现代实验方法 — 样品制备 PPT课件.ppt

1、第三章 样品制备,学习指南,观察思考,课外阅读,复习自测,退出本章,演示文稿,本章目录,目的要求 样品前处理在色谱分析过程中是一个既耗时又极易引进误差的步骤，样品处理的好坏直接影响色谱分析的最终结果，因此，为了提高分析测定效率，改善和优化色谱分析样品制备方法和技术是一个重要问题。 通过本章的学习，目的是使学生掌握溶剂萃取、固相萃取、超临界流体萃取、微波萃取以及衍生化技术等色谱分析用样品的前处理方法，了解有关样品前处理仪器的一些相关知识。 学习要点溶剂萃取技术；蒸馏及精馏技术；固相萃取技术；气体萃取技术；超临界流体萃取技术； 微波萃取技术；衍生化技术 技能要点溶剂萃取技术；蒸馏及精馏技术；固相萃

2、取技术；超临界流体萃取技术；波萃取技术,学习目标,学习指南,本节首页,退出本章,第三节 固相萃取技术,一、固相萃取概念,二、固相萃取原理,五、 HPLC与SPE的比较,三、装置及操作程序,四、溶剂的选择,本节首页,退出本章,六、固相微萃取,七、气体萃取（顶空技术）,一 、固相萃取(SPE)概念,本节首页,退出本章,SPE ：Solid Phase Extraction 是一种液相色谱分离，利用固体吸附剂将液体样品中的目标化合物与干扰化合物分离，达到分离和富集目标化合物的目的。,二 、固相萃取的模式及原理,本节首页,退出本章,反相固相萃取 正相固相萃取 离子交换固相萃取, 阴离子交换 阳离子交换

3、,（一）、反相固相萃取,本节首页,退出本章,流动相：极性（水溶液）或中等极性 固定相：非极性。 分离对象：中等到非极性物质。,本节首页,退出本章,分析物中的CH键 + 硅胶表面官能团吸附极性溶液中的有机分析物保留在SPE。 用非极性溶剂解吸吸附在固定相中的目标物质。,1、反相固相萃取原理,本节首页,退出本章,2、常用反相固相萃取柱,LC-18、LC-8 ：标准的单键合硅胶 ENVI-18、ENVI-8 ：聚合键合类填料 ENVI-Chrom P：苯乙烯：疏水 ENVI-Carb：含碳,本节首页,退出本章,（二）、正相固相萃取,流动相：非极性、中等极性 固定相：极性。 分析物质：极性、中等极性、

4、非极性,本节首页,退出本章,1、正相固相萃取原理,保留取决于分析物的极性官能团与吸附剂表面的极性官能团之间的相互作用。 用比样品本身更极性的溶剂洗脱吸附的分析物质。,本节首页,退出本章, 极性官能团键合硅胶 LC-CN， LC-NH2， LC-Diol 极性吸附物质 LC-Si， LC-Florisil， ENVI-Florisil， LC-Alumina,2、常用正相固相萃取柱,知识窗,本节首页,退出本章,（三）、离子交换固相萃取,适用于带有电荷的化合物（水溶液、有机溶液）。 原理：静电吸引，化合物上的带电荷基团与键合硅胶上的带电荷基团之间的吸引。 分为：阴离子交换和阳离子交换。,1 、阴离

5、子（负电荷）交换,本节首页,退出本章,LC-SAX、LC-NH2：脂肪族季铵类盐 + 硅胶,2、阳离子交换,本节首页,退出本章,LC-SCX：磺酸基；LC-WCX：羧酸基团,本节首页,退出本章,（四） 溶剂极性的影响, 目标化合物在极性/非极性溶剂中的溶解度，这主要涉及淋洗液的选择。 目标化合物有无可能离子化（可用调节pH值实现离子化）。,本节首页,退出本章,（四） 溶剂极性的影响, 目标化合物有无可能与吸附剂形成共价键。 在吸附剂上吸附点的竞争程度，关系到能否很好分离。,三、固相萃取的装置及操作程序,本节首页,退出本章,固相萃取的装置,本节首页,退出本章,1、固相萃取的装置,本节首页,退出本

6、章,1、固相萃取的装置,本节首页,退出本章,2、操作程序,（1）、活化吸附剂 萃取之前要用适当的溶剂淋洗小柱，以使吸附剂保持湿润，可以吸附目标化合物或干扰化合物。,本节首页,退出本章,2、操作程序,（2）、上样（吸附） 样品倒入活化后的固相萃取小柱，然后利用抽真空，加压或离心的方法使样品进入吸附剂。,本节首页,退出本章,2、操作程序,3、洗涤（去除杂质） 在样品进入吸附剂，目标化合物被吸附后，可先用较弱的溶剂将弱保留干扰化合物洗掉。,本节首页,退出本章,2、操作程序,4、洗脱和收集 再用较强的溶剂将目标化合物洗脱下来，加以收集。,本节首页,退出本章,我来说！,四、SPE分离机制与溶剂的选择,本

7、节首页,退出本章,五、 HPLC与SPE的比较,1、柱子的比较,？,N = L/H,2、塔板数的比较,本节首页,退出本章,六、固相微萃取 SPME,不是将待测物质全部分离出来，通过在样品与固相涂层间的平衡来达到分离。 方法：玻璃纤维浸入样品中残留农药扩散吸附平衡取出玻璃纤维洗脱分析。,本节首页,退出本章,固相微萃取装置,本节首页,退出本章,固相微萃取装置,关键：石英纤维上涂吸附剂 原则：目标化合物是非极性时选择非极性涂层；目标化合物是极性时选择极性涂层。,使用方法,本节首页,退出本章,七、气体萃取（顶空技术）,本节首页,退出本章,七、气体萃取（顶空技术）,本节首页,退出本章,七、气体萃取（顶空技术）,取样品基质（液体和固体）上方的气相部分进行色谱分析。 用途：痕量高挥发性物质的分析测定，气体是挥发性物质的最理想的溶剂。,本节首页,退出本章,1、特 点, 操作简单 可自动化 可变因素多 灵敏度高：检出限可达10-12水平。,本节首页,退出本章,2、分 类,静态顶空：在一个密闭的容器中，样品与样品上方气体（1/2）达到平衡。 动态顶空： “连续气体萃取”方法，不必两相达到平衡。经捕集浓缩后进行测定。,本节首页,退出本章,3、静态顶空过程,本节首页,退出本章,4、动态顶空过程,捕集阱中捕集浓缩。,“烘烤”：载气的流动方向与热解吸时的流动方