2.1G mgso 4.7 H2 o 0.2g葡萄糖10.0g尿素1.0g琼脂15.0g溶解牙齿物质后，用蒸馏水定量到1000mL。碳源：葡萄糖，尿素，氮源：尿素，能源。只有生产脲酶的细菌才能使用尿素作为氮源存活。3 .培养基选择，问题1:在牙齿培养基的制造中，为微生物生长提供碳源和氮源的物质是什么？问题2:牙齿公式能否筛选出产生脲酶的细菌？为什么？(1)概念：微生物学中，允许某些种类的微生物生长，同时阻止其他种类的微生物生长的培养基称为选择培养基。(2)例如：放青霉素的培养基，-细菌不会生长，酵

3、母、真菌等真菌会生长。加入不含碳有机物的无碳培养基，分离滋养微生物。用于判断选择培养基是否起到选择作用的对照组为()a .无接种选择培养基b .无接种牛肉奶油蛋白胨培养基c .接种选择培养基d .接种牛肉奶油蛋白胨培养基d，d，典型例子问题，选择培养基是根据特定种类微生物的特殊营养要求或部分理化耐受性设计的培养基。使用牙齿培养基可以将所需的微生物从混合微生物中分离出来。可用于选择酵母和硝化细菌的培养基分别为()a .李红梅蓝培养基、含青霉素的培养基B .含青霉素的培养基、含氨的武器培养基c .含氨的武器培养基d .含青霉素的培养基d .含青霉素的培养基、李红梅蓝培养基，B，1，显微镜直接计数：

4、血细胞计数板(。不能区分死细菌和活细菌；个人的小细菌很难用显微镜观察。缺点：2。统计殖民地数，方法：每个大正方形的长度为1毫米，每个大正方形的面积为1毫米2，盖上盖子后幻灯片和盖子幻灯片之间的高度为0.1毫米，因此计算室的体积为0.1毫米3。2活菌计数法(稀释度法)(1)操作方法：稀释度板统计菌数(2)原理：稀释度足够高时，培养基表面生长的菌落来自样品稀释液之一的活菌。数一下平板电脑的殖民地数量，就可以推测出样品中含有多少种生菌。即，1个殖民地1个生菌。(3)统计方法：选择30300个殖民地的声誉统计；每稀释度取3盘平均。(4)结果：统计殖民地往往低于活细菌的实际数量。因为当两个以上的细胞连接

5、在一起时，在平板电脑上观察到的只是菌群。因此，统计结果一般用菌群数而不是生菌数来表示。，例1如果一名学生在稀释倍数为106的培养基中，将板相菌群数的平均值测定为234，则每毫升样品的菌群数(用于涂布板的稀释液体积为0.1mL)()a . 2.34108 b . 2.34109 C . 234d . 234d . 234计算公式：每样品的CV(。例2两个学生用稀释度板法测定了同一土壤样品中的细菌数。从相应稀释倍数为106的培养基中获得了以下两个茄子统计结果。1.甲同学在牙齿浓度下涂上了平板，统计的群落数为230。2.乙同学们在牙齿浓度下涂上了A、B、C三个平板，统计的菌落数分别为21、212、2

6、56，统计结果为牙齿三个平板上的菌落数的平均163。你认为牙齿两位同学的方法正确吗？如果有问题，有什么不对吗？a:没有重复实验(至少涂3块板)。b:组a结果错误太大，渡边杏用于平均计算。方法刻度盘稀释涂层板计算注意事项为确保结果正确，通常在30300的板上选择菌群数。(阿尔伯特爱因斯坦，Northern Exposure(美国电视电视剧)，成功)为了使结果接近实际值，可以将相同的稀释度添加到三个以上的平板上，进行涂层，计算出菌室的平均值。统计殖民地往往低于活细菌的实际数量。涂层板法选择的稀释度很重要，一般三种茄子稀释度中出现在第二种稀释度的平均菌群数为50左右。3 .比较1设定对照组的目的设定

7、：排除实验组非测试因素对实验结果的影响，提高实验结果的可信度。2比较实验：是指除了测试的条件外，所有条件都相同的实验。符合牙齿条件的称为对照组，不符合牙齿条件的称为实验组。启示：设计实验时，至少要涂上3个平板，才能作为重复组提高实验的说服力和准确性。在“分解土壤中乙醚的细菌的分离和计数”实验中，张军没有设定对比，从双稀释培养基中筛选出了约150个菌群。但是其他学生在同一稀释度中只筛选了约50个菌群。经过大家的讨论，认为张同学和其他同学的实验结果不同的主要原因是培养基被杂菌污染了。培养基中混合了尿素以外的氮物质，不能分解尿素的细菌也能在培养基中生长。选定的土壤样本不同。你能设定对照，帮助小张同学消除影响上述两个茄子实验结果的因素吗？例，案例分析，原因分析：比较方案1:其他学生用张学友等土样进行了实验，结果证明，如果与张学