课题1菊花的组织培养（PPT31页).ppt

1、菊花组织培养，又称植物离体培养，是指在无菌操作和人工控制条件(一定的营养、激素、温度等外界条件)下，对植物组织、器官或细胞进行离体培养，获得再生完整植株的技术。植物组织培养的概念，概念：原因：(回忆)植物组织培养的原理：植物细胞的全能性，细胞的全能性意味着分化的细胞有潜力发展成为完整的个体。有机体的每一个细胞都来自同一个受精卵的有丝分裂，这个受精卵包含了该物种特有的一整套遗传物质。高度特化的动物细胞整体全能性有限。然而，它的细胞核仍然保持全能性，因为细胞核含有物种遗传所需的遗传物质。分化的植物细胞仍然具有全能性。例如，受精卵的体细胞生殖细胞，全能性的比较3360，什么是分化？(它的本质是什么？

2、)什么是骨痂？愈伤组织细胞的特征是什么？什么是去分化和再分化？如何控制细胞的去分化和去分化？(阅读第32-33页以解决以下问题)，2 .植物组织培养基本过程，基因选择性表达，愈伤组织，人参愈伤组织，菠萝愈伤组织，2。植物组织培养或胚状体的基本过程。影响植物组织培养的因素：1 .材料(外植体)的选择(2)同一植物的不同组织在组织培养中有不同的困难。什么样的组织容易进行组织培养？对于容易无性繁殖的植物，一般用什么材料进行组织培养，如烟草、胡萝卜、保存时间短的幼组织和菊花？2、营养成分(培养基)(1)植物组织培养常用培养基？常量元素：碳、氢、氧、氮、磷、钾、钙、镁、硫，微量元素：硼、锰、铜、锌、铁、

3、钼、碘、钴，有机物：甘氨酸、烟酸、肌醇、维生素、蔗糖等。(2)质谱介质的主要成分？培养基中各种成分的功能是什么？主要元素和微量元素提供植物细胞所需的各种无机盐；蔗糖在维持细胞渗透压的同时提供碳源；甘氨酸、维生素等物质主要满足分离植物细胞的特殊营养需求。教材第33页边栏认为：微生物培养基主要是有机营养，而质谱培养基需要提供大量的无机营养；3.植物激素；(1)什么是关键荷尔蒙？(2)两种激素的使用顺序不同，结果也不同；(3)两种激素的剂量比例不同，植物的发育方向也不同；(4)酸碱度、温度、光线等。菊花组织培养的酸碱度？温度？灯？植物组织培养过程：离体组织或细胞，植物，细胞分裂素生长素，愈伤组织，芽

4、，根，细胞分裂素生长素，细胞分裂素生长素，植物细胞培养，不需要光？光是必需的，植物组织培养过程，分离的植物组织或细胞，愈伤组织，根和芽，完整的植物体，去分化和再分化，制备质谱固体培养基，外植体消毒，接种，培养，培养，实验操作，移植，用流动水洗涤无菌纸和吸收70？用无菌水清洗的目的是什么？哪6步？)，1 .准备各种母液(主要元素和微量元素浓缩多少次？那么少量的有机物呢？)2 .准备培养基(菊花组织培养会添加植物激素吗？3、灭菌(哪种灭菌方法？)，接种时注意各种无菌操作。将菊花茎插入培养基时我们应该特别注意什么？最好的训练在哪里？温度？灯？定期消毒？直接移植到土壤里？MS固体培养基的组成和比例，(

5、1)MS固体培养基的制备，(4)培养，(1)愈伤组织的培养，从外植体接种到愈伤组织出现需要2周时间。在2周内，可以看到外植体逐渐生长出乳白色或黄色的瘤样愈伤组织。第一次培养愈伤组织时，应关好培养箱的门，不要看光，因为愈伤组织在没有光的情况下生长得更快。2周后，培养基的成分几乎耗尽，因此有必要更换培养基并进行传代培养。用于继代培养的培养基与用于愈伤组织培养的培养基相同。在严格的无菌条件下，将愈伤组织和原始外植体转移到新的培养基中。愈伤组织的继代培养时间为20天。如果时间延长，培养基中的营养会减少，外植体会分泌有毒物质，导致自身中毒。如果愈伤组织生长到直径11.5厘米，它可以在体外培养。2。愈伤组

6、织的继代培养，在愈伤组织的继代培养过程中，打开培养箱的门，让愈伤组织看到光，愈伤组织的颜色在看到光后会变成绿色。3。试管苗的培养，当愈伤组织生长到一定大小时，可以更换培养基，在光照下进行试管苗的培养。移栽生根的菊花试管苗前，应打开培养瓶的密封膜，让试管苗在培养室内生长几天。1。打开密封膜，2。清洗并转移，用流水清洗根部的培养基，将幼苗移植到灭菌的蛭石或珍珠岩中存活一段时间。(6)栽培，3。移栽，珍珠岩：固体基质。幼苗长成后，就被移植到土壤里。幼苗移栽后，每天观察并记录幼苗的生长情况，及时浇水施肥，直至开花。1。培养基灭菌(高压蒸汽灭菌)2。外植体消毒(酒精、氯化汞)3。接种灭菌(用酒精和酒精灯燃烧)4。无菌箱培养；5.移植到无菌环境中存活一段时间，如何在整个操作过程中达到无菌环境？第35页边栏中的思考：至少做一组重复。在对照实验中，用未接种的空白培养基与接种的培养基一起培养，表明培养基合格且未被杂菌污染。4.课外延伸，人工种子，项目延伸(略)，练习1。答：植物组织培养中所用的植物材料体积小，抗性差，需要较高的培养条件。用于植物组织培养的培养基也适合一些微生物的生长，如一些细菌和真菌。然而，一旦培养物被微生物污染，将导致实验失败，因此应进行严格的无菌操作。2.答：外植体的生理状态是组织培养成功的重要条件之一。旺盛的芽具有良好的生理