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1、如果你看到面前的阴影，那是因为你的背后有阳光。 生物復習資料生物復習資料 高校 0 診生物資料復習 個人研究使用 |Daizy 集 如果你看到面前的阴影，那是因为你的背后有阳光 第 1 页 共 24 页 高中生物常见化合物的元素组成 1 1、各种化合物的元素组成各种化合物的元素组成 糖类：C、H、O 脂质脂肪：C、H、O 固醇：C、H、O 磷脂：C、H、O、N、P 蛋白质：C、H、O、N(P、S 等) 核酸：C、H、O、N、P ATP：C、H、O、N、P 叶绿素：C、H、O、N、Mg 胡萝卜素：C、H 叶黄素：C、H、O1 NADH：C、H、O、N、P NADPH：C、H、O、N、P 说明：糖

2、类、脂肪、固醇（包括胆固醇、性激素和 VD）和叶黄素的组成元 素都只有 CHO。脂质的组成元素主要是 CHO，有些脂质还含有 P 和 N。这里的有 些指的就是磷脂的组成元素有 N 和 P。 磷脂、核酸、ATP、NADH 和 NADPH 的组成元素都只有 C、H、O、N、P。蛋 白质一定含有 C、H、O、N 元素，有的还含有 S、P 等。如血红蛋白含有 Fe、S。 另外上述各种化合物都没有 S，而蛋白质可能含有 S，所以如果哪个有机物含有 S，那么一般可以确定该物质是蛋白质，也就是说 S 是蛋白质的一种特殊元素。 由于二硫键的原因，所以蛋白质基本都含有 S。 叶绿素和类胡萝卜素的组成元素不同，叶

3、绿素含 Mg，类胡萝卜素不含 Mg。 叶绿素 b、c、d 与叶绿素 a 的结构差别不大。-胡萝卜素组成元素只有 C 和 H。 2 2、一些特殊元素参与组成的物质一些特殊元素参与组成的物质 I：甲状腺激素 Fe：血红蛋白 Mg：叶绿素 N:蛋白质、核酸、磷脂、叶绿素、ATP（ADP、AMP）、NADH、NADPH、尿素 P：有些蛋白质、核酸、磷脂、ATP（ADP、AMP）、NADH、NADPH 等 S：血红蛋白等大多数蛋白质；甲硫氨酸、半胱氨酸等含硫氨基酸。 跨膜运输 如果你看到面前的阴影，那是因为你的背后有阳光 第 2 页 共 24 页 细胞的结构和功能 1 1、双层膜结构的细胞器、双层膜结构

4、的细胞器 2 2、单层膜结构的细胞器单层膜结构的细胞器 3 3、无膜结构的细胞器无膜结构的细胞器 特殊的细胞 如果你看到面前的阴影，那是因为你的背后有阳光 第 3 页 共 24 页 分泌蛋白的合成和运输同位素示踪法 细胞核的结构和功能 如果你看到面前的阴影，那是因为你的背后有阳光 第 4 页 共 24 页 光合作用 一、基础知识 如果你看到面前的阴影，那是因为你的背后有阳光 第 5 页 共 24 页 二、影响因素 3. 光合午休现象：因光照过强，温度太高，植物蒸腾作用旺盛，缺水使气孔关闭，二氧化 碳的吸收减少，导致光合速率下降。 4. 提高农作物的产量 如果你看到面前的阴影，那是因为你的背后有

5、阳光 第 6 页 共 24 页 三、色素的提取和分离 细胞的生命历程 一、细胞分化 如果你看到面前的阴影，那是因为你的背后有阳光 第 7 页 共 24 页 二、细胞衰老 老年斑：细胞内色素（脂褐素）随细胞衰老积聚而成 二、细胞凋亡 三、细胞的癌变 如果你看到面前的阴影，那是因为你的背后有阳光 第 8 页 共 24 页 选修一生物技术实践 知识点总结 专题一 传统发酵技术的应用 课题一 果酒和果醋的制作 (一)基本原理 1 酵母菌是异养兼性厌氧菌型真菌，20左右最适宜酵母菌繁殖，酒精发酵时一般将温度控制在 18-25 2、在有氧条件下，酵母菌进行有氧呼吸，大量繁殖。C6H12O66O26H2O6

6、CO212H2O+能量 在无氧条件下，酵母菌能进行酒精发酵。C6H12O62C2H5OH2CO2+能量 3、醋酸菌是异养需氧型细菌,醋酸菌最适生长温度为 32，所以醋酸发酵时一般将温度控制在 30-35， 控制好发酵温度，使发酵时间缩短，又减少杂菌污染的机会。 4、当氧气、糖源都充足时，醋酸菌将葡萄汁中的糖分解成醋酸； C6H12O62O22CH3COOH2CO22H2O 当缺少糖源时，醋酸菌将乙醇变为乙醛，再将乙醛变为醋酸。 C2H5OHO2CH3COOHH2O 如果你看到面前的阴影，那是因为你的背后有阳光 第 9 页 共 24 页 （二）、实验流程： 挑选葡萄冲洗榨汁酒精发酵果酒（醋酸发酵

7、果醋） （三）、实验装置： 1、充气口是在醋酸发酵时连接充气泵进行充气用的；排气口是在酒精发酵时 用来排出二氧化碳的；出料口是用来取样的。排气口要通过一个长而弯曲的 胶管与瓶身相连接，其目的是防止空气中微生物的污染。开口向下的目的是 有利于二氧化碳的排出。使用该装置制酒时，应该关闭充气口；制醋时，应 该充气口连接气泵，输入氧气。 2、酒精检验：果汁发酵后是否有酒精产生，可以用重铬酸钾来检验。在酸性条件下，重铬酸钾与酒精反应 呈现灰绿色。先在试管中加入发酵液 2ML，再滴入物质的量浓度为 3mol/L 的 H2SO43 滴，振荡混匀，最 后滴加常温下饱和的重铬酸钾溶液 3 滴，振荡试管，观察颜色

8、 疑难解答：疑难解答： （1）你认为应该先冲洗葡萄还是先除去枝梗？为什么？ 应该先冲洗，然后再除去枝梗，以避免除去枝梗时引起葡萄破损，增加被杂菌污染的机会。 （2）你认为应该从哪些方面防止发酵液被污染？ 如：要先冲洗葡萄，再除去枝梗；榨汁机、发酵装置要清洗干净，并进行酒精消毒；每次排气时只需 拧松瓶盖，不要完全揭开瓶盖等。 （3）制葡萄酒时， 为什么要将温度控制在1825？制葡萄醋时， 为什么要将温度控制在3035？ 温度是酵母菌生长和发酵的重要条件。2020左右最适合酵母菌的繁殖，因此需要将温度控制在其最适 温度范围内。而醋酸菌是嗜温菌，最适生长温度为 3232，因此要将温度控制在 3030

9、3535。 （4）酵母菌的来源？为什么葡萄酒呈红色？ 在葡萄酒自然发酵的过程中, ,起主要作用的是附着在葡萄皮表面的野生型酵母菌. .在发酵过程中, ,随着酒精 浓度的提高, ,红葡萄皮的色素也进入发酵液, ,使葡萄酒呈现深红色. .在缺氧、呈酸性的发酵液中，酵母菌可以 生长繁殖，而绝大多数其他微生物都因无法适应这一环境而受到制约。 课题二 腐乳的制作 （一）实验原理 1、多种微生物参与了豆腐的发酵，如青霉、酵母、曲霉、毛霉等，其中起主要作用的是毛霉。 2、毛霉是一种丝状真菌，代谢类型是异养需氧型，最适生长温度 1518。产生菌丝的类型：直立菌丝 和匍匐菌丝。毛霉等微生物产生的蛋白酶能将豆腐中

10、的蛋白质分解成小分子的肽和氨基酸；脂肪酶可将 脂肪水解为甘油和脂肪酸。 （二）实验流程： 让豆腐上长出毛霉加盐腌制加卤汤装瓶密封腌制 1、 酿造腐乳的主要生产工序是将豆腐进行前期发酵和后期发酵。 前期发酵的主要作用：1.创造条件让毛霉生长。2.使毛酶形成菌膜包住豆腐使腐乳成型。 如果你看到面前的阴影，那是因为你的背后有阳光 第 10 页 共 24 页 后期发酵主要作用：酶与微生物协同参与生化反应的过程。 2、将豆腐切成 3cm3cm1cm 的若干块。所用豆腐的含水量为 70左右，水分过多则腐乳不易成形。 毛霉的生长：条件:将豆腐块平放在笼屉内，将笼屉中的控制在 1518，并保持一定的湿度。 来

11、源：1.来自空气中的毛霉孢子，2. 直接接种优良毛霉菌种 加盐腌制：将长满毛霉的豆腐块分层整齐地摆放在瓶中，同时逐层加盐，随着层数的加高而增加盐量，接 近瓶口表面的盐要铺厚一些。 食盐的作用：1.抑制微生物的生长，避免腐败变质 2.析出水分，使豆腐变硬，在后期制作过程中不易酥烂 3.调味作用，给腐乳以必要的咸味 用盐腌制时，注意控制盐的用量：盐的浓度过低，不足以抑制微生物的生长，可能导致豆腐腐败变质；盐 的浓度过高会影响腐乳的口味 配制卤汤：卤汤直接关系到腐乳的色、香、味。卤汤是由酒及各种香辛料配制而成的。卤汤中酒的含量一 般控制在 12%左右。 酒的作用：1.防止杂菌污染以防腐 2.调味 酒

12、精含量的高低与腐乳后期发酵时间的长短有很大关系，酒精含量越高，对蛋白酶的抑制作用也越大，使 腐乳成熟期延长；酒精含量过低，蛋白酶的活性高，加快蛋白质的水解，杂菌繁殖快，豆腐易腐败，难以 成块。 香辛料的作用：1.调味作用 2.杀菌防腐作用 疑难解答：疑难解答： （1）利用所学的生物学知识，解释豆腐长白毛是怎么一回事？ 豆腐生长的白毛是毛霉的白色菌丝。严格地说是直立菌丝，在豆腐中还有匍匐菌丝。 （2）为什么要撒许多盐，将长毛的豆腐腌起来？ 盐能防止杂菌污染，避免豆腐腐败。 （3）我们平常吃的豆腐，哪种适合用来做腐乳？ 含水量为 70%70%左右的豆腐适于作腐乳。用含水量高的豆腐制作腐乳，不易成形

13、。 （4）吃腐乳时，你会发现腐乳外部有一层致密的“皮”。这层“皮”是怎样形成的呢？它对人体有害吗？ 它的作用是什么？ “皮”是前期发酵时在豆腐表面上生长的菌丝（匍匐菌丝），对人体无害。它能形成腐乳的“体”，使腐 乳成形。 （5）你认为应该从哪些方面防止发酵液被污染？ 用来腌制腐乳的玻璃瓶，洗刷干净后要用沸水消毒。装瓶时，操作要迅速小心。整齐地摆放好豆腐、 加入卤汤后，要用胶条将瓶口密封。封瓶时，最好将瓶口通过酒精灯的火焰，防止瓶口被污染。 课题三 制作泡菜 （一）实验原理 1.制作泡菜所用微生物是乳酸菌 ，是异养厌氧型细菌。在无氧条件下，将葡萄糖分解为乳酸 。 反应式为：C6H12O6 酶 2

14、C3H6O3+能量。含抗生素牛奶不能生产酸奶的原因是抗生素杀死乳酸菌。 如果你看到面前的阴影，那是因为你的背后有阳光 第 11 页 共 24 页 亚 硝 酸 盐 含 量 发酵时间（d） 2.亚硝酸盐为白色粉末，易溶于水，在食品生产中用作食品添加剂。膳食中的亚硝酸盐一般不会危害人体 健康，被吸收后随尿液排出体外，但在适宜 pH 、温度和一定微生物作用下形成致癌物质亚硝胺。 3.测定亚硝酸盐含量的方法是：比色法 原理是在盐酸酸化条件下，亚硝酸盐与对氨苯磺酸发生重氮化反应 后，与 N-1-萘基乙二胺盐酸盐结合形成玫瑰红色染料，与已知浓度 的标准显色液目测比较，估算泡菜中亚硝酸盐含量。 4.一般在腌制

15、 10 天后亚硝酸盐含量开始降低， 故在 10 天之后食用最好 （二）实验流程 专题六植物有效成分的提取 课题一植物芳香油的提取 （一）基础原理 1.天然香料的来源： 动物：抹香鲸、海狸、麝、灵猫 植物：根、茎、叶、花、果实、种子 芳香油的提取方法：蒸馏、压榨、萃取等。 2 芳香油的特点： 物理性质：挥发性强，化学性质稳定，不溶于水，易溶于有机溶剂 化学组成：以萜类化合物及其衍生物为主。 3.芳香油的提取方法：蒸馏法、压榨法、萃取法 （1）水蒸气蒸馏法 原理：水蒸汽可将挥发性较强的芳香油携带出来形成油水混合物，冷却后水油分层。 方法：水中蒸馏：原料放在沸水中加热蒸馏。 水上蒸馏：原料隔放在沸水

16、上加热蒸馏。 水汽蒸馏：利用外来高温水蒸气加热蒸馏。 （2）压榨法：通过机械压缩力将精油从原料中分离出来的一种简单操作） （3）萃取法： 原理：芳香油易溶于有机溶剂，溶剂挥发后得到芳香油。 方法：原料浸泡在溶剂中得到浸泡液有机溶剂挥发芳香油。 如果你看到面前的阴影，那是因为你的背后有阳光 第 12 页 共 24 页 （二）基本流程 玫瑰精油的提取 0.1g/mL 氯化钠溶液：促使油水混合物（乳浊液）中油和水的分离。无水硫酸钠：吸收油层中的水分。 注意事项：蒸馏时间不能过短，温度不能过高。 橘皮精油的提取 石灰水：防止压榨时滑脱，提高出油率，降低压榨液黏稠度，过滤不堵塞筛眼。 小苏打、硫酸钠：促

17、进油和水的分离（用量分别为橘皮质量的 0.25和 5）。 课题二胡萝卜素的提取 （一）基础知识 1.胡萝卜素 性质：橘黄色结晶，化学性质比较稳定，不挥发，不溶于水，微溶于乙醇，易溶于石油醚等有机溶剂。 分类：依据碳碳双键的数目划分为、 三类，其中最主要的组成成分为- -胡萝卜素。 作用：治疗夜盲症、幼儿生长发育不良、干皮症等疾病常用于食品色素使癌变细胞恢复成正常细胞。 提取方法：从植物中提取从大面积养殖的岩藻中获得利用微生物的发酵生产 、萃取剂的选择 水溶性的：乙醇、丙酮 水不溶性的：石油醚、乙酸乙酯、 乙醚、苯、四氯化碳等 选择：具有较高的沸点，能够充分溶解胡萝卜素，低毒并且不与水混溶。 如

18、果你看到面前的阴影，那是因为你的背后有阳光 第 13 页 共 24 页 、影响萃取的因素 主要因素：萃取剂的性质和使用量 次要因素：原料颗粒的大小、紧密程度、含水量、萃取的温度和时间等 一般来说，原料颗粒小，萃取温度高，时间长，需要提取的物质就能够充分溶解，萃取效果就好。萃取前， 要将胡萝卜进行粉碎和干燥 （二）基本流程 鉴定：纸层析法 疑难解答 乙醇和丙酮能够用于胡萝卜素的萃取吗？为什么？ 答：胡萝卜素可溶于乙醇和丙酮，但它们是水溶性有机溶剂，因萃取中能与水混溶而影响萃取效果，所以 不用它们作萃取剂。 2.在石油醚、醋酸乙酯、乙醚、苯和四氯化碳这几种有机溶剂中，哪种最适宜用来提取胡萝卜素？

19、答：在这五种有机溶剂中，石油醚的沸点最高，在加热萃取时不易挥发，所以石油醚最适宜用作萃取剂。 提取方法实验原理方法步骤适用范围优缺点 水蒸气蒸馏 利用水蒸气将挥发性较强 的芳香油携带出来 1玫瑰花+水 2.水蒸气蒸馏 3.油水混合物 4 分离油层 5.除水过滤 适用于提取玫瑰油、 薄荷油等挥发性强、 化学性质稳定、不溶 于水的芳香油 优：简单易行，便于分离 缺：水中蒸馏会导致原料焦糊和有效成分 水解等问题 压榨法 通过机械加压，压榨出果 皮中的芳香油 1.石灰水浸泡、漂洗 2.压榨、过滤、静置 3.再次过滤 适用于柑橘、柠檬等 易焦糊、有效成分易 水解原料的提取 优：生产成本低，能保持原有的结

20、构和 功能 缺：分离困难，出油率较低 有机溶剂萃取 使芳香油溶解在有机溶剂 中，蒸发溶剂后就可获得 1.粉碎、干燥 2.萃取、 过滤 3.浓缩 适用范围广，要求原 料的颗粒要尽可能细 优：出油率高，易分离 如果你看到面前的阴影，那是因为你的背后有阳光 第 14 页 共 24 页 芳香油小，能充分浸泡在有 机溶液中 缺：如使用的有机溶剂处理不当 会影响芳香油的质量 专题二 微生物的培养与应用 课题一 微生物的实验室培养 一基本原理 （一）培养基 1.定义：人们按照微生物对营养物质的不同需求，配制出供其生长繁殖的营养基质，是进行微生物培养的 物质基础。 2 分类： 按照物理性质可分为液体培养基、半

21、固体培养基和固体培养基。 液体培养基应用于工业或生活生产；固体培养基应用于微生物的分离和鉴定；半固体培养基则常用于观察 微生物的运动及菌种保藏等。 按照培养基的用途，可将培养基分为选择培养基和鉴定培养基。选择培养基是指在培养基中加入某种化学 物质，以抑制不需要的微生物生长，促进所需要的微生物的生长。鉴别培养基是根据微生物的特点，在培 养基中加入某种指示剂或化学药品配制而成的，用以鉴别不同类别的微生物。 3.成分： 水 、 无机盐 、 碳源 、 氮源 （生长因子）等。 碳源：能为微生物的代谢提供碳元素的物质。如 CO2、NaHCO3等无机碳源；糖类、石油、花生粉饼等有机碳 源。异养微生物只能利用

22、有机碳源。单质碳不能作为碳源。 氮源：能为微生物的代谢提供氮元素的物质。如 N2、NH3、NO3 -、NH 4 +（无机氮源）；蛋白质、氨基酸、尿素、 牛肉膏、蛋白胨（有机氮源）等。只有固氮微生物才能利用 N N2。 培养基还要满足微生物生长对 PH、特殊营养物质以及氧气的要求。例如，培养乳酸杆菌时需要在培养基中 添加维生素，培养霉菌时须将培养基的 pH 调至酸性，培养细菌是需要将 pH 调至中性或微碱性，培养厌氧 型微生物是则需要提供无氧的条件 （二）无菌技术（二）无菌技术 1.消毒指使用较为温和的物理或化学方法仅杀死物体表面或内部一部分对人体有害的微生物（不包括 芽孢和孢子）。 消毒方法：

23、 煮沸消毒法 巴氏消毒法（对于一些不耐高温的液体） 化学药剂消毒法（如酒精、氯气、石炭酸等） 紫外线消毒法 2.2.灭菌则是指使用强烈的理化因素杀死物体内外所有的微生物，包括芽孢和孢子。 灭菌方法：灭菌方法： 1灼烧灭菌法（接种环、接种针、试管口等使用）所用器械是酒精灯 如果你看到面前的阴影，那是因为你的背后有阳光 第 15 页 共 24 页 2干热灭菌法（玻璃器皿、金属用具等使用）所用器械是干热灭菌箱 ； 3高压蒸汽灭菌法（培养基、无菌水等使用）所用器械是高压蒸汽灭菌锅 。 表面灭菌和空气灭菌等使用紫外线灭菌法，所用器械是紫外灯 。 比较项理化因素的作用强度消灭微生物的数量芽孢和孢子能否被消

24、灭 消毒较为温和部分生活状态的微生物不能 灭菌强烈全部微生物能 二基本操作二基本操作 （一）制作牛肉膏蛋白胨固体培养基（一）制作牛肉膏蛋白胨固体培养基 1方法步骤：计算、称量、溶化、灭菌、倒平板。 2倒平板操作的步骤： 将灭过菌的培养皿放在火焰旁的桌面上，右手拿装有培养基的锥形瓶，左手拔出棉塞。 右手拿锥形瓶，将瓶口迅速通过火焰。 用左手的拇指和食指将培养皿打开一条稍大于瓶口的缝隙， 右手将锥形瓶中的培养基 （约 1020mL） 倒入培养皿，左手立即盖上培养皿的皿盖。 等待平板冷却凝固，大约需 5 510min10min。然后，将平板倒过来放置，使培养皿盖在下、皿底在上。 （二）纯化大肠杆菌（

25、二）纯化大肠杆菌 1.微生物接种的方法最常用的是平板划线法和稀释涂布平板法。 2.平板划线法是通过接种环在琼脂固体培养基表面连续划线的操作。将聚集的菌种逐步稀释分散到培养基 的表面。在数次划线后培养，可以分离到由一个细胞繁殖而来的肉眼可见的子细胞群体，这就是菌落。 3.稀释涂布平板法是先用无菌水将菌液进行一系列的梯度稀释，然后将不同稀释度的菌液分别涂布到琼脂 固体培养基的表面，进行培养。分为系列稀释操作和涂布平板操作两步。 4.用平板划线法和稀释涂布平板法接种的目的是：使聚集在一起的微生物分散成单个细胞，从而能在培养 基表面形成单个的菌落，以便于纯化菌种。 5.平板划线法操作步骤： 将接种环放

26、在火焰上灼烧，直到接种环烧红。 在火焰旁冷却接种环，并打开棉塞。 试管口通过火焰。 4将已冷却的接种环伸入菌液中蘸取一环菌液。 试管通过火焰，并塞上棉塞。 左手将皿盖打开一条缝隙，右手将沾有菌种的接种环迅速伸入平板内，划三至五条平行线，盖上皿 盖。注意不要划破培养皿。 灼烧接种环，待其冷却后，从第一区域划线的末端开始往第二区域内划线。重复以上操作，在三、 四、五区域内划线。注意不要将最后一区的划线与第一区相连。 将平板倒置放入培养箱中培养。 如果你看到面前的阴影，那是因为你的背后有阳光 第 16 页 共 24 页 6.涂布平板操作的步骤： 将涂布器浸在盛有酒精的烧杯中。 取少量菌液，滴加到培养

27、基表面。 将沾有少量酒精的涂布器在火焰上引燃，待酒精燃尽后，冷却 810s。 用涂布器将菌液均匀地涂布在培养基表面。 疑难解答：疑难解答： 1.培养基灭菌后，需要冷却到 50左右时，才能用来倒平板。你用什么办法来估计培养基的温度？ 答：可以用手触摸盛有培养基的锥形瓶，感觉锥形瓶的温度下降到刚刚不烫手时，就可以进行倒平板了。 2.为什么需要使锥形瓶的瓶口通过火焰？ 答：通过灼烧灭菌，防止瓶口的微生物污染培养基。 3.平板冷凝后，为什么要将平板倒置？ 答：平板冷凝后，皿盖上会凝结水珠，将平板倒置，既可以防止培养基表面的水分过度地挥发，又可以防 止皿盖上的水珠落入培养基，造成污染。 4.在倒平板的过

28、程中， 如果不小心将培养基溅在皿盖与皿底之间的部位， 这个平板还能用来培养微生物吗？ 为什么？ 答：空气中的微生物可能在皿盖与皿底之间的培养基上滋生，因此最好不要用这个平板培养微生物。 5.为什么在操作的第一步以及每次划线之前都要灼烧接种环？在划线操作结束时，仍然需要灼烧接种环 吗？为什么？ 答：操作的第一步灼烧接种环是为了避免接种环上可能存在的微生物污染培养物；每次划线前灼烧接 种环是为了杀死上次划线结束后，接种环上残留的菌种，使下一次划线时，接种环上的菌种直接来源于上 次划线的末端，从而通过划线次数的增加，使每次划线时菌种的数目逐渐减少，以便得到菌落。划线结束 后灼烧接种环，能及时杀死接种

29、环上残留的菌种，避免细菌污染环境和感染操作者。 6.在灼烧接种环之后，为什么要等其冷却后再进行划线？ 答：以免接种环温度太高，杀死菌种。 7.在作第二次以及其后的划线操作时，为什么总是从上一次划线的末端开始划线？ 答：划线后，线条末端细菌的数目比线条起始处要少，每次从上一次划线的末端开始，能使细菌的数 目随着划线次数的增加而逐步减少，最终能得到由单个细菌繁殖而来的菌落。 8.涂布平板的所有操作都应在火焰附近进行。结合平板划线与系列稀释的无菌操作要求，想一想，第 2 步 应如何进行无菌操作？ 答：应从操作的各个细节保证“无菌”。例如，酒精灯与培养皿的距离要合适、吸管头不要接触任何其 他物体、吸管

30、要在酒精灯火焰周围；等等。 （三）菌种的保存（三）菌种的保存 （1）对于频繁使用的菌种，可以采用临时保藏的方法。 临时保藏方法：将菌种接种到试管的固体斜面培养基上，在合适的温度下培养。当菌落长成后，将 试管放入 4 4的冰箱中保藏。以后每 36 个月，都要重新将菌种从旧的培养基上转移到新鲜的培养基上。 如果你看到面前的阴影，那是因为你的背后有阳光 第 17 页 共 24 页 缺点是这种方法保存的时间不长，菌种容易被污染或产生变异。 （2）对于需要长期保存的菌种，可以采用甘油管藏的方法。 在 3mL 的甘油瓶中，装入 1mL 甘油后灭菌。将 1mL 培养的菌液转移到甘油瓶中，与甘油充分混匀后，

31、放在2020的冷冻箱中保存。 课题二 土壤中分解尿素的细菌的分离与计数 一、基本原理： 1.尿素是一种重要的农业氮肥，尿素并不能直接被农作物吸收。只有当土壤中的细菌将尿素分解成氨之后， 才能被植物利用。土壤中的细菌之所以能分解尿素，是因为他们能合成脲酶。尿素最初是从人的尿液中发 现的。 2.筛选菌株筛选菌株 （1）实验室中微生物的筛选应用的原理 人为提供有利于目的菌株生长的条件（包括营养、温度、pH 等），同时抑制或阻止其他微生物生长。 配置选择培养基。 （2）配制选择培养基的依据 根据选择培养的菌种的生理代谢特点加入某种物质以达到选择的目的。例如，培养基中不加入有机物 可以选择培养自养微生物

32、；培养基中不加入氮元素，可以选择培养能固氮的微生物；加入高浓度的食盐可 选择培养金黄色葡萄球菌等。 3.3.统计菌落数目统计菌落数目 （1）测定微生物数量的常用方法有稀释涂布平板法和显微镜直接计数。 （2）稀释涂布平板法统计样品中活菌的数目的原理 当样品的稀释度足够高时，培养基表面生长的一个菌落，来源于样品稀释液中的一个活菌。通过统计 平板上的菌落数，就能推测出样品中大约含有多少活细菌。为了保证结果准确，一般设置 35 个平板，选 择菌落数在 30300 的平板进行计数，并取平均值。统计的菌落数往往比活菌的实际数目低，因此，统计 结果一般用菌落数而不是活菌数来表示。 二基本流程二基本流程 1.

33、土壤取样：同其他生物环境相比，土壤中的微生物，数量最大，种类最多。在富含有机质的土壤表层， 有更多的微生物生长。从富含有机物、潮湿、pH7 的土壤中取样。铲去表层土，在距地表约 3 38cm8cm 的土 壤层取样。 2 样品的稀释：样品的稀释程度将直接影响平板上生长的菌落数目。在实际操作中，通常选用一定稀释范 围的样品液进行培养，以保证获得菌落数在 30300 之间、适于计数的平板。 测定土壤中细菌的数量，一般选用 10 4 10 5 10 6 测定放线菌的数量，一般选用 10 3 10 4 10 5 测定真菌的数量，一般选用 10 2 10 3 10 4 3 微生物的培养与观察 不同种类的微

34、生物，往往需要不同的培养温度和培养时间。 如果你看到面前的阴影，那是因为你的背后有阳光 第 18 页 共 24 页 细菌 3037 12 天;放线菌 2528 57 天 ;霉菌 2528 34 天 每隔 24 小时统计一次菌落数目， 选取菌落数目稳定时的记录作为结果， 这样可以防止因培养时间不足而导 致一楼菌落的数目。一般来说，在一定的培养条件下，同种微生物表现出稳定的菌落特征。如形状、大小、 隆起程度、颜色. 疑难解答疑难解答 （1）如何从平板上的菌落数推测出每克样品中的菌落数？ 统计某一稀释度下平板上的菌落数，最好能统计 3 个平板，计算出平板菌落数的平均值 每 ml 样品中的菌落数=（C

35、/V）*M 其中，C 代表某一稀释度下平板上生长的平均菌落数，V 代表涂 布平板时所用的稀释液的体积（ml），M 代表稀释倍数 课题三 分解纤维素的微生物的分离 一 基本原理 1.1.纤维素和纤维素酶 （1 1）纤维素是一种由葡萄糖首尾相连而成的高分子化合物，是地球上含量最丰富的多糖类物质。棉花是自 然界中纤维素含量最高的天然产物，木材、作物秸秆等也富含纤维素。 （2）纤维素酶是一种复合酶，一般认为它至少包括三种组分，即 C C1酶、C CX酶和葡萄糖苷酶，前两种酶使纤 维素分解成纤维二糖，第三种酶将纤维二糖分解成葡萄糖。纤维素最终被水解成葡萄糖，为微生物的生长 提供营养。 2.2.纤维素分解菌的筛选纤维素分解菌的筛选 （1）筛选方法：刚果红染色法。能够通过颜色反应直接对微生物进行筛选。 （2）刚果红染色法筛选纤维素分解菌的原理 刚果红是一种染料，它可以与像纤维素这样的多糖物质形成红色复合物，但并不和水解后的纤维二糖 和葡萄糖发生这种反应。当我们在含有纤维素的培养基中加入刚果红时，刚果红能与培养基中的纤维素形 成红色复合物。当纤维素被纤维素酶分解后，