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文档简介

1、实验四 可溶性糖含量测定,可溶性总糖的测定,糖,人体生命 活动,葡萄干含糖量70%80%,香蕉含糖量20%,含糖量高的食品,石榴含糖量为17%,红胡萝卜含糖量为8%,西红柿含糖量为2%,含糖低的食品,菠菜含糖量为2%,芹菜含糖量为2%,西瓜含糖量为4%,一、实验目的,二、实验原理,糖类遇浓硫酸脱水生成糖醛或其衍生物,反应如下:糠醛或羟甲基糠醛进一步与蒽酮试剂缩合产生绿色络合物,其在可见光区620nm波长处有最大吸收,且其光吸收值在一定范围内与糖的含量成正比关系。,三、实验材料、仪器及试剂,1材料:波菜 2仪器:分光光度计 水浴锅 试管 50ml容量瓶(2个) 试管架 加样枪 漏斗 滤纸 三角瓶

2、 剪刀 3试剂:(1)100g/ml标准葡萄糖:AR级葡萄糖50mg,蒸馏水溶解,定容至500ml。(2)蒽酮试剂:0.2g蒽酮溶于100ml浓H2SO4中当日配制使用,四、实验方法,1葡萄糖标准曲线的制作取7支具塞试管,编号,按下表数据配制一系列不同浓度的标准葡萄糖溶液。,在每管中均加入4ml蒽酮试剂,封上封口膜摇匀后,置沸水浴中煮沸10分钟,取出冷却至室温,在620nm波长下比色,测各管溶液的吸光强度(OD),以标准葡萄糖含量为横坐标,光吸收值为纵坐标,作出标准曲线。,葡萄糖标准曲线的公式为: y=0.4826x+0.0003 (x葡萄糖浓度,y为OD值),2,过滤,滤液收集于50ml容量瓶后定容,2样品中可溶性糖的提取,吸1ml提取液(比色空白用 1ml蒸馏水)于具塞刻度试管,加4ml蒽酮试剂(注意:浓 硫酸遇水会产生大量的热),沸水浴10分钟后取出, 冷却至室温,在波长620nm下比色, 记录吸光度,封上封口膜后,轻轻摇匀,3糖含量测定,放入烧杯中,加水25ml,在沸水浴中加热10min 取出后冷却,吸取提取液2ml,置另一50ml容 量瓶中定容,摇匀测定,将菠菜叶剪碎,称取1g,五、结果计算,六、注意事项,加蒽酮试剂时应缓慢加入,以免产生 大量热量而爆沸,灼伤皮肤,如出现 上述情况,应迅速用自来水

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