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文档简介

1、与酶有关的实验,比较过氧化氢在不同条件下的分解 探究酶的高效性 探究酶的专一性 探究温度对酶活性的影响 探究PH对酶活性的影响,高考实验范围、类型和要求,实验原理: 新鲜肝脏中有较多的过氧化氢酶。经计算,质量分数为3.5%的FeCL3溶液和质量分数为20%的肝脏研磨液相比,每滴FeCL3溶液中的Fe3+数,大约是每滴研磨液中过氧化氢酶分子数的25万倍。 实验材料: 新鲜的质量分数为20%的肝脏研磨液(如猪肝、鸡肝) 新配制的体积分数为3%的过氧化氢溶液 质量分数为3.5%FeCL3溶液,实验步骤:,常温,90,FeCl3,肝脏研磨液,2滴,2滴,不明显,少量,较多,大量,不复燃,不复燃,变亮,

2、复燃,过氧化氢在不同条件下的分解速率不一样,反应条件,对照组,实验组,探究酶的高效性,2.验证或探究酶具有高效性 高效性是一种比较性概念,是指与无机催化剂相比具有高效性。因此应设置酶与无机催化剂对同一反应的催化效率的对照。不能用酶和蒸馏水做对照,若这样是验证酶的催化功能。 设计思路,底物+酶溶液底物分解速率 底物+等量无机催化剂底物分解速率,实验组: 对照组:,检测,检测,H2O2 H2O+O2,过氧化氢酶,Fe3,实验原理:,新鲜的肝脏中含有过氧化氢酶,氯化铁是一种无机催化剂,都可以催化H2O2分解成H2O和O2。,注意观察实验现象,并分析实验设计思路,自变量、因变量和 无关变量,并设计表格

3、记录实验步骤和结果。,试管,1号,2号,H2O2溶液,3mL,3mL,鸡肝匀浆,少许,少许,Fe3,点燃后无明火的卫生香,很快复燃,不复燃,实验结论,与无机催化剂相比,过氧 化氢酶具有高效性。,(1)自变量:,催化剂的种类,(2)因变量:,底物分解速率,检测方法:,点燃但无明火的卫生香复燃程度,火焰大小 气泡产生的速度、多少,(3)无关变量:,过氧化氢溶液的量、浓度、配制的时间; 鸡肝匀浆的新鲜程度;实验室温度等。,验证或探究酶的高效性,检测 实验组:底物+相应酶溶液底物被分解 检测 对照组:另一底物+等量相应酶溶液底物不被分解,3.验证或探究酶的专一性,检测 实验组:底物+相应酶溶液底物被分

4、解 检测 对照组:相同底物+等量另一种酶溶液底物不被分解,自变量:不同底物,自变量:不同酶溶液,因变量:底物是否被分解,因变量:底物是否被分解,设计思路一,设计思路二,设计温度(或pH )对酶活性的影响实验要注意三点: (1)设置多组不同温度(或pH)相互对照 (2)注意在酶发挥作用前设置实验要求的不同温度或pH (3)鉴定反应速度的两种方法: 检测生成物增加的速度。 检测反应物减少的速度。 要选择恰当的试剂检测因变量,4.验证或探究温度对酶活性的影响:,实验材料:,淀粉酶,验证或探究温度对酶活性的影响: 自变量是温度,应设置具有一定梯度的多个不同温度条件,比较某种酶的催化效率。一般至少应设置

5、“低温、适温、高温”三个指标。 不同的酶有不同的最适温度。 动物的体温就是自身各种酶的最适温度(35-40 )。 植物体内的酶最适温度在40-50 之间 细菌和真菌体内的酶最适温度差别较大(如Taq酶) 淀粉酶最适温度是60,如何控制自变量?,水浴法,探究温度对淀粉酶活性的影响,冰水中,60水浴,沸水浴,放置2min,1ml,1ml,1ml,1滴,1滴,1滴,摇匀混合,放置反应5min,变蓝,变蓝,不变蓝,淀粉酶在60 中活性最强,步骤2、3不能 颠倒,先控制条件再混合,5.验证或探究pH对酶活性的影响: 自变量是pH,应设置具有一定梯度的多个不同pH条件,比较某种酶的催化效率。一般至少应设置“低pH、最适pH、高pH”三个指标。 注意:胃蛋白酶最适pH在1.5左右。,操作时必须先将酶置于不同环境条件下(加蒸馏水、加氢氧化钠、加盐酸),然后再加入反应物(如可溶性淀粉液)。 注意:若加入酶后,先加入反应物,再加入盐酸或氢氧化钠,易使反应物在酶的作用下水解,无法证实环境过酸和过碱对酶活性的影响。,如何控制自变量?,用氢氧化钠、盐酸调节不同的pH

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