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文档简介

1、放射免疫分析Radioimmunoassay,一、原理：,Ag + Ab AgAb + Ag + * Ag * AgAb + * Ag * Ag和 Ab量恒定,竞争结合,+,+,+,+,6,8,X100=75%,X100=50%,X100=25%,X100=12.5%,8,4,8,2,8,1,结论,* AgAb复合物的量取决于Ag的量 Ag量越大， * AgAb量越少 Ag量越小， * AgAb量越大 测量* AgAb量或测量多余* Ag量可推算出Ag量,二、测量步骤,恒量的* Ag、Ab加入反应管中 加入待测样品、或标准品（已知浓度） 37或4 温育 加入分离剂分离结合及游离部分 测定以总放

2、射性为分母，测定* AgAb 为分子，计算结合%，以结合率为纵坐标，浓度为坐标，制作标准曲线 待测样品的结合率从标准曲线上求出浓度,0 2 4 8 16 32 64 128,80 70 60 50 40 30 20 10,结 合%,浓 度,三、放免分析基本条件,标准品 标记抗原 特异抗体 分离剂分离结合与游离部分,分离剂要求,快速而完全分离 操作简便、来源容易、价格便宜 不受血清、外界条件及其它试剂的干扰 适用于任何容积的反应液 非特异结合率小,常用液相分离技术,双抗体法 特点： 分离完全，非特异结合小，环境影响小，效价高，但成本高 沉淀法 聚乙二醇（w=6000） 特点： 快速，价廉，来源方

3、便，受环境影响大,常用液相分离技术（续）,吸附法 吸附游离部分，适用于分离小分子游离抗原。活性炭、纤维素粉末 特点 快速、简便、准确性差 盐析法 饱和硫酸胺、硫酸钠 固相分离技术，按材料不同，可分为试管法、颗粒法、小盘法、纸片法,四、放免分析的优点,灵敏度高 特异性强 精确度高 用血量少 体外测量,单位换算,1 g=1000mg 1mg=1000g 1g=1000ng 1ng=1000pg,非放射性体外分析技术,非同位素标记的条件,灵敏度 结合特性 均一性 稳定性 环境因素的不敏感性 临床应用 安全性 应用性,非放射性体外分析技术,酶免疫分析 发光免疫分析 化学发光免疫分析 酶放大化学发光免疫分析 电化学放光免疫分析 荧光免疫分析 时间分辨荧光免疫分析或解离增强镧系荧光免疫分析 BCPDA强荧光螯合物的

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