实验1果蝇形态观察.ppt

1、实验一 果蝇的性状观察和饲养管理,一、目的和要求 了解果蝇的生活习惯，掌握果蝇饲养管理的方法，学习鉴定果蝇的雌雄性别和某些遗传性状。,二、预备知识,果蝇（fruit fly，vinegar fly ），广泛存在于全球温带及热带气候区，且由于其主食为腐烂水果，在人类的栖息地如果园、菜市场等地皆可见其踪迹。,目前已发现1000多种果蝇，果蝇以酵母菌为主要食料，能发酵的水果或植物基质，都可用作果蝇的饲料。,黑腹果蝇(Drosophila ) ： 双翅目，果蝇属。 特点： 生活史短，每12天左右即可完成一个世代； 饲养容易，以玉米粉等做饲料就可以生长繁殖； 繁殖能力强，每只受精的雌蝇可以产卵500个左

2、右； 突变型多，突变性状多，多数是形态变异，容易观察； 染色体少、个体小，是一种很好的遗传学实验材料，是一种模式生物。,1908年，遗传学家摩尔根把它带上了遗传学研究的历史舞台，约在此后30年的时间中，果蝇成为经典遗传学的“主角”。,Morgan (1866-1945),摩尔根提出了基因在染色体上直线排列以及连锁交换定律，并于1933年被授予诺贝尔奖。1946年，摩尔根的学生，被誉为“果蝇的突变大师”的米勒，证明X射线能使果蝇的突变率提高150倍，因而成为诺贝尔奖获得者。 在近代发育生物学研究领域中，果蝇的发生遗传学独领风骚。1995年，诺贝尔奖再次授予三位在果蝇研究中辛勤耕耘的科学家。,果蝇

3、的生活史,1.卵 2.一龄幼虫 3. 二龄幼虫 4.三龄幼虫 5.蛹 6.成虫,25时，从卵至成蝇需10天左右。,果蝇是完全变态昆虫，生活周期可分为4个时期：卵、幼虫、蛹和成虫。 最适培养温度2025，温度越高，生长越快，但高于30不育甚至死亡。 卵：白色，椭圆形，长约0.5mm，前端背面伸出一触丝，附着在食物上。 幼虫：一龄二龄三龄，三龄体长4-5mm，幼虫头尖尾钝，头上有一黑色钩状口器。 蛹：化蛹前三龄幼虫停止摄食，爬到相对干燥的瓶壁上，形成菱形的蛹，形状由淡黄、柔软逐渐硬化为深褐色。 成虫：刚羽化的果蝇虫体较肥大，体表呈半透明，颜色逐渐加深，硬化。,三、实验材料 野生型果蝇及几种常见的突

4、变型果蝇。 四、实验器具和药品试剂 培养箱、镊子、搪瓷杯、电炉、高压灭菌器、培养瓶、棉花塞、烧杯、玻棒、滤纸、酒精棉球、解剖镜、毛笔、麻醉瓶、白瓷板。 乙醚、酒精、丙酸、酵母粉、琼脂、玉米粉、白糖。,果蝇培养基配制,清洁指管，盖上适当大小的棉塞，置高压灭菌锅 内，以121，1.5大气压消毒15分钟，冷却备用。 按配方称取培养基各组分。先取一半水加入琼脂于 电磁炉上加热溶解，再加入蔗糖煮沸。 取剩余的水将玉米粉调成糊状边搅拌边加入到琼脂糖 溶液中，煮沸。 待稍冷后加入酵母粉和丙酸，充分调匀、分装 （20 ml/管）。,果蝇培养基配方,添加 0.8 ml丙酸作为防腐剂,搬移果蝇至新培养瓶 或麻醉瓶

5、 取新培养瓶一瓶，将棉塞略为松动，放置于右手侧，取欲转移之果蝇培养瓶置于左手侧，以左手握住瓶颈，两指轻扣棉塞顶部，以右手轻拍瓶底使果蝇掉落于培养基表面，将培养瓶置于左手侧，拔起棉塞以左手两指夹住棉塞外端，再将置于右手侧之新培养瓶棉塞拔起，以右手两指夹住棉塞外端，再以右手将新培养瓶倒扣于旧培养瓶上，再以左手握住两瓶口相接处，翻转使新培养瓶位于下方，然后以右手掌心轻拍新培养瓶瓶底，使果蝇掉落于新培养瓶瓶底，然后迅速盖上各瓶棉塞。,果蝇操作方法,果蝇操作方法,果蝇可用乙醚麻醉，以方便实验操作。 麻醉方法： 取一麻醉瓶，瓶口应与培养瓶大小相仿，使两瓶口相对，培养瓶在上，用手拍击培养瓶，使果蝇落入麻醉瓶

6、内，迅速盖上棉塞，滴加3滴乙醚于小管口中的棉花上，约一分钟左右果蝇倒卧于瓶底，即可将果蝇倒出进行操作。 注意：过度麻醉将导致果蝇死亡。如果果蝇的翅膀与身体呈45度角翘起，表明麻醉过度，不能复苏。,果蝇观察、计数 取白瓷板平置于桌面，将麻醉的果蝇倒于白瓷板上，解剖镜或低倍显微镜下进行性状观察，并将雌雄果蝇分开放置。 接种观察过的果蝇（2-3对）到新配置的培养瓶中，为避免麻醉的果蝇直接掉落于培养基表面而粘着于培养基表面致死，先将培养瓶横放，将麻醉的果蝇用毛笔转移到瓶壁，待其苏醒后再将培养瓶正立。,果蝇操作方法,再麻醉 观察或计数过程中，果蝇可能苏醒，可准备一玻璃培养皿，内以胶带贴一小块棉球，滴入适

7、量乙醚，培养皿口朝下置于一旁备用，如见果蝇翻身走动可将培养皿口朝下，盖于果蝇上方待其麻醉后再移开。,果蝇形态观察 果蝇具有丰富的外表形态差异，包括眼色、眼形、翅形，刚毛形状与数目等。进行果蝇杂交实验时必须区分性别，务必熟悉雌雄果蝇的差异。,雌雄果蝇主要特征,雌果蝇 个体较大 腹部末端较尖 腹部背面有五条黑条纹 腹部腹面有6个腹片 无性梳,雄果蝇 个体较小 腹部末端较钝 腹部背面有三条黑条纹，最后一条极宽，并延伸到腹面 腹部腹面有4个腹片 前腿跗节上有性梳,果蝇雌雄外形判别 （体形大小）,雌 雄,腹部体节数目雌果蝇6节，腹部底部为产卵管，呈现圆锥状凸出。,腹部体节数目雄果蝇4节，腹部底部为交尾器，呈现黑色圆形外观。,雄果蝇在前肢跗节基部外侧具有性梳,野生型：体色灰，翅膀呈圆卵型，静止时平放交叉重叠，长度约为腹部长度的两倍,双翅目：一对翅膀+一对平衡棒,野生型：翅膀有横隔脉,野生型：眼睛颜色为砖红色，饱满圆形,野生型：刚毛头胸部以及复眼的周围具有平直，先端略弯的长型粗黑硬毛,果蝇常见突变性状,突变型：黄体（y）,突变型：白眼（w）,突变型：朱红眼（v）,突变型：墨黑眼（se）,突变型：棒眼（B）,突变型：小翅（m）,突变型：卷翅（Cy）,突变型：残翅（vg