氨基酸的薄层层析-分离鉴定氨基酸混合液.ppt

1、如何分离鉴定氨基酸混合液？掌握生物化学和分子生物学实验教学中心、氨基酸的薄层分析(Thin Layer Chromatograph Y of Amino Acids)、生物化学和分子生物学实验教学中心、2009年秋季学期、生物化学和分子生物学实验教学中心、实验目的、薄层分析法的一般原理。掌握氨基酸薄层分析法的基本操作技术。确定如何根据迁移率(Rf值)确定分离的物质(氨基酸混合液)。2009年秋季学期，生物化学和分子生物学实验教学中心，分层分析技术，概念：化合物中各成分物理性质的差异(如溶解度、吸附力、分子形状和大小、分子极性等特征):分离效率高，可以分离各种性质相似的物质。不仅可以用于少量物质

2、的分离纯化，还可以用于大量物质的分离纯化和制备。2009年秋季学期，生物化学和分子生物学实验教学中心，分层的基本课程，A组B组，流化床，固定床，吸附溶解耦合等，吸附层：薄层吸附层，吸附柱层2。分配层：纸层、柱层、薄层3。离子交换层4。凝胶层液相(溶剂展开)牙齿固定相流动时，吸附剂对氨基酸的吸附力不同，因此在展开溶剂中氨基酸的溶解度不同，薄板中的混合氨基酸样品也因展开剂的迁移率不同而徐璐分离。(David asels，Northern Exposure(美国电视电视剧)，(即通过重复吸附-解吸-再吸附-解吸来分离样本组)，2009年秋季学期，生物化学和分子生物学实验教学中心，2。氨基酸和睾酮的显

3、色反应，睾酮水合后水合，氨基酸的羧基反应还原，氨，和，实验原理，2009年秋季学期，生物化学和分子生物学实验教学中心，宁海德林反应，2009年秋季学期，生物化学和分子生物学实验教学中心，实验原理，三层分析在特定溶剂中，材料的分配系数固定，因此移动速度(Rf值)也固定，从而可以根据Rf值识别分离的材料。2009年秋季学期，生物化学和分子生物学实验教学中心，实验材料，吸附剂：硅胶：0.5%的羧甲基纤维素钠氨基酸的异丙醇溶液丙氨酸，精氨酸，甘氨酸展开-显色剂(正丁醇，乙酸，宁酮溶液)3.干燥，将玻璃板水平放置，在室温下自然凉干。4，激活70干燥30分钟。关闭电源，直到玻璃板温度不变热为止。，2009

4、年秋季学期，生物化学和分子生物学实验教育中心，操作阶段点，2厘米，1厘米，1，位置：用铅笔在底部2厘米水平线上平均确定4点。每个样品之间的距离为1厘米。2.用毛细管分别吸收氨基酸溶液，轻轻接触薄层表面。3、取样后原点扩散直径不超过2mm。4、样品干燥后再重复一次。Alaargglymix，2009年秋季学期，生物化学和分子生物学实验培训中心，复盖分层分析气缸盖，上行展示剂的前端离薄板顶部2厘米时，停止展示层，取出薄板，用铅笔画出溶剂前沿边界，用热风烘干，或在85度烘干，各层的斑点就会显现出来。Alaarg Glymix，2009年秋季学期，生物化学和分子生物学实验教学中心，注意事项，1 .不要用手直接触摸薄木板。2.在试模过程中，必须在第一个样品干燥后订购第二滴。样品数量太少，某些成分不容易显示。样品量太大，斑点太大，容易徐璐交叉或拖尾。2009年秋季学期，生物化学和分子生物学实验教学中心，Rf=，斑点到原点的距离，溶剂前部到原点的距离，结果计算，仔细测量斑点中心到原点中心的距离，然后测量从原点中心到溶剂前部的距离，计算其值。根据值识别混合样品中氨基酸的种类，绘制层析法。2009年秋季学期，生物化学和分子生物学实验教育中心，审查考