标准解读

《GB/T 36810-2018 草莓枯萎病菌检疫鉴定方法》是一项国家标准，旨在为草莓枯萎病菌（Verticillium dahliae）的检疫和鉴定提供科学依据和技术指导。该标准详细规定了从样品采集到最终鉴定结果报告的一系列步骤与要求。

首先，在样品采集方面，标准明确了如何正确选取具有典型症状的草莓植株作为检测对象，并对采样工具、采样时间以及样品保存条件等做了具体说明，确保所采集样本能够准确反映目标病原体的存在情况。

其次，关于病原物分离纯化部分，《GB/T 36810-2018》介绍了利用特定培养基进行病原真菌的初筛及后续纯化过程。通过观察菌落形态特征、生长速度等指标来初步判断是否为疑似草莓枯萎病菌。

接着，在分子生物学鉴定环节中，该标准推荐使用PCR扩增技术结合序列分析法对分离得到的真菌进行基因水平上的确认。此方法不仅提高了检测准确性，还缩短了整个鉴定周期。

此外，对于难以直接从植物组织中获得足够量DNA的情况，《GB/T 36810-2018》也给出了基于免疫学原理的ELISA试剂盒检测方案作为补充手段之一。


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  • 现行
  • 正在执行有效
  • 2018-09-17 颁布
  • 2019-04-01 实施
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文档简介

ICS6502001

B16..

中华人民共和国国家标准

GB/T36810—2018

草莓枯萎病菌检疫鉴定方法

DetectionandidentificationofFusariumoxysporumSchlecht.f.s.

()p

FragariaeWinks&Williams

2018-09-17发布2019-04-01实施

国家市场监督管理总局发布

中国国家标准化管理委员会

GB/T36810—2018

前言

本标准按照给出的规则起草

GB/T1.1—2009。

本标准由全国植物检疫标准化技术委员会提出并归口

(SAC/TC271)。

本标准起草单位中华人民共和国天津出入境检验检疫局

:。

本标准主要起草人刘跃庭罗加凤牛春敬崔铁军廖芳

:、、、、。

Ⅰ

GB/T36810—2018

草莓枯萎病菌检疫鉴定方法

1范围

本标准规定了草莓枯萎病菌的检疫鉴定方法

。

本标准适用于草莓苗中及其携带土壤中草莓枯萎病菌的检疫鉴定

。

2草莓枯萎病菌的基本信息

中文名草莓枯萎病菌

:

学名Fusariumoxysporumfragariae

:(Schlecht.)f.sp.Winks&Williams

英文名

:fusariumwiltofstrawberry

分类地位草莓枯萎病菌属真菌界子囊菌门盘菌亚门

:(Fungi),(Ascomycota),(Pezizomycotina),

粪壳菌纲肉座菌目丛赤壳科镰刀菌属Fusarium

(Sordariomycetes),(Hypocreales),(Nectriaceae),()。

传播途径病菌依靠带菌种苗和土壤进行远距离传播

:。

草莓枯萎病菌的其他信息参见附录

A。

3方法原理

病原菌的为害症状分离培养性状形态特征及特异性扩增片段作为草莓枯萎病菌的检疫鉴

、、PCR

定依据

。

4仪器用具和主要试剂

41仪器用具

.

显微镜超净工作台生物培养箱电子天平高压灭菌锅常规冰箱扩增仪电泳

、、、、、(-20℃)。PCR、

仪凝胶成像仪高速冷冻离心机恒温水浴锅

、、、。

培养皿三角瓶镊子手术剪手术刀接种针移液器酒精灯

、、、、、、、。

42主要试剂

.

乙二胺四乙酸十二烷基磺酸钠异戊醇三氯甲烷无水乙醇乙

(EDTA)、(SDS)、Tris-HCl、、、、70%

醇氯化钾氯化镁蛋白酶引物Taq聚合酶等分子生物学试剂或用植物组织及

、、、K、FofraF/FofraR、。

真菌基因组提取试剂盒提取蔗糖葡萄糖琼脂青霉素链霉素次氯酸钠

DNA。、、、、、0.5%(NaClO)。

马铃薯蔗糖培养基马铃薯葡萄糖培养基的制备参见附录

(PSA)、(PDA)B。

5病菌的鉴定

51症状检查

.

取待检植株观察植株有无生长不良矮小衰弱及腐烂症状下部叶片是否变紫红色萎蔫

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