课题3　分解纤维素的微生物的分离 (2)

1、课题3 分解纤维素的微生物的分离,基础知识-解决为什么的问题,一、纤维素,1、纤维素是地球上含量最丰富的多糖类物质,2、植物每年产生的纤维素超过70亿吨,分布在植物的根、茎、叶中,3、棉花是自然界中纤维素含量最高的天然产物,地球上每年产生这么多的纤维素，为什么没有被纤维素淹没？,二、纤维素酶（要记住）,纤维素酶是一种复合酶 它至少包括三种组分，即C1酶、 CX酶和葡萄糖苷酶 前两种酶使纤维素分解成纤维二糖 第三种酶将纤维二糖分解成葡萄糖,纤维素酶水解滤纸实验,加入了纤维素酶,未加入纤维素酶,三、刚果红,1、是一种染料,2、它可以与纤维素形成红色复合物,并不和纤维二糖、葡萄糖发生这种反应,四、纤

2、维素分解菌的筛选,1、纤维素分解菌的筛选方法,2、纤维素分解菌的筛选方法的原理,刚果红染色法,通过颜色反应直接对微生物进行筛选,当纤维素被纤维素酶分解后 刚果红-纤维素的红色复合物就无法形成 培养基中会出现以纤维素分解为中心的透明圈 我们可以通过是否产生透明圈来筛选纤维素分解菌,1.下列关于纤维素酶的说法，错误的是（ ） A. 纤维素酶是一种复合酶，至少包括三种 B. 纤维素酶可把纤维素分解成葡萄糖 C. 纤维素酶可用于去掉植物的细胞壁 D. 葡萄糖苷酶可把纤维素分解成葡萄糖,2.利用刚果红法可以筛选出纤维素分解菌，下列说法错误的（ ） A. 刚果红能与纤维素形成红色复合物 B. 刚果红能与纤

3、维二糖形成红色复合物 C. 刚果红不能与葡萄糖形成红色复合物 D. 若培养基上产生了透明圈，则说明已筛选出了纤维素分解菌,实验设计-解决怎么操作的问题,1土壤取样,2选择培养,3梯度稀释,4将样品涂布到鉴别纤维素 分解菌的培养基上,5挑选产生透明圈 的菌落,一、土壤取样,应选择富含纤维素的环境 如树林中多年落叶形成的腐殖土，多年积累的枯枝败叶等 也可将滤纸埋在土壤中（10cm）一个月左右，这样会有能分解纤维素的微生物生长,二、选择培养,阅读资料二“选择培养基”，回答问题,1、纤维素分解菌选择培养基属于_（固体、液体）培养基，原因是_。,液体,没有添加琼脂成分,2、该培养基对微生物_（具有，不具

4、有）选择作用。 如果具有，其选择机制是 。,以纤维素粉为唯一碳源，能分解 纤维素的微生物可以大量繁殖,具有,选择培养的操作方法,将土样加入装有30 mL选择培养基的锥形瓶中 将锥形瓶固定在摇床上，在一定温度下震荡培养12天直至培养液变浑浊 也可重复选择培养,为什么选择培养能够“浓缩”所需的微生物？,在选择培养的条件下，可以使那些能够适应这种营养条件的微生物得到迅速繁殖，而那些不适应这种营养条件的微生物的繁殖被抑制，因此可以起到“浓缩”的作用,三、梯度稀释（前面学过了）,四、将样品涂布到鉴别纤维素分解菌的培养基上,1、制备培养基：（学过了） 2、涂布平板：将稀释度为104106的菌悬液各0.1 mL涂布在 培养基上，30培养箱中倒置培养,五、刚果红染色，挑选产生透明圈的菌落,方法一：先培养微生物，再加入刚果红进行颜色反应,方法二：在倒平板时就加入刚果红,颜色反应基本上是 纤维素分解菌的作用,操作繁琐