微生物学 9 Mycology.ppt

1、第9章真菌概述,真菌（fungus）,真核细胞型微生物 主要特征 典型细胞核 完善细胞器 不含叶绿素 无根、茎、叶分化 寄生或腐生方式生存 种类多（100-150万种） 少数致病,真菌不是植物 真菌不含叶绿素，无根、茎、叶的分化,真菌的新分类,壶菌门 Chytridiomycota 子囊菌门 Ascomycota 担子菌门 Basidiomycota 接合菌门 Zygomycota,第一节 真菌的基本形状,单细胞真菌 酵母型真菌（Yeast） 类酵母型真菌,多细胞型真菌 霉菌（Mold）或丝状菌,一、真菌的形态与结构,（一）真菌的形态,1、单细胞真菌,圆形、椭圆形 （315 m） 有假菌丝体

2、出芽方式繁殖 新生隐球菌、白假丝酵母菌,单细胞真菌形态,新生隐球菌,酵母菌出芽繁殖,2、多细胞真菌,菌丝（hypha） （直径：210 m） 孢子（Spore）,多细胞真菌形态,（1）菌丝（Hypha）,由孢子生长嫩芽，长出芽管，芽管逐渐延长呈丝状称为菌丝 按功能不同分：（营养菌丝、气中菌丝、 生殖菌丝） 按结构不同分：有隔、无隔2种。 致病性者多为有隔菌丝 按形态分：多种，是识别不同菌种的 依据,（2）孢子（Spore）,是真菌的繁殖体，由特化菌丝产生 无性孢子：多数病原真菌 有性孢子,无性孢子种类,分生孢子（conidium） 由生殖菌丝末端的细胞分裂或收缩形成，有大、小分生孢子两种 叶状

3、孢子（thallospore） 菌丝内细胞直接形成，有芽生孢子、厚膜孢子、关节孢子3种 孢子囊孢子（sporangiospore）,真菌无性孢子的形态,A大分生孢子（小孢子菌）B芽生孢子和假菌丝（假丝酵母菌） C厚膜孢子（假丝酵母菌）D关节孢子（球孢子菌） E孢子囊孢子（毛霉）F小分生孢子（曲霉）,3、真菌的双相性,部分真菌在不同环境条件下可发生单细胞和多细胞两种形态可逆转换 发生与环境条件（营养、温度等）有关，如组织胞浆菌和球孢子菌 与某些真菌的感染性、致病性有关,（二）真菌的结构,真核细胞的基本结构 特殊结构 由特殊成分和结构组成的细胞壁 特殊的隔膜,1、细胞壁外的成分：荚膜,部分酵母菌细

4、胞壁外的一层低电子密度粘液，如新生隐球菌 存在方式：放射状排列微细纤维深入到细胞壁 化学组成 甘露糖、木糖及尿苷酸等 与真菌的毒力和致病性密切相关，抗吞噬、消化,2、真菌的细胞壁,位于细胞膜外层 功能：保持营养、气体、酶的自由通过、抗外界高压、某些成分与真菌形态特点有关 主要成分：蛋白质、 脂类 无机盐 多糖：占8090% 存在形式：不溶性多糖晶体，以微细纤维形 式构成骨架 高分子多糖复合物，填入骨架 中构成细胞壁的基质,（1）骨架 构成：微细纤维 化学成分：几丁质、葡聚糖（与其他真核细胞不同） 丝状菌的骨架：几丁质含量最高 与菌丝的生长、芽管的形成有关 酵母菌的骨架：葡聚糖含量最高 与维持真

5、菌外形有关 （2）基质 化学组成 蛋白质：以单独或糖蛋白形式存在，后者有酶活性（水解酶 居多）分解基质使营养物易进入胞内；也是细胞壁抗原的基础 脂类：以磷脂为主，与保持水分有关 无机盐：以磷为主 多糖：种类多，如葡聚糖、葡糖胺、葡萄糖等 含量与真菌细胞壁发育阶段有关，并影响真菌形态变化,真菌菌丝的细胞壁：四层结构 组成：无定形的葡聚糖 糖蛋白形成的粗糟网 蛋白质层 几丁质的微纤维层,（粗糟网）,3、隔膜,位置：于菌丝或细胞间 特点：低等真菌的隔膜完整，随真菌的进化，隔膜出现大小不等的小孔，并附有球形间隔小体 隔膜是防御菌丝受损的一种保护性结构 不同属真菌的隔膜各异，是真菌分类的依据之一,4、其

6、他结构 细胞膜 排列成双结构的磷脂为不恒定的微团结构，中间有大量麦角固醇类化合物，是抗真菌药的靶分子 细胞核 核小、圆、数目不等、每个菌丝节段可有12个，多者达2030个,二、真菌的培养特性和繁殖方式,营养要求：不高 沙保培养基（Sabouraud medium）葡萄糖、蛋白胨、琼脂 鉴定真菌以沙保培养基形成的菌落形态为准 最适酸碱度为pH 46 最适的温度为2228 但深部感染真菌在37下生长良好 需较高的湿度和氧气,病原菌通常生长缓慢，14周,（一）培养条件,（二）真菌菌落,酵母型菌落 yeast colony 类酵母型菌落yeast-like colony 丝状型菌落filamentou

7、s colony,酵母型菌落,C. albicans菌落(类酵母型),曲霉属,曲霉菌,丝状菌落,（三）真菌的繁殖方式,无性繁殖（asexual reproduction） 菌丝细胞断裂、细胞直接分裂、产生芽生孢子、产生 孢子囊孢子和分生孢子 有性繁殖（sexual reproduction）：原生质结合、核融合 减数分裂,三、真菌的抵抗力与变异性,对干燥、阳光、紫外线及常用消毒剂有强抵抗力 不耐热，菌丝与孢子60 1小时均可杀死 2石炭酸、10%甲醛、0.1%升汞、2.5%碘酊敏感 抗真菌药物 灰黄霉素、制霉菌素B、二性霉素B、氟康唑和酮康唑 对抗生素不敏感,（一）真菌的抵抗力,（二）真菌的变

8、异性,真菌易发生变异 原因：体外培养多次传代 培养时间过长 变异类型：形态、结构、菌落、 色素、毒力,第二节 真菌的致病性和免疫性,一、真菌的致病性 1、致病机制 粘附并侵入宿主 增殖 逃逸或破坏宿主的免疫系统 损伤宿主,2、真菌的致病类型,致病性真菌感染 （深部感染、浅部感染） 条件致病性真菌感染 真菌超敏反应性疾病 真菌中毒 真菌毒素与肿瘤,二、真菌的免疫性,（一）固有免疫 皮肤粘膜屏障 儿童头皮皮脂腺分泌脂肪酸少易患头癣 成人趾间、足底缺乏皮脂腺易患足癣 巨噬细胞虽可吞噬真菌，但不能杀灭 （二）适应性免疫 细胞免疫对真菌感染有重要作用,第三节 真菌的微生物学检查法,一、标本的采集 二、病

9、原性真菌的检查和鉴定 1、直接镜检 2、分离培养 沙保培养基、加放线酮、青链霉素 3、血清学检测：必要时 4、核酸检测：必要时,标本的采集,收集适宜部位标本 如毛发、皮硝、痰液、血液、脑脊液、及分泌物等 及时送检避免污染 真菌的直接镜检 皮硝、毛发、指(趾)甲等用10%KOH微加温处理后镜检 镜下查真菌的菌丝孢子; 或墨汁负染后镜检查荚膜,真菌的分离培养 标本经处理后, 接种常用沙包培养基(加放线菌酮青 霉素链霉素等防止污染)。25280培养数周,观察菌落. 深部感染接种血平板等培养基内必要时作真菌小培养 血清学诊断: 常用于深部真菌感染方法乳胶凝集试验补体结合试验 核酸杂交探针技术: 常用于

10、深部真菌感染的诊断,第四节 真菌感染的防治原则,无特异性的相应疫苗 注意皮肤卫生；保持鞋袜清洁、干燥；避免与患者及其污染的物品直接接触 对深部真菌感染： 提高机体的免疫力 对真菌性食物中毒： 严禁销售和食用发霉的食品,一、真菌感染的预防,二、真菌感染的治疗 药物有限，浅部感染可用制霉菌素、合成的咪唑类人偶克霉唑、酮康唑、灰黄霉素等,教学内容,细菌感染的微生物学检查法 病毒感染的微生物学检查法 真菌感染的微生物学检查法,教学大纲,掌握内容 细菌 细菌感染的微生物学检查程序 直接涂片镜检、分离培养和鉴定、生化试验、血清学试验及动物实验 病原菌抗原成分、核酸及其他成分的检测方法 血清学诊断原则及常用的方法 病毒 病毒分离鉴定方法及病毒在培养细胞中的增殖的指标 病毒数量与感染性的测定（TCID50、PFU的原理、应用） 病毒成份的检测（抗原、核酸检测） 病毒抗体检测常用方法的原理及应用、双份血清诊断意义 熟悉内容 标本的采集与送检原则 革兰染色和抗酸染色的原理 细菌药敏试验 真菌感染的微生物学检查法 了解内容 组织培养；聚合酶链反应、蛋白印迹技术的原理和应用,小结,细菌感染的微生物学检查法 病原体检查 核酸的检测 抗原、抗体的检测 病毒感染的微生物学检查 电镜及免疫电镜 病毒的