课题2　土壤中分解尿素的细菌的分离与计数.ppt

1、课题2土壤中分解尿素的细菌的分离和数量，尿素(NH2) 2的重要农业氮肥。必须被土壤中的细菌分解为NH3，才能被植物吸收，利用CO(NH2)2 H2O CO2 2 2 NH 3分离出脲酶生成的细菌，1，课题背景，3，常见的分解尿素的微生物，孢子菌，牛球菌，捕食菌，克氏菌，棒菌，防抽象等，4，课题目的，从土壤中分离可降解乙醚的细菌，并统计每个土壤样品中含有多少细菌。1.研究事故，菌株筛选，统计平均数，设定对照组，1，课题背景，1，要素利用，尿素是重要的，尿素不能直接被农作物吸收。土壤中的细菌只有把尿素分解成氨后才能被植物利用。2，细菌可以利用乙醚的原因，土壤中的细菌分解乙醚的原因是，脲酶，3，常

2、见的降解尿素的微生物，孢子菌，牛球菌，假单胞菌，杆菌，放线菌，放线菌也可以分解乙醚。4，课题目的，从土壤中分离出可降解乙醚的细菌，统计每个土壤样品中含有多少细菌。1.研究事故，菌株筛选，统计群落数，控制设定，1，案例：PCR技术，启示：寻找目的菌种时要依据，DNA聚合酶链式反应是在体外进行少量DNA大量复制(PCR)的技术，应使用高温(930C)的DNA聚合酶。筛选菌株培养一段时间后，牙齿目的菌数增加，再通过平板稀释等分离纯化培养。2，实验室中微生物的筛选原理：人为提供有利于目的菌生长的条件(包括营养、温度、pH等)，同时抑制或阻止其他微生物的生长。3，土壤中分解乙醚的细菌的分离和计算所需的培

3、养基：啊，物理性质看，牙齿培养基属于什么种类？固体培养基、牙齿培养基中哪个用作碳源、氮源？碳源：葡萄糖，尿素氮源：尿素，5，绝大多数微生物可以葡萄糖分解，但只有脲酶合成微生物才能分解尿素。你能分析一下牙齿培养基是否有选择作用吗？如何选择？(a)菌株1筛选，培养基选择：允许特定种类的微生物生长，同时抑制或阻止其他种类的微生物生长的培养基。2、菌种：保持纯活的菌种。1 .间接计数法(生菌计数法)原则：稀释度足够高时，微生物在固体培养基上形成的菌落是由单细胞繁殖而成的，即菌落代表了原来的一个单细胞。一般方法：稀释涂层板法。每个示例的CV)M，统计殖民地数：例如，用两种同学稀释度板法测定同一土壤样品中

4、的细菌数。从相应稀释倍数为106的培养基中获得了以下两个茄子统计结果。1.甲同学在牙齿浓度上涂上了平板，统计上，菌群数为230。在2，B同学牙齿浓度下，涂上了A，B，C三个平板，统计的群落数分别为21，212，256，统计了牙齿三个平板上菌群数的平均163。你认为牙齿两个同学中谁更接近真相？牙齿两个人的实验需要改进吗？甲：没有重复实验(至少3板涂层):A组结果误差太大，渡边杏用于计算平均值。2，显微镜直接数：利用血细胞计数板(血细胞计数板)在显微镜下计算一定体积的样品中的微生物数。不能区分死细菌和活细菌；不适合运动细菌的数量。需要相对高的细菌浓度。个人的小细菌很难用显微镜观察。缺点：如何计算细

5、菌？如何计算细菌？注意事项为确保结果正确，一般在30300的平板电脑上计算菌群数。为了使结果接近实际值，可以将相同的稀释度添加到3个以上的平板上进行涂层，计算出均线的平均值。(大卫亚设，美国电视电视剧)统计殖民地往往低于活细菌的实际数量。设定计算方法、直接计算方法、板计算方法、浊度法、膜过滤法、对比的主要目的是排除实验组中非测试因素对实验结果的影响，提高实验结果的可靠性。设定对照组：例如，在实验分解尿素的细菌的筛选和统计菌的数量时，A同学(A)从相应的106倍稀释培养基中滤出了约150个菌群，而其他同学(A)在相同稀释度下仅选择了约50个菌群。分析其原因。原因：土壤不同，培养基污染或操作失误(

6、或掺有其他含氮物质)，摘要：通过牙齿实例，可以看出实验结果必须具有说服力，对比设置必须。方案1:用其他同学A同学等土壤样品进行实验，方案2: A同学配方的培养基不放土壤样品，进行培养，用空对照进行培养，确认培养基是否被污染。(阿尔伯特爱因斯坦，美国电视电视剧，统计)，结果预测：如果结果与同学A匹配，证明A是正确的。结果不同，证明A同学操作失误或培养基配方存在问题。2 .实验的具体操作土壤取样土壤，天然培养基，含有大量微生物，其中7090是细菌。有机质丰富的土壤层3-8厘米中，细菌取样要求分布着绝大多数。表土开采用小铲子和装土的信封使用前要灭菌。准备培养基：准备以尿素为唯一氮源的选择性培养基。在

7、火焰旁应该叫土壤10g。在稀释土壤溶液的过程中，每一步都要在火焰旁进行，徐璐分离其他微生物，徐璐使用其他稀释度。也就是说，微生物的土壤含量不同的目的：菌群数量在30300之间，适于计数的板块，(3)样品的稀释，样品涂层，实验时要在培养皿上做标记。注明培养基类型、培养时间、稀释度、培养物等。如果得到2个以上的群落数在30300的板块，稀释工作就比较成功，如果相同稀释倍数的3个茄子重复群落数大不相同，实验就不正确，需要重新实验。、在计算微生物的培养和观察、菌落数时，每24h计算菌落数。选择殖民地数量稳定时的记录作为结果，防止培养时间不足而丢失的群落数量。培养其他微生物往往需要不同的培养温度。细菌：

8、3037培养12d放线菌：2528培养57d真菌：在2528的温度下培养34d。关注微生物的培养和观察、菌落的形态、大小、边缘、突起、颜色、纹理等，都是区分细菌的重要手段。关注殖民地的形态、大小、边缘、突起、颜色、纹理等，都是区分细菌的重要手段。关注殖民地的形态、大小、边缘、突起、颜色、纹理等，都是区分细菌的重要手段。三。结果分析和评估1。通过对比实验，培养物有杂菌污染，菌落数高。培养物混合在不同的氮源中，菌落形态多样，菌落数量高，很难选择分解尿素的微生物。2.提示：选择每板生长30300个菌的稀释梨，计算每个样品的细菌数最合适。相同稀释倍数的三个茄子重复殖民地数不能有很大差异。差异大意味着实

9、验不准确。4，操作提示，无菌操作，标记，计划，1。在以尿素为唯一氮源的培养基中加入酚红指示剂。培养某种细菌后PH值升高，指示剂会变红，表示细菌可以分解尿素。2 .饮用水中大肠杆菌数量的测定方法是用细菌过滤器过滤一定数量的水，然后在李红-米兰培养基中放入过滤器进行培养，大肠杆菌菌落表示黑色，并通过计算水样中大肠杆菌的数量进行计算。，5 .课外扩展，大肠杆菌是黑色，中心有金属光泽或没有金属光泽，大肠杆菌是李弘美蓝琼脂(EMB)的典型特征，牙齿课题知识摘要：1。细菌群体生长规律的正确表达是()a .液体培养基中b .接种至少一种细菌。接种一种细菌。d .及时补充消耗的营养素。2.使用选择性培养基的目

10、的是培养()a .细菌。b .培养细菌。C .大量繁殖所需微生物D .表达某些微生物所需的碳源和氮源分别为()A.CO2和N2 B .葡萄糖，NH3 C.CO2，尿素D .葡萄糖，尿素，实践训练，A，C，D，4。以下说法不正确的是()a .科学家来自7080度温泉。将M3作为牙齿样品群落数的估计值，设定c .比较实验的主要目的是排除实验组中非测试因素对实验结果的影响，提高实验结果的可信度。与其他生物环境相比，土壤中微生物数量最多，种类最多。5.为了培养、分离酵母菌，清除杂菌，培养基上有()A .更多的氮源物质B .更多的碳源物质C .青霉素药物D .高浓度盐，B，C .案例：菌落数的计算方法是

11、()，a.b .例1细菌群体生长规律的正确表达是A在液体培养基上实施B，在至少一个茄子细菌C接种中接种细菌D细菌群体生长规律的测量是在一定条件下进行的。这些条件是测定细菌、一定容积培养基、液体培养基和定时细菌总数。只有在这种条件下才能测定细菌的生长规律。测量时，只能用细菌子细胞群体的变化规律来表达微生物的生长。一定体积是为微生物提供一定的生活环境。液体培养基可以通过样品推测细菌总数。接种多种细菌会发生种间斗争，无法测量微生物的生长规律。接种时要保证一定的接种量。答：A，例2微生物群体生长规律测定中，种内斗争最激烈的时期是A调节器B代数机C稳定器D衰退期，分析：种内斗争是生态因素。种内斗争反映了种内生物对生存空间及生活资源的争夺。生