临床常用免疫学检验.ppt

1、,临床常用免疫学检查,良乡医院检验科 李影 联系电话：81356438 Email:,本章要点： 掌握 病毒性肝炎血清标志物检查的临床意义 了解 血清免疫球蛋白检测、 补体测定、 感染免疫检测：ASO、 肿瘤标志物检测、 自身抗体检查的临床意义。,一、免疫球蛋白测定（Immunoglobulin-Ig）,免疫球蛋白: 指由浆细胞产生的具有抗体活性和 （或）抗体样结构的球蛋白。,5种: IgG：含量最多，惟一能通过胎盘的Ig。 IgA：血清型和分泌型2种； IgM：最早产生的Ig，分子量最大 ； IgD： IgE：含量最少的Ig；,免疫球蛋白的检测方法： 单扩散法、ELISA法和免疫比浊法。,免

2、疫比浊法： 血清 IgG： 7.0 16.0 g/L； IgA： 0.57 4.14 g/L； IgM： 0.5 2.7 gL；,ELISA法 血清 lgE： 0.10.9 mgL,【参考值】,【临床意义】 1免疫球蛋白增高,（l）单克隆性免疫球蛋白增高：仅某一种Ig增高。见于免疫增殖性疾病。如多发性骨髓瘤、巨球蛋白血症等。,（2）多克隆性免疫球蛋白增高：多种Ig同时增高。见于慢性感染、自身免疫病、淋巴瘤等。,（3） IgE增高： IgE是亲细胞抗体； 与变态反应、寄生虫病及皮肤过敏有关 。,【临床意义】 2免疫球蛋白减低,免疫球蛋白减少症： 当IgG6.0gL、IgA和IgM均0.4gL。,

3、见于各类先天性或获得性体液免疫缺陷病。 如先天性无丙球蛋白血症；长期使用免疫抑制剂。,二补体测定,（）总补体溶血活性测定（CH50）,【参考值】 CH50： 50100 Uml,【临床意义】 反映补体（C1C9）传统途径活化的活性程度。,CH50 增高：急性炎症、组织损伤和某些恶肿瘤；,2. CH50降低：见于各种免疫复合物疾病， 如肾小球肾炎、自身免疫性疾病（如SLE）、感染性疾病、慢性肝病等。,二补体测定 （二）C3 含量测定,C3是由肝细胞合成的2-球蛋白。 在补体系统中含量最高； 是经典和替代激活途径的枢纽，起关键作用。,【参考值】 免疫比浊法： 0.83 l.77 g/L,C3 含量

4、测定【临床意义】,1. C3增高：急性炎症、传染病早期、肿瘤和排异；,2.C3降低：急性肾小球肾炎诊断和鉴别诊断,急性肾小球肾炎：6周内有70的病人C3降低；,链球菌感染后肾炎（ C3降低）与 病毒感染后肾炎（正常）的鉴别诊断；,判断病程转归的指标： 78%的狼疮肾病人C3降低，病情缓解后可恢复；,二补体测定 （三）C4（1-球蛋白）含量测定,【参考值】 免疫比浊法：0.120.36 g/L,【临床意义】,1C4增高： 见于急性风湿热、皮肌炎、关节炎和组织损伤。,2C4降低： 见于自身免疫性肝炎、SLE、类风关、IgA型肾病、1型糖尿病、胰腺癌等。,三肿瘤标志物检查（tumor marker，

5、TM）,TM是指肿瘤细胞所产生或分泌的某种蛋白质，或其释放的细胞结构某个部分，与肿瘤的存在和发生发展过程密切有关，故称为肿瘤标志物。,生化本质：蛋白质、酶类、激素、核酸和糖蛋白；,肿瘤标志物检测意义： 肿瘤普查、辅助诊断、疗效观察和预后判断。,（一）甲胎蛋白测定（ AFP或-FP） 【参考值】 20gL,1.原发性肝细胞癌：,2.生殖腺胚胎瘤（睾丸癌、卵巢癌、畸胎瘤等）、 胃癌、胰腺癌及少数转移癌增高；,【临床意义】 AFP增高：,3.病毒性肝炎、肝硬化AFP也有不同程度升高；,4.妊娠34个月孕妇AFP开始升高； 78个月达高峰，以后下降。,（二）癌胚抗原测定（CEA）,【参考值】 5 g/

6、 L,【临床意义】,CEA明显升高： 90%胰腺癌、74%结肠癌、70%肺癌、60%乳腺癌患者，常超过60 g/ L。 病情好转时浓度下降，病情加重时CEA可升高。,2. CEA轻度升高： 胰腺炎、结肠炎、肝脏疾病、肺气肿及支气管哮喘时；,3.胃癌诊断：检测胃液和唾液CEA有一定价值。,（三）前列腺特异抗原测定,【参考值】 T- PSA 4.0 F/T 0.25 F-PSA 0.8 g/L;,【临床意义】,1. 60%90以上前列腺癌病人血清PSA升高； 术后可见PSA明显下降。 术后PSA升高，提示可能有转移或复发。,2. 良性前列腺瘤、前列腺增生症或急性前列腺炎时，14%可见PSA轻度升高

7、。,（四）EB病毒壳抗原IgA类抗体测定,【参考值】 阴性,【临床意义】 抗-VCA IgA阳性见于：,可作为鼻咽癌的诊断、疗效及预后判断的指标； 阳性符合率90，病情好转时血清抗VCA -IgA滴度下降，肿瘤复发时则其滴度上升；,支气管肺癌、甲状腺癌、慢性鼻咽部炎症，也偶呈阳性； 正常人约有34的阳性率。,（五）糖蛋白糖脂类标志物测定,胰腺癌增高，阳性率8595%； 连续检测病情进展、手术疗效、复发判断；,1. CA19-9 ： 参考值 37g/L,消化道癌：胆管癌及胃癌增高； 加测CEA胃癌诊断符合率可达85%。,急性胰腺炎、胆石症、急性肝炎、肝硬化也有不同程度升高。,（五）糖蛋白糖脂类标

8、志物测定,卵巢癌明显升高、阳性率达60%90%；,2. CA-125 ： 参考值 40 g/L,宫颈癌、乳腺癌、肝癌、胃癌、直肠癌、肺癌 均有增高；,3. 36%的良性卵巢瘤、子宫肌瘤、肝硬化失 代偿也可增高。,（五）糖蛋白糖脂类标志物测定, 30%50%的乳腺癌病人可见其明显升高。 早期乳腺癌阳性率低（20%30%），用于乳癌治疗后有无复发及乳癌是否转移的监测。,3. CA15-3： 参考值2.7g/L, 转移性卵巢癌、结肠癌、支气管癌、 孕妇亦可见增高。, 非恶性肿瘤（5%33%）也有增高。,（五）糖蛋白糖脂类标志物测定,4. CA242 ： 参考值20g/L, 胰腺癌、结肠癌的标志物。

9、胰腺癌（68%79%） 结肠癌（55%80%） 增高； 胃癌（44%）,四感染免疫检查,抗链球菌溶血素“O”试验(ASO),【参考值】 胶乳法400单位（定性阴性） 免疫比浊法：0200 IUL,【临床意义】 ASO增高：,表示近期内A群溶血性链球菌感染。 辅诊风湿性疾病、急性肾小球肾炎等。 ASO滴度逐步下降表明疾病缓解； 抗体恒定在高水平多为疾病活动期。,金葡、铜绿假单胞菌感染可抑制ASO活性（假阴性）,五自身抗体检查,【参考值】 阴性（血清1:10稀释）,ANA是自身免疫性疾病的筛选试验。 血清稀释度高于1:40为阳性，1:320为强阳性。,1SLE、混合性结缔组织病、自身免疫性肝炎、桥

10、本甲状腺炎、重症肌无力、类风关等；,（）抗核抗体测定（ANA）,2服用抗心律失常药物（普鲁卡因） 服用降压药（肼苯达嗪） 可阳性 。,五自身抗体检查 （二）抗脱氧核糖核酸抗体测定（anti-DNA）,抗双链 DNA抗体（anti-ds-DNA） 抗单链 DNA抗体（anti-ss-DNA）,【参考值】 免疫荧光法、间接酶标抗体染色法、 滴金免疫试验：阴性,【临床意义】,抗ds-DNA抗体阳性：对SLE高度特异的指标； 抗ss-DNA抗体阳性：见于SLE但不具特异性 ；,五自身抗体检查 （三）抗可提取性核抗原抗体测定（anti-ENA）,临床上常检测的有以下10余种： 抗Sm、RNP（特异性强鉴

11、别诊断）、RiB、SS-A、 SS-B、JO-l、Scl70、着丝点、PMl、核仁等；,【临床意义】,1抗RNP抗体阳性：SLE、各种风湿病、类风关、进行性全身性硬化症。,2. 抗Sm抗体阳性：SLE标志抗体（阳性率2545%）； 抗Sm抗体阳性亦见于胶原重叠综合征。,3抗SS-A和SS-B阳性： 干燥综合征的特异性抗体。,抗Scl-70抗体：弥漫性硬皮病的标志抗体；,4其他antiENA阳性：,抗JO-l抗体：皮肌炎诊断有一定价值；,抗RiB抗体：可作为狼疮活动的诊断指标；,抗U1-RNP抗体： 混合性结缔组织病（MCTD）的标志性抗体。,五自身抗体检查 （四）类风湿因子测定（rheumat

12、oid factor，RF）,【参考值】 胶乳凝集法（低于1:10）； ELISA法：阴性 免疫比浊法： 220IUL,【临床意义】,1类风湿性疾病：阳性率70%90%；,2. 其它自身免疫病：多发性肌炎、硬皮病、 干燥综合症、SLE、自身免疫性溶贫、慢活肝；,3. 某些感染性疾病： 传单增、结核病、感染性心内膜炎等可呈阳性。,六. 病毒性肝炎血清标志物检查,1.甲型肝炎病毒（Hepatitis A virus HAV） 2.乙型肝炎 病毒（HBV） 3.丙型肝炎病毒（HCV） 4.丁型肝炎病毒（HDV） 5.戊型肝炎病毒（HEV） 6.庚型肝炎病毒（HGV）,甲型肝炎病毒抗体：IgM、IgG

13、 乙肝表面抗原（HBsAg）表面抗体（HBsAb）。 乙肝病毒 e抗原（HBeAg） e抗体（HBeAb）。 乙肝病毒核心抗体：HBcAb总抗体、HBcAb IgM 乙肝病毒DNA测定 3.丙型肝炎病毒抗体：lgM和IgG类。 4. 丁型肝炎病毒 5.戊型肝炎病毒,（一）、乙型肝炎的血清学检查1,1、乙肝五项（两对半） （1）HBsAg 称为乙肝表面抗原，也称澳抗，构成HBV的表层结构。 其阳性意义：患者处于HBV感染状态。 急性潜伏期，HBsAg先于ALT和临床症状出现。 急性期，HBsAg为高滴度。 慢性期，HBsAg持续阳性，无症状携带者HBsAg为阳性，肝功可正常。,（2）HBsAb

14、称为乙肝表面抗体，是 HBsAg刺激机体产生的保护性抗体。 其阳性的意义： 提示乙肝感染处于恢复期。 即往感染过乙肝，现在仍有免疫力。 注射疫苗后抗-HBs阳性，说明疫苗接种成功。,（3）HBeAg 称为乙肝e抗原，是 HBcAg切去一部分后由149个氨基酸组成的多肽，在HBV复制时生成，再从感染的肝细胞分泌入血，HBeAg的多少与HBV的复制量成正比，并与 HBsAg的含量平行，在 HBsAg消失前转阴。 其阳性的意义： a、病人体内有大量HBV复制，具有传染性。 b、急性肝炎和慢性活动期，HBeAg均可为阳性 c、急性肝炎三个月后，HBeAg转阴，表示预后佳 d、孕妇HBeAg阳性，母婴传

15、播率可达90%-100% e、可作为抗病毒药物疗效的考核指标。,（4）HBeAb 称为乙肝e抗体，多见于HBeAg转阴的病人，它意味着HBV大部分已被清除或被抑制，HBV生成减少，是传染性降低的一种表现。 但是HbeAb不是保护性抗体，不能抑制HBV的复制。当HBeAg转阴，抗HBe阳转，表示预后佳，病情好转。,（5）HBcAb 称为乙肝核心抗体 ，其阳性的意义： a、急性乙肝窗口期的辅助诊断。（窗口期是指急性感染中，有一段时间滴度已下降至测不出，但相应抗体尚未达到可检出的程度） b、献血员筛查，仅查HBsAg不够，应加查抗HBc，尤其是当抗HBc高滴度时，不宜作献血员。 C、观察疫苗的安全性

16、 ，如接种后产生抗HBc，则认为该批疫苗不纯，不宜使用。,（二）、乙型肝炎的血清学检查2,2、其它标志物: HBV-DNA、DNAP、前S基因及其抗体、X基因抗原及其抗体。 3、乙型肝炎的血清学标志物 的综合判断 几种常见的乙肝五项结果,病毒标记检测（乙肝五项）,序号 HBsAg 抗-HBs HBeAg 抗-Hbe 抗-HBc 1+ -+-+ 俗称乙肝大三阳说明患者是慢性肝炎，有传染性。 2 +-+ 急性乙肝感染阶段或慢性乙肝表面抗原携带者，传染性弱些。 3+ - -+ 乙肝趋向恢复-慢性携带者，传染性弱；长期持续可转变为肝癌。 4- +- -+ 既往感染过乙肝-有免疫力，不典型恢复期；或急性乙肝感染期 5-+ 既往乙肝感染，属于急性感染恢复期，也少数人仍有传染性 。 6-+ 过去有乙肝感染或现在正处于急性感染。 7-+- 以前打过乙肝疫苗或以前感染过乙肝。 8-+-+ 急性乙肝恢复期，以前感染过乙肝。 9 +-急性感染早期或者慢性乙肝表面抗原携带者传染性弱。 10+ -+ -慢性乙肝表面抗原携带者易转阴或者是急性感染趋向恢复 。 11+-+- 早期乙肝感染或者慢性携带者，传染性强。 12+-+ + 急性乙肝感染趋向恢复或者为慢