三聚氰胺的检测液相法(1).ppt

1、三聚氰胺,分子式： C3H6N6 分子量：126.15 英文名：Melamine,三聚氰胺-结构式,三聚氰胺,俗称蜜胺、蛋白精，又叫2 ,4 ,6- 三氨基-1,3,5-三嗪、1,3,5-三嗪-2,4,6-三胺、2,4,6-三氨基脲、三聚氰酰胺、氰脲三酰胺。 是一种三嗪类含氮杂环有机化合物，是一种重要的有机化工原料。,三聚氰胺,三聚氰胺性状为纯白色单斜棱晶体，无味，密度1.573g/cm3 (16)。 在水中溶解度随温度升高而增大,在20时，约为3.3 g/L，即微溶于冷水，溶于热水，极微溶于热乙醇，不溶于醚、苯和四氯化碳，可溶于甲醇、甲醛、乙酸、热乙二醇、甘油、吡啶等。,三聚氰胺,遇强酸或强

2、碱水溶液水解，胺基逐步被羟基取代，先生成三聚氰酸二酰胺，进一步水解生成三聚氰酸一酰胺，最后生成三聚氰酸。,三聚氰胺 检测过程,检测_选择方法,原料乳与乳制品中三聚氰胺的检测方法：GB/T22388-2008 饲料中三聚氰胺的测定：NY/T1372.29-2007,检测_试剂,甲醇：色谱纯。 乙腈：色谱纯。 氨水:浓度25%-28%。 三氯乙酸溶液10g/L：称取10g三氯乙酸加水至1L。,乙酸铅溶液(22g/L):称取22g乙酸铅,用约300mL水溶解后定容至1L。 氨水甲醇溶液：量取5ml氨水，溶解于100ml甲醇中。 20%甲醇溶液：200ml甲醇加入800ml一级水中，混匀。 方法所用试

3、剂，除另有规定外，均为分析纯试剂，水为蒸馏水或同等纯度水，溶液为水溶液。,检测_标准品,三聚氰胺标准品（纯度99%）。,检测_标准品,标准储备液 准确称取100mg（精确到0.1mg）三聚氰胺标准品于100mL容量瓶中，用20%甲醇水溶液溶解并定容至刻度，配制成浓度为1.0mg/mL的标准储备液，于4避光保存。,检测_标准品,标准品中间液 精确吸取标准储备液5.00mL于50mL容量瓶中，用20%甲醇水溶液定容至刻度，配制成浓度为100 g/mL 的溶液，于4避光保存。,检测_标准品,标准品工作液 精确吸取标准中间液0.50mL、 1.00mL、 2.00mL、 5.00mL、 10.00mL

4、于5个100 mL 容量瓶中，用20%甲醇水溶液定容至刻度.于4避光保存。,检测_标准品,检测_标准品,标准工作液浓度可根据所测样品中的具体含量调整。 如果只做单点标样，请选择与样品浓度最接近的一个点。,检测_标准品谱图,检测_标准品曲线,检测_样品预处理,原理： 样品沉淀脂肪和蛋白质，调PH至中性，过滤后进高效液相色谱仪，经反相色谱分离后，根据保留时间和峰面积进行定性和定量。,检测_样品预处理,准确称取610g样品于50ml容量瓶中。 加入三氯乙酸溶液约20ml，要徐徐加入，并摇动容量瓶，超声提取10-20分钟，加入2ml乙酸铅溶液，用三氯乙酸溶液稀释至刻度。 静置30分钟，用滤纸过滤，滤液

5、（如不需净化）经滤膜(0.45m)过滤，滤液供液相测定用。,检测_样品预处理,如需净化，按以下步骤操作: 小柱活化：依次用3mL甲醇和3mL水活化小柱。 上样：准确吸取10mL（可根据实验情况调整）滤液转移至固相萃取柱中。,检测_样品预处理,净化：再用3mL水和3mL甲醇分别洗涤，抽至近干。 洗脱：用6mL氨化甲醇溶液洗脱，收集全部洗脱液。 控制流速在1mL/min以内。,检测_样品预处理,洗脱液于50下用氮气吹干，残留物用1mL流动相（或20%甲醇水溶液）溶解，涡旋混合1min，供液相测定用。,检测_色谱条件,色谱柱：C18或C8柱，或同等性能的柱子；4.6mm250mm，5m。 流动相：称

6、取2.02g庚烷磺酸钠和2.10g柠檬酸于1L容量瓶中，用水溶解并稀释至刻度。取该溶液900ml加入100ml乙腈，混匀。,检测_色谱条件,流速：1mL/min。 进样量：10L。 检测器：紫外检测器，波长240nm。 根据保留时间定性，外标峰面积法定量。,检测_样品谱图,检测_调节流动相,水相乙腈=9010 适宜大多数的样品。 适当增加水相的比例可推迟出峰时间，使分离度变大。,结果,计算 检出限,结果_计算,原理：外标法 C标A样D 单点法公式： X A标 m C样D 多点法公式： X m,结果_计算,式中： X - 样品的含量，mg/kg； C标 - 标准使用液浓度，g/ml； C样 - 样品浓度，g/ml； D - 样