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1、福建农林大学考试试卷(福建农林大学考试试卷(A A 卷)卷) 2006 2007 学年第二学期 课程名称:植物生理生化实验考试时间90 分钟 专业年级班学号姓名 题号 得分 一二三四五总得分 评卷 人 签字 复核 人 签字 得分一、名词解释(每小题 2 分,共 20 分) 1、标准曲线: 2、离心技术: 3、同工酶: 4、酶活力: 5、诱导酶: 1 / 24 6、呼吸速率: 7、种子生活力: 8、抗逆性: 9、超氧化物歧化酶() : 10、光合速率: 得分二、填空题(每格 1 分,共 32 分) 1、测定植物组织中可溶性蛋白质含量的方法有、和等。 2、在测定植物可溶性蛋白质含量时,绘制标准曲线

2、是以为横坐标, 以_为纵坐标。 3、用茚三酮显色法测定植物组织氨基酸含量时,茚三酮溶液与氨基 酸共热生成,与茚三酮和还原性茚三酮反应,生成。该化合物颜色的 深浅与氨基酸的含量成, 可通过测定处的光密度, 求出氨基酸的含量。 4、在测定淀粉酶的活性时:淀粉酶不耐,淀粉酶不耐。 5、测定淀粉酶活性时,3,5二硝基水杨酸试剂()的作用是和。 6、聚丙烯酰胺凝胶电泳分离过氧化物同工酶实验中,电泳存在三大 效应,分别是、和。 7、测定硝酸还原酶活性的方法有和。 2 / 24 8、类胡萝卜素吸收光谱最强吸收区在,它不仅可以吸收传递光能, 还具有的作用。 9、 叶绿素溶液在透射光下呈色, 在反射光下呈色。

3、10 、 在 研 究 植 物 矿 质 元 素 中 , 常 用 的 植 物 溶 液 培 养 法 有、和。 11、水培时要选用黑色容器装营养液,这是为了防止。 12、常用法确定植物生长的必需元素。 13、用活体法测定硝酸还原酶的材料,取样前叶子需进行一段时 间的光合作用,以积累,产生更多,加速硝酸盐的还原。 14、植物光合速率测定方法有和等。 得分三、选择题(每题 1 分,共 10 分) 1、进行酶活力测定时() A、底物浓度必须极大于酶浓度B、酶浓度必须极大 于底物浓度, D、酶能提高反应的平衡点C、与底物浓度无关 2、蛋白质分子中含有共轭双键的酪氨酸、色氨酸等芳香族氨基酸。 它们具有吸收紫外光

4、的性质,其吸收高峰在()波长处。 A、260B、650C、540D、280 3、斐林()-酚试剂法测定蛋白质浓度时,应选用的波长是() 。 A、260B、650C、540D、280 3 / 24 4、叶绿素提取时,叶片匀浆时加入少许 3,其目的是() A、使研磨更充分B、加速叶绿素溶解 C、使叶绿素 a、b 分离D、保护叶绿素 5、一般而言,正常植物叶片的叶绿素与类胡萝卜素的比值为() A、2:1B、3:1C、1 :2D、1:3 6、测定叶绿素总量时,分光光度计选用的波长是() A、663B、645C、430D、652 7、叶绿素卟啉环的中心原子是() A、B、C、D、 8、小蓝子法测定呼吸强

5、度生成的白色沉淀是() A、3B、()2C、()2D、3 9、法测定种子生活力的试验中,活种子的现象为 ()。 A、种胚全部染成红色B、种胚全部未染色 C、种胚全部染成黑色D、种胚非关键部位染色,而胚根和胚 芽的尖端都不染色 10、小篮子法测定呼吸强度中,若在滴定时,外界2进入呼吸测定装 置内,会使测得的结果()。 A、偏大B、偏小C、不变D、不一定 得分四、问答题(7 题任选 6 题答。每小题 5 分,共 30 4 / 24 分) 1、 简述分光光度计的使用方法。 2、简述“聚丙烯酰胺凝胶电泳分离植物过氧化物酶同工酶”实验中 所用的过硫酸铵、四甲基乙二胺、蔗糖、溴酚蓝、H2O2等试剂的作 用

6、是什么? 3、为了准确测定果蔬的维生素C 含量,在测定过程应注意些什么? 4、叶绿素 a、b 在蓝紫光区也有吸收峰,能否用这一吸收峰波长进 行叶绿素 a、b 的定量分析?为什么? 5、测定活性时,为什么要设照光对照管和暗对照管? 6、植物缺素病症有的出现在顶端幼嫩枝叶上,有的出现在下部老叶 上,为什么?举例加以说明。 7、作物溶液培养过程应注意哪些关键技术? 得分五、计算题(8 分) 用斐林酚试剂法测定植物可溶性蛋白质时, 以标准蛋白含量为 横坐标,以 650 吸光度为纵座标,所得标准曲线如下图所示。实验 中称取鲜样 0.5g,用 5 蒸馏水提取,取 0.1 提取液同标准曲线测定 650 处吸

7、光度为 0.300,请从标准曲线查出相应的蛋白质含量() , 根据有关公式,求出每克样品中的蛋白质毫克数。 5 / 24 福建农林大学考试试卷(福建农林大学考试试卷(B B 卷)卷) 2006 2007 学年第二学期 课程名称:植物生理生化实验考试时间90 分钟 专业年级班学号姓名 题号 得分 一二三 6 / 24 四五总得分 评卷 人 签字 复核 人 签字 得分一、名词解释(每小题 2 分,共 20 分) 1、淀粉酶: 2、标准曲线: 3、电泳: 4、酶的比活力: 5、硝酸还原酶: 6、溶液培养: 7、种子生活力: 8、逆境: 9、超氧化物歧化酶() : 7 / 24 10、光合作用: 得分

8、二、填空题(每格 1 分,共 32 分) 1、 用斐林酚试剂法测定植物可溶性蛋白质含量受和等物质的干扰。 2、用茚三酮显色法测定植物组织氨基酸时,加入可以防止, 以抗坏 血酸为可提高反应的灵敏度,并使颜色稳定。 3、用茚三酮显色法测定植物组织氨基酸含量时,茚三酮溶液与氨基 酸共热生成,与茚三酮和还原性茚三酮反应,生成。该化合物颜色的 深浅与氨基酸的含量成, 可通过测定处的光密度, 求出氨基酸的含量。 4、 在测定淀粉酶的活性时, 将酶液和淀粉溶液分别放在 40水浴中 预保温,其目的是。 5、测定淀粉酶活性时,3,5二硝基水杨酸试剂()的作用是和。 6、聚丙烯酰胺凝胶电泳分离过氧化物同工酶实验中

9、,聚丙烯酰胺凝 胶是由、 、 、和聚合交联成三维网状结构的凝胶。 7、测定硝酸还原酶活性的方法有和。 8、在研究植物矿质元素中,常用的植物溶液培养法有、和 等。 9、水培时要选用黑色容器装营养液,这是为了防止。 12、活体法酶促反应在条件下进行,以防止亚硝酸盐还原为。 13、植物呼吸强度的测定方法有、和等。 14、测定植物光合作用的方法有、 、和等。 8 / 24 得分三、选择题(每题 1 分,共 10 分) 1、测定淀粉酶活性时,最适宜的反应温度和值是() A、37 ,4.5B、37 ,7.0C、40 ,5.6 2、酶的分离提纯过程中,不正确的操作是() 。 A、需在低温下进行,一般在 05

10、之间 B、酶制剂制成干粉后可保存于 4冰箱中 C、需经常使用巯基乙醇以防止酶蛋白二硫键发生还原 D、提纯时间尽量短 3、斐林()-酚试剂法测定蛋白质浓度时,应选用的波长是() 。 A、260B、650C、540D、280 4、叶绿素卟啉环的中心原子是() A.B.C.D. 5、一般而言,正常植物叶片的叶绿素与类胡萝卜素的比值为() A、2:1B、3:1C、1 :2D、1:3 6、高等植物的老叶由于缺少某一种元素而发病,下面元素属于这一 类的有() A、氮B、钙C、铁 7、在 95%提取液中,叶绿素 a 在红光区的最大吸收峰为 ()。 A、 470B、649C、 656D、665 8、小蓝子法测

11、定呼吸强度生成的白色沉淀是() A、3B、()2C、()2D、3 9 / 24 9、法测定种子生活力的试验中,活种子的现象为 ()。 A、种胚全部染成红色B、种胚全部未染色 C、种胚全部染成黑色D、种胚非关键部位染色,而胚根和胚 芽的尖端都不染色 10、呼吸作用的底物为()。 A、有机物和O2B、 2 和 H2OC、有机物和 2 得分四、问答题(7 题任选 6 题答。每小题 5 分,共 30 分) 1、简述分光光度计的使用方法。 2、简述斐林酚试剂法测定植物可溶性蛋白质的原理。 3、 为什么用 2,6-二氯酚靛酚滴定法测定维生素 C 含量时, 要在测定 的同时进行 2,6-二氯酚靛酚溶液的标定

12、? 4、为什么提取叶绿素时干材料一定要用80%的丙酮,而新鲜的材料 可以用无水丙酮提取? 5、影响活力测定准确性的主要因素是什么?应如何克服? 6、植物缺素病症有的出现在顶端幼嫩枝叶上,有的出现在下部老叶 上,为什么?举例加以说明。 7、进行溶液培养或砂基培养有时会失败,主要原因何在? 10 / 24 得分五、计算题(8 分) 称取 1g 叶片和 0.3g 花瓣, 用 5 提取液分别提取它们的粗酶液, 在3 反应体系中加入10 L粗酶液, 混合均匀, 照光20 后测得560 值分别为: 560叶片花瓣未加酶液对照 值 0.3720.4050.727 活性单位以抑制光化还原的 50时加入的酶量为

13、一个酶活性单 位,请分别计算叶片和花瓣的活性。 福建农林大学考试试卷(福建农林大学考试试卷(A A 卷)答案卷)答案 2006 2007 学年第二学期 课程名称:植物生理生化实验考试时间 90 分钟 专业年级班学号姓名 题号 得分 评卷 人 一二 11 / 24 三四五总得分 签字 复核 人 签字 得分 一、名词解释(每小题 2 分,共 20 分) 1、标准曲线:用标准溶液制成的曲线。先配制一系列不同浓度 的标准溶液, 在溶液吸收最大波长下 , 逐一测定吸光度,然后用坐标 纸以溶液浓度为横坐标, 吸光度为纵坐标作图, 若被测物质对光的吸 收符合光的吸收定律, 必然得到一条通过原点的直线, 即标

14、准曲线。 2、离心技术:是根据物质颗粒在一个实用的离心场中的行为而 发展起来的,它是分离细胞器和 生物大分子物质的必备的手段之一, 也是测定某些纯品物质的部分性 质的一种方法。差速离心法基于待测物质颗粒的大小,密度不相同, 其沉降速度不一样而得到分离。 3、同工酶:指催化同一种化学反应,但其酶本身的组成却有做 不同的一组酶。 4、酶活力:也称为酶活性,是指酶催化一定化学反应的能力。 5、诱导酶:又称适应酶,指植物体内本来不含有,但在特定外 来物质的诱导下诱导生成的酶。 如硝酸还原酶可为 3 - 所诱导生成。 6、呼吸速率:单位时间鲜重或干重植物组织或原生质释放的 或吸收 O 2 的量来表示 7

15、、 种子生活力: 指种子发芽的潜在能力或种胚所具有的生命力。 8、抗逆性:植物对逆境的抵抗和忍耐能力,简称为抗性。 9、超氧化物歧化酶() :普遍存在于动、植物体内,是一种清除 超氧阴离子自由基的酶。 10 、光合速率:单位时间、单位叶面积吸收 2 或放出 O 2 的量。 12 / 24 2 得分 二、填空题(每格 1 分,共 32 分) 1、测定植物组织中可溶性蛋白质含量的方法有酚试剂法 (法)、考 马斯亮蓝法和紫外分光光度法等。 2、在测定植物可溶性蛋白质含量时,绘制标准曲线是以标准蛋白 质浓度为横坐标,以吸光值 为纵坐标。 3、用茚三酮显色法测定植物组织氨基酸含量时,茚三酮溶液与氨 基酸

16、共热生成氨,氨与茚三酮和还原性茚三酮反应, 生成_蓝紫色的二酮茚胺。该化合物颜色的深浅与氨基酸的 含量成正比,可通过测定 570 处的光密度,求出氨基酸 的含量。 4、 在测定淀粉酶的活性时: 淀粉酶不耐酸, 淀粉酶不耐热。 5、测定淀粉酶活性时,3,5二硝基水杨酸试剂()的作用是与 还原糖显色生成棕红色的 3-氨基-5-硝基水杨酸 和终止酶活性。 6、聚丙烯酰胺凝胶电泳分离过氧化物同工酶实验中,电泳存在三 大效应,分别是浓缩效应、分子筛效应和电荷效应。 7、测定硝酸还原酶活性的方法有活体法和离体法。 8、类胡萝卜素吸收光谱最强吸收区在蓝紫光,它不仅可以吸收传 递光能,还具有保护叶绿素的作用。

17、 9、 叶绿素溶液在透射光下呈绿色, 在反射光下呈暗红色。 10、在研究植物矿质元素中,常用的植物溶液培养法有水溶液培养 法、砂基培养法和气栽法。 11、水培时要选用黑色容器装营养液,这是为了防止藻类滋生。 12、常用水溶液培养法确定植物生长的必需元素。 13、用活体法测定硝酸还原酶的材料,取样前叶子需进行一段时 13 / 24 间的光合作用,以积累光合产物,产生更多,加速硝酸盐的还 原。 14、植物光合速率测定方法有红外线 2 气体分析法和改良半叶法等。 得分 三、选择题(每题 1 分,共 10 分) 1、进行酶活力测定时(A) A、底物浓度必须极大于酶浓度B、酶浓度必须 极大于底物浓度,

18、D、酶能提高反应的平衡点C、与底物浓度 无关 2、蛋白质分子中含有共轭双键的酪氨酸、色氨酸等芳香族氨基酸。 它们具有吸收紫外光的性质,其吸收高峰在(D)波长处。 A、260B、650C、540D、280 3、斐林()-酚试剂法测定蛋白质浓度时, 应选用的波长是( B)。 A、260B、650C、540D、280 4、叶绿素提取时,叶片匀浆时加入少许 3,其目的是( D) A、使研磨更充分B、加速叶绿素溶解 C、使叶绿素 a、b 分离D、保护叶绿素 5、 一般而言, 正常植物叶片的叶绿素与类胡萝卜素的比值为 (B) A、2:1B、3:1C、1 :2D、1:3 6、测定叶绿素总量时,分光光度计选用

19、的波长是(D) A、663B、645C、430D、652 7、叶绿素卟啉环的中心原子是(C) A、B、C、D、 8、小蓝子法测定呼吸强度生成的白色沉淀是(A) 14 / 24 A、 3 B、()2C、()2D、3 9、法测定种子生活力的试验中,活种子的现象为 (A)。 A、种胚全部染成红色B、种胚全部未染色 C、种胚全部染成黑色D、种胚非关键部位染色,而胚根和 胚芽的尖端都不染色 10、小篮子法测定呼吸强度中,若在滴定时,外界2进入呼吸测定装 置内,会使测得的结果(A)。 A、偏大B、偏小C、不变D、不一定 得分 四、问答题(7 题任选 6 题答。每小题 5 分,共 30 分) 2、 简述分光

20、光度计的使用方法。 答: 开启电源开关,预热约 20 打开样品室选择需要的波长,将选择开关扳到“T” (透光 率)位置后,调节“0”旋钮,使读数显“0.00” ,然后合 上样品室盖,调节“100%” ,旋钮使读数显示“100” 放空白于比色皿架上,拉动拉杆,使空白进入光路,按 调整“0”和“100%” 再将选择开关扳至“A” (吸光度)位置后,调节吸光度调 零旋钮,使读数显示“0.00” 将待测样品移入光路,读出吸光度“A” 3、 简述“聚丙烯酰胺凝胶电泳分离植物过氧化物酶同工酶” 实验 中所用的过硫酸铵、四甲基乙二胺、蔗糖、溴酚蓝、H2O2等试 剂的作用是什么? 答:过硫酸铵:起催化作用、引

21、发剂 四甲基乙二胺:催化作用并可调节聚合作用的时间 蔗糖:防止样品的扩散. 溴酚蓝:做前沿指示剂。 H2O2:过氧化物酶通过催化 H2O2,能把联苯胺氧化成蓝色后 变成棕褐色产物。 4、 为了准确测定果蔬的维生素 C 含量,在测定过程应注意些什 么? 15 / 24 答: 在研磨时要快速均浆并加 2%的草酸溶液, 可有效地抑制 抗坏血酸氧化酶,防止被氧化; 样品中的色素会干扰对终点的判断, 如提取液有色要 用白陶土脱色素; 滴定过程宜迅速,一般不超过分钟。以防其他杂质 还原 2,6 染料; 2,6二氯酚靛酚染料不稳定,易氧化,临用前要标 定。 5、 叶绿素 a、b 在蓝柴光区也有吸收峰,能否用

22、这一吸收峰波长进 行叶绿素a、b 的定量分析?为什么? 答:不能,因为在蓝柴光区类胡萝卜素也有吸收峰,会干扰叶绿 素的吸收,不能准确测定叶绿素 a 、b 的含量。 6、 测定活性时,为什么要设照光对照管和暗对照管? 答:照光对照管是为了进行对照,暗中空白管是为了进行参比。 设照光对照管和暗中空白管可以减少误差。 设照光对照管是因为活性是以抑制光化还原的 50%为一个 酶活性单位来表示, 所以必须设照光对照管, 即不加酶液的对 照,才能计算出活性;而暗中对照管是作为比色时的参比管, 是为了消除来自试剂、操作以及仪器等的误差。 7、 植物缺素病症有的出现在顶端幼嫩枝叶上, 有的出现在下部老 叶上,

23、为什么?举例加以说明。 答: 有些植物必需元素在植物体内是可以移动的 , 如果培养过程中 缺乏时,新叶的生长可以从老叶中夺取,病症出现在下部老叶 上,如 N、P、K 和; 而有些必需元素在植物体内是不容易移 动的,当溶液中缺乏这些元素时,新叶生长所需的元素不能 从老叶中夺取,所以病症往往表现在顶端幼嫩枝叶上,如 S、 和等。 8、 作物溶液培养过程应注意哪些关键技术? 答:作物溶液培养过程中,要注意下列要点: 1. 培养液必需是平衡液、值要适宜 2. 营养液要通气 3. 及时更换或补充营养液 4. 培养容器不能透光 5. 幼苗刚移栽时要注意遮阴 得分 五、计算题(8 分) 16 / 24 用斐

24、林酚试剂法测定植物可溶性蛋白质时,以标准蛋白含量为 横坐标,以 650 吸光度为纵座标,所得标准曲线如下图所示。实验 中称取鲜样 0.5g,用 5 蒸馏水提取,取 0.1 提取液同标准曲线测定 650 处吸光度为 0.300,请从标准曲线查出相应的蛋白质含量() , 根据有关公式,求出每克样品中的蛋白质毫克数。 计算:计算: 中蛋白的含量() C(1000) 1000) 样品 1005/ (0.10.5 10.00 鲜重 式中:C查标准曲线值( g) ; 提取液总体积(); 样品鲜重( g) ; 测定时加样量(); 1000-将微克换算为毫克。 福建农林大学考试试卷(福建农林大学考试试卷(B

25、B 卷)卷) 17 / 24 2006 2007 学年第二学期 课程名称:植物生理生化实验考试时间 90 分钟 专业年级班学号姓名 题号 得分 评卷 人 签字 复核 人 签字 得分 一、名词解释(每小题 2 分,共 20 分) 一二三四五总得分 1、淀粉酶:用于淀粉的非还原端,生成麦芽糖、麦芽三糖、 糊精等还原糖,同时使淀粉浆的粘 度下降。 2、标准曲线:用标准溶液制成的曲线。先配制一系列不同浓度 的标准溶液, 在溶液吸收最大波长下, 逐一测定 吸光度,然后用坐标纸以溶液浓度为横坐标 , 吸 光度为纵坐标作图, 绘制一条通过原点的直线 , 即标准曲线。 3、电泳:各种生物大分子在一定的条件下,

26、可以解离成带电电 荷的颗粒,这种带电颗粒在电场的作用下向相反的电 极移动的现象。 4、酶的比活力:代表酶制剂的纯度。用每毫克蛋白所含的酶活 力单位数表示。对于同一种酶来说,比活力愈 大,表示酶的纯度愈高。 5、硝酸还原酶:是植物氮素同化的关键酶,它催化植物体内的 硝酸盐还原为亚硝酸盐。 硝酸还原酶活性可由产 生的亚硝态氮的量表示。一般单位鲜重以 N g ( g h )为单位。的测定可分为活体法 18 / 24 和离体法。 6、溶液培养:是在含有全部或部分营养元素的溶液中培养植物 的方法。 7、 种子生活力: 指种子发芽的潜在能力或种胚所具有的生命力。 8、逆境:对植物生长不利的外界环境。 9、

27、超氧化物歧化酶() :普遍存在于动、植物体内,是一种清除 超氧阴离子自由基的酶。 10、光合作用:植物、藻类和某些细菌利用叶绿素,在可见光 的照射下,将二氧化碳和水转化为葡萄糖, 并释 放出氧气的生化过程。 得分 二、填空题(每格 1 分,共 32 分) 1、用斐林酚试剂法测定植物可溶性蛋白质含量受还原物质、酚类物 质和柠檬酸等到物质的干扰。 2、用茚三酮显色法测定植物组织氨基酸时,加入可以防止空气氧 化 , 以抗坏血酸为还原剂 可提高反应的灵敏度,并使颜色稳 定。 3、用茚三酮显色法测定植物组织氨基酸含量时,茚三酮溶液与氨 基酸共热生成氨,氨与茚三酮和还原性茚三酮反应, 生成_蓝紫色的二酮茚

28、胺。该化合物颜色的深浅与氨基酸的 含量成正比,可通过测定 570 处的光密度,求出氨基酸 的含量。 4、 在测定淀粉酶的活性时, 将酶液和淀粉溶液分别放在 40水浴 中预保温,其目的是 提高酶测定的活性。 19 / 24 5、测定淀粉酶活性时,3,5二硝基水杨酸试剂()的作用是与 还原糖显色生成棕红色的 3-氨基-5-硝基水杨酸 和终止酶活性。 6、聚丙烯酰胺凝胶电泳分离过氧化物同工酶实验中,聚丙烯酰胺 凝胶是由单体丙烯酰胺、交联剂、加速剂和催化剂聚合交 联成三维网状结构的凝胶。 7、测定硝酸还原酶活性的方法有活体法和离体法。 8、在研究植物矿质元素中 ,常用的植物溶液培养法有水溶液培养 法、

29、砂基培养法和气栽法等。 9、水培时要选用黑色容器装营养液,这是为了防止藻类滋 生。 12、活体法酶促反应在暗条件下进行,以防止亚硝酸盐还 原为氨。 13、植物呼吸强度的测定方法有 :小筐子法、 氧电极法和 微量呼吸检压法等。 14、测定植物光合作用的方法有:改良半叶法、 红外线 2 气 体分析法、 氧电极法和微量呼吸检压法等。 得分 三、选择题(每题 1 分,共 10 分) 1、测定淀粉酶活性时,最适宜的反应温度和值是(C) A、37 ,4.5B、37 ,7.0C、40 , 5.6 2、酶的分离提纯过程中,不正确的操作是(C)。 A、需在低温下进行,一般在 05之间 B、酶制剂制成干粉后可保存

30、于 4冰箱中 C、需经常使用巯基乙醇以防止酶蛋白二硫键发生还原 D、提纯时间尽量短 20 / 24 3、斐林()-酚试剂法测定蛋白质浓度时, 应选用的波长是(B)。 A、260B、650C、540D、280 4、叶绿素卟啉环的中心原子是(C) A.B.C.D. 5、 一般而言, 正常植物叶片的叶绿素与类胡萝卜素的比值为 ( B) A、2:1B、3:1C、1 :2D、1:3 6、高等植物的老叶由于缺少某一种元素而发病,下面元素属于这一 类的有( A) A、氮B、钙C、铁 7、在 95%提取液中,叶绿素 a 在红光区的最大吸收峰为 (D)。 A、 470B、649C、 656D、665 8、小蓝子

31、法测定呼吸强度生成的白色沉淀是(A) A、 3 B、()2C、()2D、3 9、法测定种子生活力的试验中,活种子的现象为 (A)。 A、种胚全部染成红色B、种胚全部未染色 C、种胚全部染成黑色D、种胚非关键部位染色,而胚根和 胚芽的尖端都不染色 10、呼吸作用的底物为(A)。 A、有机物和 O2B、 2 和 H2OC、有 机物和 2 得分 四、问答题(7 题任选 6 题答。每小题 5 分,共 30 分) 1、 简述分光光度计的使用方法。 答:开启电源开关,预热约 20 打开样品室选择需要的波长,将选择开关扳到“T” (透光 率)位置后,调节“0”旋钮,使读数显“0.00” ,然后合 21 /

32、24 上样品室盖,调节“100%” ,旋钮使读数显示“100” 放空白于比色皿架上,拉动拉杆,使空白进入光路,按 调整“0”和“100%” 再将选择开关扳至“A” (吸光度)位置后,调节吸光度调 零旋钮,使读数显示“0.00” 将待测样品移入光路,读出吸光度“A” 。 2、 简述斐林酚试剂法测定植物可溶性蛋白质的原理。 答:斐林酚试剂法结合了双缩脲试剂和酚试剂与蛋白质反应, 其中包括 2 步反应: (1)是在碱性条件下,与铜试剂作用生 成蛋白质-铜络合物; (2)是此络合物将磷钼酸、 磷钨酸试剂 还原,生成磷钼蓝、磷钨蓝的深蓝色混合物,颜色深浅与蛋 白质含量成正相关。 在 650 是比色测定的灵敏度比双缩脲法 高 100 倍。由于肽键显色效果增强,从而减少了因蛋白质种 类引起的偏差。 该法适于微量蛋白质的测定 (范围为 5

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