免疫学复习题和实验题

1、名词解释： 1免疫：古典免疫是指人体和动物体对某 种病原微生物的抵抗力以及对同一种病原 微生物再感 指人和动物机体识别和排斥抗原的功能活 染的特异防御能力。现代免疫 动。 2 能使机体中产生免疫应答的物质。 免疫原： 在具有免疫应答能力的机体中， 3 的物质。 半抗原：只有反应原性而缺乏免疫原性 4复合半抗原：不能单独刺激机体产生免 疫应答， 件下出现 但可与相应的抗体结合，在一定条 复合半抗原。 肉眼可见的反应，这种抗原称为 5 淋巴细胞并能与之结合引起特异性免疫反 抗原：凡是能刺激机体产生抗体和致敏 应的物质， 即具有免疫原性和反应原性的 物质。 6 殊立体构型和免疫活性的基团称为抗原决

2、抗原表位：存在于抗原分子表面具有特 定簇（基）或表位。 7 识别（直接识别或结合）的部位。 B 细胞表位： 抗原中被 BCR 和抗体分子所 8 致敏淋巴细胞发生特异性反应的特性。 反应原性：是指抗原能与相应的抗体或 9免疫原性：是指抗原能刺激机体的免疫 系统产生抗体或致敏淋巴细胞的特性。 10 递呈并被 T 细胞表位：蛋白质分子中被 TCR 识别的肽段。 MHC 分子 11 与抗原接触结合的区域。 互补决定区：即 V 区中的高变区，直接 12同种抗原： 物质的抗原在遗传上变异时 称此种抗原为同种抗原。 13 或与抗原混合后同时注入动物体内， 佐剂： 一种物质先于抗原注入动物体内 能非特 异性地

3、改变或增强机体对该抗原的特异性 免疫应答，发挥辅助作用，这类物质统称为 佐剂。 14 处理蛋白质 抗原提呈：一些细胞能够摄取、加工、 的MHC分子将肽运送到细胞表面供 使其降解成小肽并由细胞 T细胞识 别的过程。 15 和结合特异性抗原的分子结构。 T 细胞抗原受体：T 细胞表面具有识别 16 和结合特异性抗原的分子结构。 B 细胞抗原受体：B 细胞表面具有识别 17辅佐细胞： 能捕获和处理抗原以及递呈 给免疫活性细胞， 细胞） 18再次免疫应答：相同抗原再次免疫机 。 叫做抗原递呈细胞（辅佐 体，产生的抗体潜伏期短、维持时间长、含 量高、以 19初次免疫应答： IgG 为主，为高亲和性抗体。

4、 抗原首次刺激机体产生 免疫应答，产生的抗体潜伏期长、 短、 维持时间 20基因工程重组亚单位苗： 含量低、 以 IgM 为主， 为低亲和性抗体。 基因工程重组 亚单位疫苗是用 微生物保护性抗原的基因导人原核细胞或 DNA 重组技术， 将编码病原 真核细胞，使其在受体细胞中高效表达，分 泌保护性抗原肽链。提取保护性抗原肽链， 加入佐剂即制成基因工程重组亚单位疫苗， 又称为生物合成亚单位疫苗。 21 技术将保护性抗原基因 基因工程重活载体疫苗： 是用基因工程 载体中使之表达的活疫苗。 (目的基因)转移到 22 不同血清型混合制成的疫苗。 多价苗： 是指将同一种细菌(或病毒)的 23联苗： 是指由

5、两种以上的细菌(或病毒) 联合制成的疫苗， 以达到一次免疫可达到预 防几种疾病的目的。 24基因缺失苗： 基因缺失疫苗是用基因工 程技术将强毒株毒力相关基因切除构建的 活疫苗。 25细胞因子： 指一类有免疫细胞和相关细 胞产生的调节细胞功能、 伤愈合等多功能、 质分子。 高活性多功能多肽或蛋白 参与炎症反应、创 26 的悬液与相应抗体结合后， 凝集试验：细菌、红细胞等颗粒性抗原 下，抗原颗粒相互凝聚形成团块， 在电解质的参与 这种现象 叫做凝集试验或称凝集反应。 27 胶中进行，抗原和抗体在凝胶中自由扩散， 琼脂（免疫）扩散：沉淀反应在琼脂凝 二者在凝胶中相遇， 抗体复合物， 在最适比例出形成

6、抗原 则形成沉淀带，叫琼脂（免疫）扩散。 此复合物较大， 又能继续扩散， 28 如胞内菌 内源性抗原：自身细胞内合成的抗原。 成的细菌抗原和病毒抗原， （结核杆菌）和病毒感染细胞所合 肿瘤细胞合成的 肿瘤抗原。 29 外吞噬、 外源性抗原： 捕获或者与 被单核巨噬细胞等从细胞 B 细胞特异性结合而后 进入细胞的抗原， 生物、疫苗、异种蛋白质等以及自身合成而 包括所有从体外进入的微 释放于细胞外的非自身物质。 30 合技术使骨髓瘤细胞和免疫动物淋巴细胞 单克隆抗体： 单克隆抗体是应用细胞融 融合而成的杂交瘤细胞单克隆所产生的一 种特异性高度专一和化学性状高度纯一的 抗体。 31抗体： 是指机体在

7、抗原物质刺激下所产 生的、 疫球蛋白，存在于血液、淋巴液、组织液和 能与该抗原发生特异性反应的一类免 粘膜分泌物中是构成机体体液免疫的主要 物质。 32 成， 分泌成分： 在 IgA 通过黏膜上皮细胞过程中与之结 是由局部黏膜上皮细胞所合 合 抵抗蛋白水解酶的水解作用。 形成分泌型的二聚体，具有保护 33免疫活性细胞：指抗原特异性淋巴细 IgA 胞， 分化增殖，产生特异性免疫应答。 此类淋巴细胞只有接受抗原刺激后才能 34黏膜相关淋巴组织：指消化道、呼吸道 等黏膜下的淋巴组织形成淋巴小结。 35 的存在于人、 异嗜性抗原： 动物、 是一类与种族特异性无关 植物及微生物之间的性 质相同的抗原。

8、36 合以后失去了对易感动物的致病力， 中和作用： 病毒或毒素与相应的抗体结 称中和 作用。 37 殖、 细胞免疫： 分化成为效应性淋巴细胞并产生细胞因 T 细胞接受抗原刺激后，增 子，所导致的特异性免疫应答。 38 增殖、分化为浆细胞，合成分泌抗体，存在 体液免疫：B 细胞受抗原刺激后活化、 于体液中，抗体能与相应的抗原结合， 其免疫效应。 发挥 液免疫的基础。 存在于体液中的抗体时构成体 39 产生的免疫球蛋白， 独特型：同一个体内，不同 酸组成不同， 因而表现出其自身特异型抗原 其 VH 区和 VL B 细胞克隆 区内氨基 的差异 变区呈现的抗原性） （指不同抗原特异性免疫球蛋白在可 型

9、可产生独特型决定簇。 。抗体分子可变区的构 40 与病原体或其他颗粒抗原结合， 调理作用： 调理素(如抗体和补体成分) 细胞表面 Fc 受体或补体受体结合，从而促 通过与巨噬 进吞噬细胞对病原体的吞噬作用。 41免疫球蛋白的功能区： L 链功能区 ：分为 L 链可变区（VL）和 L 链恒定区（ H 各有一个可变区（ 链功能区 CL）两功能 ：IgG、 VH IgA 区。 ）和三个恒定区 和 IgD 的 H 链 42 （CH1、CH2 和 CH3）共四个功能区。 贮存在细胞毒性 穿孔素：具有细胞毒作用的效应分子。 T 细胞和 NK 细胞胞质颗粒 中， 胞吐， 两类效应细胞与靶细胞接触而激发颗粒

10、细胞表面形成小孔，从而介导杀伤作用。 所释放的穿孔素通过聚合作用而在靶 43 体依赖的细胞介导的细胞毒性作用是指表 抗体依赖性细胞介导的细胞毒作用： 抗 达 IgGFc 受体的 NK 细胞、巨噬细胞和中性 粒细胞等， 肿瘤细胞等靶细胞表面的 通过与已结合在病毒感染细胞和 结合，而杀伤这些靶细胞的作用。 IgG 抗体的 Fc 段 44 物学效应的效应复合体， 攻膜复合物： 膜攻复合体补体溶细胞生 径的共同末端通路，即膜攻击复合物。 为三条补体激活途 45 紧密连锁的基因群组成， 主要组织相容性复合体：MHC 是由一群 对染色体的特定区域，呈高度多态性。 定位于动物或人某 46 从血液进入外周淋巴

11、组织， 淋巴细胞再循环： 淋巴细胞周而复始地 回到血液中的过程。 再通过淋巴管道 免疫学实验总结 实验一： 病毒血凝试验 1、 毒）表面分子（血凝素）可以与一些动 某些病毒（如新城疫病毒、流感病 原理： 物红细胞表面分子发生特异结合反应， 在两者比例适当及适宜的液体环境中， 这种结合反应会引起该红细胞发生凝 集，以此建立的实验方法称为血凝试 验。该试验可以鉴定某些病毒的血凝 性。 2、 操作方法： 1. 在干净的微量反应板上选好一 排孔， 第 1 孔至第 12 孔， 每个 2. 孔中加 在第 抗原液，混匀，吸取 1孔中加 25ul 生理盐水。 25ul新城疫病毒 25ul，移 到第 释到第 2

12、 孔，按倍比稀释法，稀 孔， 每个孔中再补加 11 孔。第 1 孔至第 25ul 生理 12 3. 盐水。 在第 鸡红细胞悬液 1 孔至第12 25ul 孔中， 。 加1.2% 4. 在桌面上轻轻滑动震荡，使红 细 -37 胞 ， 充 45 分 分钟 混匀 -60 ，置 分钟， 于 25 观察 试验 结果。 实验二： 病毒血凝抑制 1、 原理： 毒） 某些病毒（如新城疫病毒、流感病 表面分子可以与一些动物红细胞表 面分子发生结合反应， 及适宜的液体环境中， 在两者比例适当 引起该红细胞发生凝集。 这种结合反应会 但这些病毒可 引起某些动物红细胞发生凝集的表面 分子可以诱导机体发生免疫应答反应，

13、 产生对应的抗体。 先与这种抗体发生结合反应， 如果这些病毒表面引起血凝的分子 动物红细胞悬液作用， 血凝作用就会被 再与某些 部分抑制或完全抑制。 依此建立的血清 学实验称为病毒血凝试验。 验可用于检测病毒血凝抑制抗体的相 病毒血凝试 对水平，也可以用已知抗体来鉴定病 毒。 2、 操作方法： 排孔，第 （1）在干净的微量反应板上选好一 25ul 生理盐水。 1 孔至第 12 孔，每个孔中加 混匀， （2）在第 1 孔中加 25ul 待测血清， 稀释到第 吸 25ul 10 孔。 到第 2 孔， 按倍比稀释法， 25ul4 （3） 第 1 孔至第 11 孔， 每个孔中加 25ul 生理盐水。在

14、 单位新城疫病毒液。第 15 -37 12 作用 孔加 5min 鸡红细胞悬液 （ 。 4） 在第 1 25ul 孔至第 。 12 孔中， 加 1.2% 细胞充分混匀，置于 （5）在桌面上轻轻滑动震荡，使红 钟-60 分钟，观察结果。 25-37，45 分 散试验 实验三：双向双扩 1、 原理： 10g/L 孔径大约 琼脂糖凝胶呈多孔结构， 子可以在里面自由扩散。 80nm，各种抗原、抗体分 在琼脂糖凝 胶板上， 内分别加适量的抗原和抗体。 相距适当距离打小孔， 小孔 液和抗体液分别加入同一琼脂糖凝 将抗原 胶板内的相邻小孔中， 子在凝胶中顺浓度梯度自由扩散。 抗原和抗体分 当扩散到它们的浓度

15、比例相适宜 的部位时， 大的抗原 抗原和相对应的抗体形成 白色沉淀线。 -抗体复合物，出现一条乳 如果抗原和抗体不相对 应， 例相差太大，无沉淀线出现。 或者抗原与对应抗体之间浓度比 该试验可用已知抗原检测未知抗 体， 于分析复杂的抗原成分， 或已知抗体检测未知抗原， 抗体的纯度， 测定抗体效价和抗原滴 测定抗原和 可用 度， 异性。 可以用于分析两种抗原成分的差 2、 操作方法： （1） 加 120ml 取 1.2% 1.2g 琼脂糖凝胶板的制备 蒸馏水，在微波炉中加热， 优质琼脂糖，8g 氯化钠， 使之完全溶化，待水蒸发到 刻度处时停止加热。加 汞，混匀，分装，直径 6cm 1ml 1%

16、100ml 的平皿加 硫柳 9ml （ 下图， 2 ，冷却。 ）用打孔器按适当间距打孔，如 每组中心 1 孔加周围 6 孔， 在 酒精灯上烘烤封底。 加生理盐水或 对待检血清进行倍比稀释。 0.1mol/L 在微量反应板上 、pH7.2PBS 加样， 周 ， 围 孔加鸡传染性法氏囊病参考阳性血 5 孔加倍比稀释的待检血清， 第 6 清， 中心孔加鸡传染性法氏囊病琼扩 诊断抗原，均加满。 （ 37 3 、 ） 置于湿盒， 24h-48h。 放在恒温培养箱中， 判定依据， 周围 1-5 孔与中心孔之间出现沉淀线， 6 合， 孔与中心孔形成的沉淀线发生融 且与第 结果为阳性， 以最高稀释度的孔 和试

17、验 为反应滴度。 实验四： 病毒鸡胚中 1、 原理： 递进稀释， 将新城疫系病毒毒液作 分成两列， 在第一列每管 10 倍 中加等量正常血清 体） （无新城疫病毒抗 清，混匀后置培养箱 ，在第二列每管中加等量待测血 371h，再分 别接种 体的鸡胚， 9 日龄健康、 继续孵化 5 每个稀释度接种 无新城疫病毒抗 天。 记录每个稀释度组的 5-10 枚； 死亡数、累计死亡数和累计存活数， 分别计算正常血清和待测血清的 LD50 及待测血清的中和指数（为中 和病毒的能力大于正常血清的数 值） 2、 。 操作方法： 至 9-11 1、 2 日龄。 将不含新城疫抗体的鸡蛋孵化 、以无菌 0.1mol/

18、L、pH7.2PBS 将新城疫系病毒毒液作 稀释，以灭菌小瓶或试管均分成 10 倍递进 列， 在第一列每管中加等量正常血清 2 （无新城疫病毒抗体） 管中加等量待测血清， ，在第二列每 箱 371h。 混匀后置培养 胚 3、 0.1mL/ 5-10 每个稀释度组接种有活力的鸡 枚，继续孵化 枚，尿囊腔接种（见图片） 5 天。 ， 度组的死亡数、 4、 每天观察 活数，分别计算正常血清的 累计死亡数和累计存 2 次， 记录每个稀释 LD50 和 待测血清的 LD50 及中和指数。 记技术 实验五 : 免疫层析金标 1 体金作示踪标志物而建立的一类免 、原理:免疫胶体金技术是以胶 疫标记技术。 白

19、磷、 氯金酸（HAuCl4）在还原剂（如 作用下， 抗坏血酸、 聚合成特定大小 枸橼酸钠、 （5nm-50nm) 鞣酸等） 的颗粒， 定的胶体溶液， 由于静电作用， 还原剂可以制备不同大小的胶体金 称为胶体金。 成为一种稳 不同的 颗粒。 带负电荷， 胶体金颗粒在弱碱或弱酸环境中 可与抗体分子中带正电荷 的基团以静电作用力发生结合， 生物学特性（如抗体与抗原的结合） 而其 不受影响。 电镜的免疫组化法、液相免疫测定、 胶体金标记抗体可应用于光镜或 固相免疫分析 （如免疫层析金标记技 术 2.操作方法： ）以及流式细胞术等。 1. 使用前，将试剂盒和样品恢复 至室温。 面上，用移液器或滴管吸取样品液， 2. 取出检测卡，开封后平放于桌 垂直滴加 孔中，加样后开始计时。 3 滴（约 70-80ul）于加样 3.加样品液后，约 30 秒内，红 色的液体从靠样品孔的观察窗边缘涌 出。朝另一方向流动。 4. 5 分钟时判断结果，超过10 分 钟的结果无效。 附试验 实验六 :酶联免疫吸 1.原理 吸附某种抗原，将待测抗体加到孔 在聚苯乙烯微量滴定板孔中预先 : 中， 充分反应后充分