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文档简介

1、实验9不同渗透胁迫条件下氨基酸含量的测定、实验目的和要求1、学会常用实验材料的培养和处理2 .掌握植物脯氨酸含量的测定方法3 .掌握常用实验仪器的使用操作，提高实验手的能力4 .了解学会文献的查阅和整理、实验设施修订的一般原则和方法步骤，熟悉自己的实验设施修订能力实验内容和条件：实验内容： 1、实验植物种子的处理和幼苗的培养2、不同渗透胁迫条件下的胁迫处理3、脯氨酸含量的测定。 条件： (使用仪器) 1、恒温孵化机2、分光光度校正3、恒温水族箱4、恒温恒湿孵化机、方法步骤1、根据情况进行实验组，实验组人数控制为34人，选定组长2 .实验课题的选定、实验组分工、实验用品的领取、实验要求的记述3，

2、 各组实验的安排4 .实验工作(1)材料的选择、培养和处理(2)脯氨酸含量的测定(3)实验课题的总结和实验报告。 实验提案课题(1)实验材料的选择可以选择不同的实验材料，但要求培养容易、容易获得。 (2)渗透胁迫处理不同的渗透胁迫条件、胁迫时间对植物的胁迫处理；(3)不同的渗透胁迫条件对植物氨基甲酸积累的影响采用张志良的方法进行。 脯氨酸含量的测定，实验原理植物受到渗透胁迫，引起性生理水资源短缺，植物体内脯氨酸含量在一定程度上反映了植物内的水分情况。 因此，其含量可作为植物水资源短缺的参考指标。 酸性条件下茚三酮和氨基甲酸反应生成红色化合物。 其含量与色度成正比，因此可以用分光光度校正来测定。

3、 实验器材和试剂，1 .实验器材： 722型分光光度修订，水浴釜，烧酒，移液器。 2 .实验试剂：冰冰乙酸、3%磺水杨酸类、标准脯氨酸溶液、酸性茚三酮试剂。 实验步骤，1 .定标曲线的曲线(1)在分析天平上准确称取25mg脯氨酸，放入小的烧杯，用少量的蒸馏水溶解后，放入250ml的瓶子，加入蒸馏水定容至刻度，该参比溶液中每ml含有100g脯氨酸。 (2)系列脯氨酸浓度的调制，取6瓶50ml的容量瓶，分别加入脯氨酸原液1.0、2.0、3.0、4.0、5.0及6.0ml，用蒸馏水定容至刻度，横摇，各瓶的脯氨酸浓度分别为2、4、6、8 (5)用注射器将各管上层的前置甲苯(红色甲苯相)溶液轻轻地吸在比色杯中，以甲苯溶液为空白对照进行对照，在520nm的波长下进行比色。 (6)定标曲线图：求出吸光率值(y )根据脯氨酸浓度(x )变化的回归式后，利用回归式绘制定标曲线。实验步骤、1 .采集地上构件0.5g后，加入3%磺水杨酸类5ml进行研磨，均化为离心管，在沸水中提取10分钟，蒸发制冷至室温后，以3000r/min离心10分钟，采集上清液2ml，分别加入蒸馏水2ml，蒸发制冷后520nm 从定标曲线中检测出脯氨酸含量。 注意事项，1 .选择实验材料时，不要选择生长良好的叶子，不要选择枯死的叶子。 此外，为了不影响实验结果，请勿选择变黄、变红的叶片。 2 .茚三酮是无色的，但与脯氨酸发生显色

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