DNA亲子鉴定 选修3 ppt课件

1、第三讲 DNA亲子鉴定基本步骤,亲子鉴定的应用范围 刑事方面： （1）无名尸体 （2）强奸致孕 （3）拐卖儿童 民事方面： （1）男方怀疑子女非亲生 （2）移民；登记户口 （3）财产继承 （4）婴儿调错 （5）寻亲 （6）索取抚养费 （7）试管婴儿 （8）灾难善后 （9）交通事故（撞人逃逸；司机换人）,采集样本,电泳分型,提取DNA,PCR扩增,分析结果,接受委托,司法鉴定需提供（个人鉴定可不提供）： 委托单位委托书，被鉴定人有效身份证件原件(身份证、户口本或出生证明) 司法鉴定或个人鉴定均需填写：亲子鉴定委托书 内容包括： 1.姓名性别年龄民族身份证号等 2.照相情况：本中心照相( ) ；自

2、带照片( )张；委托人要求不照相(签名： ) 3.其它信息： （1）母亲肯定是孩子的生母( 是 否)； （2）是否进行过异基因骨髓移植(是 否)； （3）是否有双胞胎兄弟姐妹( 是 否)。 （4）是否要求保留样本( 是 否),接受委托,采集样本,血液：抽取静脉血1-2ml，抗凝。 血痕：将血液滴在22cm2医用纱布或滤纸上，通风阴干，做好标记后，分别存放在纸制信封中，切勿密闭保存。 口腔拭子：先用清水簌口，使用医用棉签，从口腔内壁颊粘膜处适当力度反复擦拭，取出棉签，通风阴干，做好标记后，分别存放在纸制信封中，切勿密闭保存。每人需提取4-5根棉签。 胎儿羊水：（孕16-20周）本鉴定室开具委托书

3、在指定医院采取，由工作人员取回或被鉴定人自己在正规医院采取，羊水需5-10ml。 带毛囊毛发：将毛发用力连根拔下，毛发末端可看到清晰的毛囊，即毛发根部白色物质。,1.样本处理 血液：溶血，去除红细胞，消除血红素的影响。 血痕、口腔拭子：洗脱细胞 胎儿羊水细胞，带毛囊毛发：分离细胞 2.加入5Chelex-100 200l，10mg/ml蛋白酶K 2l，摇匀，56水浴30min。 3.取出后在漩涡混匀器上震荡混匀5-10秒。 4.沸水浴8min，震荡混匀5-10秒。 5.8000r/min离心5min，4保存备用。（PCR时取上清作为模板）,提取DNA,Chelex-100法,STR位点1：TP

4、OX,STR表型：6-8,PCR扩增,Powerplex16 PCR体系（huaxi),按加样先后顺序 引物（16对）： 0.5l Buffer(含Mg2+ ,dNTPs） 0.5l 金牌Taq酶AmpliTaq Gold ： 0.4l 灭菌超纯水： 3.13.35l（补足总体积） 模板DNA： 0.250.5l 总体积： 5l,电泳分型,聚丙烯酰胺凝胶电泳 毛细管电泳,毛细管电泳图谱,1.两个以上位点不符合遗传规律：排除父子关系 2.全部符合遗传规律或1-2个位点不符合遗传规律 计算父权相对机会(RCP)= 若RCP100% 99.99，支持甲是乙的生物学父亲 若RCP100% 99.99，

5、继续增加检测位点，直至排除或支持。,结果分析,相关知识 1.母系亲缘鉴定：线粒体DNA测序 2.父系亲缘鉴定：Y-STR（孔子，成吉思汗） 3.萨达姆 4.双胞胎 5.奇美拉现象 6.曹操墓 7.养父 8.伦理道德方面,建议忠告 1.珍爱生命，远离网游 2.按部就班，学好专业 3.人际交往，增加阅历 4.关注时事，目光长远,试题 1.目前最常用的亲子鉴定技术是什么？简述这种方法的基本原理。 2.简述DNA亲子鉴定的基本流程。 3.哪些样本可用于DNA亲子鉴定?采集方法?注意事项？ 4.采用上述方法进行亲子鉴定，结果有没有可能达到100%认定父子关系？为什么？ 5.上述方法可否用于动物之间的亲缘关系鉴定？与人类的DNA亲子鉴定相比，有哪些困难？ 6.关于亲子鉴定或分子生物学实验，你有何疑问，想了解哪些方面的知识？ 7.班级，姓名，学号，手机号码,课件 密码：xuanxiu 交作业： 17日前交给本班学习委员或代表； 17日（周四）上午或中午，第三实验楼304房间，交给侯老师或放在边台