肾功能不全试验的实验报告ppt课件.ppt

1、目的复制兔急性肾功能衰竭、1、实验目的、急性中毒性肾衰动物模型，通过对肾功能指标检测及肾脏形态变化的观察，了解中毒兔肾功能的变化。判断和分析致病因素和可能导致急性肾脏衰退的发病机制。2，实验原理，肾脏是多功能器官，其主要功能之一是泌尿功能。肾脏通过肾血流、肾小球滤过率、肾小管排泄和重吸收、体内代斯物质排泄，维持机体内环境的稳定。肾血流减少，肾小球滤过率下降，或肾小管排泄中发生吸收功能障碍时，肾脏的泌尿功能受到影响，导致肾功能衰竭。3，ARF发病机制的中心部分是GFR的减少。肾血流减少，肾小管堵塞，肾小管的原尿漏或肾细胞损伤等都会导致GFR的减少。本实验通过皮下注射1HgCl2引起兔急性肾小惯性

2、坏死。通过牙齿实验，学习复制急性中毒性肾衰动物模型。观察肾衰兔的一般状态、酚红排泄率、肌酐清除率等变化。观察急性肾功能衰竭肾脏的一般形态。根据实验指标判断和分析急性肾衰的发病机制和病理生理变化。对急性肾衰的原因、发病机制、功能代斯变化的认识加深了。4，实验对象，兔子23公斤。5，实验药品和器材，1HgCl2，生理盐水，25氨基甲酸酯，06酚红，20葡萄糖，10NaOH，手术器械套装，注射器，试管，取样器，721分光光度计，水浴盆，离心机。6，实验阶段，复制肾功能衰竭模型：实验前一天，取两只兔子称重或躲避，或用1HgCl2(o810mlkg)注射肌肉注射1 HGC L2 (O 810 MLKG)

3、，引起急性肾功能衰竭，制作实验组兔。另一种皮下或肌肉注射等量的生理盐水(10mlkg)作为对照组兔。7，实验阶段，观察：24小时后比较两组动物的一般状态、活动情况和尿液量。兔子称重，向耳浅静脉注射25氨基甲酸酯40毫克，动物麻醉后固定在兔架上。8，9，实验阶段，将兔心脏采血35毫升放入干燥管(非抗凝剂)，放置10min后，3000r/min离心15min，将血清小心吸收到其他干燥管，血液肌酐，10，实验阶段，如果心脏忧虑团用动脉钳封闭，结扎线以下输液速度必须在下腹部正中剪下毛发，在耻骨联合处切割约15厘米，长约4厘米，暴露膀胱，用注射器将2毫升尿液收集到试管中，进行尿肌症检查。12，实验阶段，

4、在膀胱底部找到两侧的输尿管，将其分离。在肌膀胱末端绑上输尿管，等一会儿，用眼科切开一口，放入通往肾脏方向的塑料管(塑料管事先用肝素冲洗或装满肝素)，结扎固定，用于收集尿液。13，实验阶段，酚红排泄率测定：1)两组家兔分别在耳边静脉注射o6酚红溶液(1mlkg)，然后在外静脉插管中注射20葡萄糖溶液(30mlkg)。从酚红注射开始收集15min或30min的尿液。转换为单位时间的小便量(mlmin)。14，将实验阶段，收集的尿液倒入500毫升的量筒，加入10NaOH lOml，用自来水补充并搅拌500毫升，然后取出适当的量，放入比色管口径等试管，与标准比色管比较，可以获得15min或30min内

5、肾酚红排泄率。15，实验程序，肾酚红排泄率：反映肾血流和肾小管排泄功能的指标。正常情况下，静脉注射酚红后，15min或30min，肾脏酚红排泄率分别为30%和45%。，16，实验阶段，测定血清和尿肌硫含量，苦味酸沉淀蛋白原理：在碱性条件下苦味酸和(血，尿中)肌酐作用，产生泛黄苦味酸肌酐，对溶液上色后进行颜色测定；然后添加乙酸。酸性环境中，黄红色的苦味酸肌酐清除，非肌酸物质(假肌酐)牙齿着色，差异是血和尿中的肌酐。按照表1，表2的操作步骤测定血清和尿液近况。17，表1血清肌酐测定，18，实验阶段，混合，37OC水浴30 min，510nm波长比色，空管0曹征，OD值读取，在每个管中放入2滴50%

6、醋酸液，6min后计算：Crp(Crp)，19，表2尿肌症测定，20，实验程序，搅拌，加入10min，然后加入蒸馏水6。0ml，摇晃，530nm波长比色，空管零曹征，ODM读取。计算：Cru(mg%)=OD测定/OD标准0.05mg100ml/0.1ml，21，实验阶段，功能性肾功能衰竭时比率40。22，内生肌酐清除率(Ccr):肾小球滤过率(GFR) Ccr=Cr尿量(ml/min)/Cr为了更准确地反映血液，在实验阶段收集尿液，必须收集有“单位时间的尿量记录”牙齿的尿液样本。肌酐可以在肾小球中自由过滤，很少被肾小管吸收，但少量在根曲小管中分泌。内生肌酐在血浆中浓度相当低，因此根曲小管分泌的肌酐可以忽略，因此Ccr与局部清除率相似，可以显示肾小球滤过率。23，实验程序，肾脏形态学观察：处死兔子，取出肾脏，计算肾脏重量，计算肾脏比例，比较两组家兔肾脏外形，纵向切开肾脏，观察血髓质条纹，颜色等。24，事故测试问题