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文档简介

1、微生物的分离与纯化,高中生物 选修一生物技术实践 沪科教2003课标版,山东省济南第一中学 张立立,专题2 课题1微生物培养技术,微生物的分离与纯化,实验目的： 1、了解微生物分离纯化的原理 2、体验分离纯化微生物的方法和无菌操作技术 3、了解鉴别微生物的方法,实验原理： 将聚集在一起的微生物逐步稀释分散到固体培养基的表面，在固体培养基上培养，可形成由一个细胞繁殖而来的肉眼可见的子细胞群体菌落。,实验材料、器具： 大肠杆菌菌液、自带材料、 无菌水、 牛肉膏蛋白胨培养基、 接种环、 涂布器、取样器、酒精灯、 酒精棉球（95%）、试管等,（一）制备牛肉膏蛋白胨固体培养基,实验过程：,（二）分离纯化

2、微生物（接种）,（一）制备牛肉膏蛋白胨固体培养基,实验过程：,计算,称量,溶化,灭菌,倒平板,倒平板技术,倒平板技术,3.锥形瓶瓶口通过火焰,2.在酒精灯火焰旁操作,4.培养皿打开一条缝隙，倒入培养基,5.待平板冷却凝固后倒置,注意事项,1.操作前用酒精棉球擦拭双手,防止杂菌污染,实验流程,特别提醒：,无菌操作,用火安全,1、平板划线法：,2、稀释涂布平板法：,（二）分离纯化微生物（接种）,平板划线法：,问题探究,1.如何划线才能将聚在一起的微 生物分离开？ 2. 划线要注意什么问题？,*每次划线之前都要灼烧接种环，在划线操作结束时要灼 烧接种环,*在灼烧接种环后，等其冷却后再进行划线,*不要

3、头尾相连,*不要划破培养基,平板划线法,2,1,7,3,6,4,5,问题总结,实验操作,问题探究,稀释涂布平板法：,1.如何将菌液进行稀释？ 2.如何确定稀释倍数？,6支试管，分别加入9ml无菌水,101,102,103,104,105,106,a.梯度稀释,菌液,实验操作,涂布平板,6支试管，分别加入9ml无菌水,101,102,103,104,105,106,a.梯度稀释,菌液,b.涂布平板,实验操作,滴,灼,冷,涂,问题总结,特别提醒：,接种完毕，在培养皿上贴上标签，注明时间、姓名、班级、菌种种类、 稀释倍数，将培养皿倒置,将接种后的培养基放入37恒温箱中培养，同时放入一个未接种的培养基进行培养,培养,1、所做涂布平板法和划线法是否较好地得到了单菌落？ 如果不是，请分析其原因并重做。 2、在不同的平板上你分离得到哪些类群的微生物？ 简述它们的菌落特征。,24小时观察一次，连续观察3-5次，记录每一次的实验结果。,实验结果观察：,实验结果分析：,拓展： 请利用本节课的技术探究你感兴趣的问题,小结：微生物的分离纯化,（一）制备牛肉膏蛋白胨固体培养基,（二）微生物的分离与纯化 1、平板划线法 2、稀释涂布平板法,计算,

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