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文档简介
1、一、蛙心起搏点的观察 医学生理教研室 谢新华,哺乳动物心脏的特殊传导系统除结区外,均具有自动节律性,但各部分的自律性高低不同,以窦房结的自律性最高,正常的心脏搏动每次都有窦房结发生,依次传到心房、心室引起收缩,故窦房结被称为哺乳动物的心起博点。两栖类动物的心起博点是静脉窦。 实验目的:用结扎法观察蛙心起博点及蛙心脏不同部位自律性的高低。,【目的和原理 】,【实验对象】,缝合线 蛙类手术器械 滴管两只 任氏液,【实验器材和药品】,【实验步骤】,1.取蟾蜍一只,破坏脑和脊髓。 2.打开胸腔,暴露心脏。,【实验步骤】,一、离体蟾蜍心脏制备 1.取蟾蜍一只,破坏脑和脊髓 2.打开胸腔,暴露心脏。,(腹
2、面),(背面),3. 观察静脉窦、心房和心室的跳动并计跳动 次数。 4.在主动脉干下穿一线备用。用玻璃分针将 心尖翻向头端,暴露心脏背面,在静脉窦 和心房交界的半月形白线(窦房沟)处用 线结扎阻断静脉窦和心房之间的传导, 观察心房、静脉窦的跳动频率有何变化。,5. 待心房、心室的跳动恢复后,分别计数静 脉窦和心房、心室的跳动频率,并比较其频率 差别。然后再取一线在房室沟处作一结扎(斯 氏第二结扎),阻断房室之间的传导,观察心 房和心室的跳动情况。分别计数每分钟跳动次 数。将实验结果填入下列表格。,心脏的特殊传导系统具有自动节律性,但各部分的自律性高低不同,两栖类动物以静脉窦的自律性最高。正常心
3、脏每次兴奋都从自律性最高的部位开始,依次传到心房、心室,相继引起心房、心室收缩,把自动节律性最高的部位称为心脏的起搏点。当正常的得自律性受到影响而发生改变时,心房、心室的活动也发生相应变化;如果起搏点下传的冲动受阻,心脏下部的活动会暂时停止,甚至表现自己的自动节律性。,【实验小结】,二、期前收缩与代偿间歇,心肌兴奋性变化与收缩活动的关系, 有效不应期对应心肌收缩和舒张早期 不产生强直收缩, 保证心脏交替舒缩,期前收缩与代偿间歇,代偿间歇:期前收缩之后一次较长的心舒期,窦房结正常刺激恰好在期前兴奋的有效不应期之内,【实验对象】,生物机能实验系统 张力换能器、蛙心夹 缝合线、双凹夹 蛙类手术器械
4、万能支台 滴管两只 任氏液,【实验器材和药品】,打开蟾蜍胸腹部,暴露蛙心; 用蛙心夹夹住蛙心心尖,并连接张力换能器与刺激电极; 开启生物信号采集分析系统并打开通道; 描记正常的收缩曲线; 选择刺激时机,给蛙心有效刺激; 获取期前收缩与代偿间歇曲线,并标记; 整理实验结果,书写实验报告。,【实验步骤】,通过本次实验可以验证心肌细胞的有效不应期较长,故不能发生完全强直收缩,从而保证了心脏泵血功能的正常进行。,【实验结论】,蛙心灌流,【实验原理】,心脏的自动节律性活动,需要有一个合适的理化环境。,蟾蜍心脏离体后,用任氏液灌流,心脏在一定时间内可保持节律性收缩与舒张。改变灌流液的成分,心脏跳动的频率和
5、幅度会随之发生改变。,用离体蛙心灌流的方法观察:, Na+、K+、Ca2+ 酸、碱度 E、Ach,对心脏活动的影响,【实验目的】,【实验对象】,生物机能实验系统 张力换能器、蛙心夹 蛙心插管、试管夹 缝合线、双凹夹 万能支台 蛙类手术器械 滴管两只,【实验器材和药品】,任氏液 0.65NaCl lKCl 3CaC12 l:10,000 E l:10,000 ACh 3乳酸 2.5NaHCO3,【实验步骤】,一、离体蟾蜍心脏制备 1.取蟾蜍一只,破坏脑和脊髓。 2.打开胸腔,暴露心脏。,【实验步骤】,一、离体蟾蜍心脏制备 1.取蟾蜍一只,破坏脑和脊髓 2.打开胸腔,暴露心脏。,(腹面),(背面)
6、,【实验步骤】,一、离体蟾蜍心脏制备 3.蛙心插管, 在主A干下穿一线打 一松结;在左主A下再穿一线结扎。, 在A圆锥、左主A根部剪 口,将蛙心插管插入心室内。,插管插入心室标志 见血液涌入插管内,并随心跳上下波动。,【实验步骤】,一、离体蟾蜍心脏的制备 4.将松结线扎紧,并固定在插管的侧管上。,5.摘出心脏 任氏液冲洗数次 (避免损伤静脉窦),【实验步骤】,一、离体蟾蜍心脏的制备,二、连接实验装置,换能器,1.用试管夹将蛙心插管固 定在万能支台上 2.把张力换能器固定在万 能支台上,在心室舒张 期将与换能器相连的蛙 心夹夹在心尖上。,*换能器的连线应与插管中轴在同一直线上,即与地面垂直,3.
7、启动生物机能实验系统,“循环实验”,“实验项目”,“蛙心灌流”,描记蛙心收缩曲线,四、观察项目,调整增益 、走纸速度,使蛙心收缩曲线至最好观察形态。,(一)描记正常心搏曲线,曲线幅度 收缩的强弱 曲线疏密 心率 曲线规律性 心跳的节律性 曲线基线 舒张的程度,顺序 观察项目 药量 心肌(率、力)变化,12345678,任氏液,灌流,0.65%NaCl,灌流,3%CaCl2,12滴,12滴,1%KCl,1:10000 E,1:10000 Ach,3% 乳酸,2.5% NaHCO3,1 滴,1 滴,24 滴,12滴,(二)离子和药物的影响,*【注意事项】, 当每种化学药物作用已明显时,应立即 将蛙
8、心插管内液体吸出而换上任氏液数 次,以免心肌受损。 须待心跳恢复正常后,才能进行下一实 验项目。 每次换液时,蛙心插管内液面应保持相 同高度。, 吸管使用要分开,不可混淆。,顺序 观察项目 药量 心肌(率、力)变化,12345678,任氏液,灌流,0.65%NaCl,灌流,3%CaCl2,12滴,12滴,1%KCl,1:10000 E,1:10000 Ach,3% 乳酸,2.5% NaHCO3,1 滴,1 滴,2 4滴,正常,力,力,舒张不完全,力,力,力,心率,力,心率,12滴,恢复正常,【实验结果】,【实验结果】,【结果分析】,任氏液:正常对照 2. 0.65%NaCl灌流,0.65%Na
9、Cl灌流 Ca2+内流,兴奋-收缩耦联,收缩力,Ca2+i,【结果分析】,任氏液:正常对照 3. 3%CaCl2(12滴),Ca2+内流,兴奋-收缩耦联,收缩力,Ca2+i,Ca2+ o,*舒张期Ca2+与肌钙蛋白不完全解离,产生Ca2+强直,基线上移。,【结果分析】,任氏液:正常对照 4. 1%KCl(1滴),AP平台期缩短 Ca2+内流,兴奋-收缩耦联,收缩力,【结果分析】,任氏液:正常对照 5. 1:10000E(12滴),Ca2+内流 肌浆网释放Ca2+,E-C耦联,收缩力,与心肌1受体结合,cAMP,4期 If 、I CaT通道,4期自动去极速度,自律性,心率,【结果分析】,任氏液:正常对照 6. 1:10000Ach(1滴),最大复极电位 4期K+外流,自律性,心率 ,与心肌M受体结合,K+外流, Ca2+内流,Ca 2+ i,E-C耦联,收缩力,【结果分析】,任氏液:正常对照 7. 3
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