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文档简介
1、实验六 细菌的分布及外界因素对细菌的影响,目的要求,1、了解细菌在自然界和正常人体的分布 2、理解消毒、灭菌及无菌操作的重要意义 3、掌握外界因素对微生物的不利影响,基本概念,1、消毒:用物理或化学方法杀死物体上病原微生物的方法。如注射前用2%的碘酒在局部皮肤涂擦;用75%的酒精棉球擦拭体温表等。用于消毒的化学药物称为消毒剂。 2、灭菌:用物理或化学方法清除或杀灭物体上所有微生物(包括病原微生物、非病原微生物、繁殖体和细菌的芽胞)的方法。 3、无菌操作:防止微生物进入机体或物体的操作方法,称无菌操作或无菌技术。如外科手术,细菌接种等。,外界因素杀菌的原理,热力杀菌的原理:是通过加热脱水干燥和大
2、分子变性。可使菌体蛋白质变性或凝固,酶失去活性,新陈代谢发生障碍,细菌因而死亡。 紫外线杀菌的原理:干扰DNA的复制与转录;导致细菌变异或死亡。 化学消毒剂杀菌的原理:使微生物蛋白质凝固与变性,致使细菌代谢发生障碍而死亡;干扰微生物酶系统和影响其代谢;损伤细胞膜:醇类、酚类、表面活性剂等损伤细菌细胞膜,引起细胞膜的渗透性改变,导致细菌死亡。,实验材料,菌种:白色葡萄球菌、变形杆菌、枯草芽胞杆菌; 培养基:普通平板、液体培养管 试剂:2%碘酒棉球、75%酒精棉球、药敏纸片、无菌生理盐水 器材:接种环、接种针、酒精灯、镊子等,实验内容与方法,一、细菌分布 (一)细菌在自然界的分布 (二)细菌在正常
3、人体的分布 二、外界因素对细菌的不利影响 (一)湿热对细菌的杀灭作用 (二)紫外线对细菌的杀灭作用 (三)消毒剂对细菌的杀灭作用 (四)抗生素对细菌的杀灭作用,一、细菌的分布,1、空气中的细菌检查 2、水(自来水)中细菌的检查 3、周围环境中细菌检查 自由发挥(如笔、硬币) 4、手和咽喉中细菌的检查,二、外界因素对细菌的影响,(一)湿热对细菌的杀灭作用 (二)紫外线对细菌的杀灭作用 (三)消毒剂对细菌的杀灭作用 (四)抗生素对细菌的杀灭作用,(一)温度对细菌的影响,原理: 细菌适宜生长温度:37度 加热到100度 细菌繁殖体死亡 有芽胞的细菌不会死亡(如枯草芽胞杆菌) 检测对象:大肠杆菌(或白
4、葡菌)、枯草杆菌 步骤:分别取上述两种细菌,设置对照组后,分别沸水浴10min,培养24h,看结果,目的要求: 认识高温(煮沸法)对细菌繁殖体和芽胞的作用,材料: 1、菌种:枯草杆菌(有芽胞) 变形杆菌 (无芽胞) 2、肉汤培养基、水浴锅,37 24h,枯草杆菌,枯草杆菌,大肠杆菌,大肠杆菌,100 5min,100 5min,菌膜,澄清,浑浊,普通条件培养下细菌生长状况,枯草杆菌,大肠杆菌,煮沸杀菌后细菌生长状况,枯草杆菌,大肠杆菌,(二)紫外线对细菌的影响,原理:紫外线可以诱发细菌DNA形成胸腺嘧啶二聚体,使细菌死亡 取有芽胞细菌(枯草杆菌)、无芽胞细菌,设置对照后,以紫外线照射30min,培养24h,看结果,班级、姓名/学号、大肠 枯草,uv30,培养箱,紫外线杀菌的结果,(三)消毒剂对细菌的影响,消毒剂:2%碘酒棉球,75%酒精棉球 以碘酒(酒精棉球)消毒手指前后,分别涂抹培养基,培养24h后,看结果,(四)抗生素对细菌的影响(药敏试验 ),平板培养基上徒均匀涂布细菌后,以沾有庆大霉素、头孢曲松、青霉素、环丙沙星的四张纸片贴在培养基表面 培养24h后,看结果,目的要求:,1、了解抗生素敏感试验的操作方法;
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