培养基的认识及选择

1、培养基的理解和选择，培养基的组成，营养素：水，蛋白胨，肉膏，牛肉膏，糖醇，血液，无机盐，鸡蛋，动物血清，生长因子(Vit，aa，嘌呤，嘧啶等。)。氮源、氮源和碳源、无糖、碳源和能源、氯化钠：维持酶活性、调节细菌内外渗透压、磷酸盐：缓冲作用、培养基组成、凝固物质：琼脂是最常用的半乳糖胶，由花椰菜提出。它100%溶解，40%固化。它可以用来改变培养基的物理性质(固体或半固体)。培养基、抑菌剂和指示剂的组成：不是细菌生长和繁殖所必需的，而是细菌选择、培养基鉴定和结果判断所必需的。常用的指示剂包括：酚红、中性红、甲基红、溴甲酚紫、溴百里酚蓝、中国蓝等酸碱指示剂。美兰是一种常用的氧化还原指示剂。常用的抑

2、菌剂包括胆盐、亮绿、亚硫酸钠、亚硒酸钠、一些染料和一些抗生素。培养基分类，液体培养基：牛肉汤(牛肉膏1%蛋白胨0.5%氯化钠pH7.4)，半固体培养基：液体培养基0.20.5%琼脂，固体培养基：液体营养素2%琼脂，根据物理性质，培养基分类，基础培养基：是其他培养基的基础。如普通肉汤、普通琼脂平板、斜面、高级营养培养基：BAP、培养基、鲁氏血清斜面选择培养基：SS平板、BS平板、Mac平板等。鉴定培养基：糖发酵管、MIU、起亚、TSI等。特殊培养基：厌氧培养基、高渗培养基等。根据用途，常用培养基，血琼脂平板巧克力平板淋病奈瑟菌平板念珠菌显色平板麦克平板EMB平板TCBS平板M-H平板M-H血平板

3、运输培养基，血琼脂平板，适用于观察各种细菌的生长，判断细菌菌落的溶血形态-溶血环：菌落周围为绿色，红细胞不完全溶解-溶血环：菌落周围的培养基中的红细胞被完全破坏。溶血：非溶血性，巧克力板，主要用于分离嗜血杆菌：含有和添加万古霉素，以抑制革兰氏阳性菌，但有时-溶血性链球菌会形成草绿色的溶血环，大多数革兰氏阴性菌会生长，淋球菌板，用于分离淋球菌，添加万古霉素和多粘菌素B溶液，以抑制革兰氏阳性菌和真菌的生长，念珠菌显色板，鉴定培养基，用于分离酵母样真菌：不同的真菌显示不同的颜色菌落，MAC板， 选择性培养基：非发酵菌鉴定抑制剂胆盐用于肠道致病菌的分离和培养：中性红用于抑制革兰氏阳性菌指标：分解乳糖的

4、细菌和不分解乳糖的细菌不能分解乳糖，但非致病菌能分解乳糖，SS平板，强选择性培养基：柠檬酸钠、胆盐和硫代硫酸钠，是志贺氏菌和沙门氏菌的分离抑制剂，与亮绿配合抑制肠道非致病菌和大多数大肠杆菌。 其中，胆盐也能抑制革兰氏阳性菌。指示中性红色沙门氏菌的菌落特征为无色透明，H2S产物与培养基中三价铁离子的反应为黑色中心。志贺氏菌菌落特征：无色、不透明或透明，边缘整齐；当以曙红和亚甲蓝为指示剂细菌分解乳糖时，EMB平板和弱选择性培养基抑制产酸，使曙红和亚甲蓝结合成紫红色化合物；有时不分解乳糖的具有金属光泽的菌落是无色或灰白色的；一些细菌产生过多的碱，并出现蓝色菌落。TCBS平板硫代硫酸盐柠檬酸盐胆汁盐蔗

5、糖琼脂培养基，分离霍乱弧菌和副溶血弧菌，用碱性琼脂胆酸钠、牛胆汁粉、硫代硫酸钠和柠檬酸钠培养。较高的酸碱度可以抑制革兰氏阳性菌和大肠杆菌。氯化钠可以刺激霍乱弧菌的生长。百里酚蓝和溴百里酚蓝用作指示剂。霍乱弧菌分解蔗糖产生酸，菌落呈黄色，半透明，圆形，扁平。副溶血弧菌粘稠，不易搅动，不分解蔗糖，菌落蓝绿色，半透明，大而平，有粘性。用于细菌药敏试验的琼脂扩散法(K-B法)胸苷核苷酸含量低，不干扰磺胺类药物的测定，控制钙、镁离子的浓度，不干扰氨基糖苷类药物的测定。将5%脱纤维羊血加入M-H琼脂中进行链球菌药敏试验，运输培养基，阿米卡运输培养基：支原体培养拭子卡里-布莱尔运输培养基：弯曲杆菌、沙门氏菌

6、和志贺氏菌的标本采集和保存，缓冲甘油盐水保存液：粪便标本保存改良卡里-布莱尔运输培养基：厌氧标本，培养基选择，大多数细菌培养标本：血平板，巧克力平板粪便培养标本：EMB、SS、MAC、TCBS酵母样真菌培养标本：念珠菌显色平板淋病奈瑟菌培养标本：淋病奈瑟菌平板尿液标本：方法：平板分隔划线，将标本均匀涂抹在平板培养基边缘的一小部分(一个区域)；然后，用火焰对接种环进行灭菌，冷却后，仅通过第一区域2-3次，然后连续划线(作为第二区域)；反过来，它可以用来划3 5个区域和用火焰消毒接种环。目的：分离单个菌落，用培养基划线接种。方法：用无菌接种针采集菌落或培养物，从培养基中心向管底约0.305厘米处刺入，然后沿穿刺线从接种针中穿出。目的：为微量生化管接种，标记培养基接种。方法：液体接种时，左手握住培养基和菌种管，右手握住接种环，在小指、无名指和中指之间拔出并握住棉塞，用火焰对试管口进行灭菌，将菌种浸入灭菌冷却后的接种环中，倾斜液体培养基管，先在管壁和液面交界处研磨(研磨后， 试管直立后，液体可以浸没接种物)，然后将其在液体中