ProteOn XPR36 and Bioplex.pptx

1、ProteOn XPR36 and Bio-Plex,Yao Ling 2014-6-18,ProteOn XPR36,原理介绍,当一束P偏振光在一定的角度范围内入射到棱镜端面，在棱镜与金属薄膜的界面将产生表面等离子波。当入射光波的传播常数与表面等离子波的传播常数相匹配时，引起金属膜内自由电子产生共振，即表面等离子共振（SPR）。,原理介绍,基于光学表面等离子共振现象； 芯片表面生物分子间的相互作用，会引起金膜表面折射率变化，最终导致SPR角变化,ProteOn XPR36原理介绍,ProteOn XPR36的优点,ProteOn XPR36的应用,HMGB1 promotes recruit

2、ment of inflammatory cells to damaged tissues by forming a complex with CXCL12 and signaling via CXCR4J. Exp. Med., 2012, 551-563Impact factor: 13.2,应 用 实 例,研究背景,有炎症或损伤的组织，会产生大量不同的细胞因子和炎症因子，这些因子与白细胞游走和归巢相关。 HMGB1: 一种核蛋白，可由坏死细胞或者细胞在应激条件下释放，能促进细胞因子的释放及炎症细胞迁移，但其中具体的机制未知； 已知HMGB1诱导的细胞迁移需要激活NF-KB信号通路，而该信

3、号通路的激活能导致Cxcl12基因的转录，且HMGB1能保护CXCL12不被降解，这些信息提示，HMGB1与CXCL12在功能和物理上有一定的相互作用； 根据上述信息，作者研究了HMGB1在招募炎症细胞到损伤阻止过程中相互作用的受体分子及下游信号分子。,研究思路及相应的实验方法,证明HMGB1诱导的细胞迁移与CXCL12和CXCR4的相互作用相关,寻找在其中发挥作用的受体分子,探究HMGB1-CXCL12与CXCR4的相互作用方式,不同刺激条件下迁移细胞计数、pull down、CXCL12浓度测定,探究HMGB1是否能促进CXCL12诱导的细胞迁移,不同刺激条件下迁移细胞计数、ERK磷酸化测

4、定、钙离子动员测定,不同条件下迁移细胞计数,探究HMGB1与CXCL12是否形成复合体,NMR、SPR,FRET,证明HMGB1-CXCL12通过CXCR4诱导细胞迁移,白细胞数量测定、ELISA法测定HMGB1-CXCL2浓度、CBA法测定细胞因子浓度,实验结果1：封闭CXCR4或CXCL12，会抑制HMGB1诱导的成纤维细胞迁移,实验结果2：HMGB1能够增强CXCL12诱导的细胞迁移,10 nM CXCL12,实验结果2：HMGB1能够增强CXCL12诱导的细胞迁移,实验结果3：HMGB1通过依赖于CXCR4的方式增强CXCL12诱导的迁移，不依赖于RAGE和TLR,实验结果4：HMGB

5、1与CXCL12形成了复合体,实验结果：CXCL12和HMGB1-CXCL12以不同方式与CXCR4二聚体相互作用,实验结果：在体内，HMGB1和CXCL12通过CXCR4诱导细胞迁移，不依赖于RAGE,HMGB1-CXCL12,结 论,HMGB1通过与CXCL12形成复合体的方式促进炎症细胞招募到损伤组织，并且，是受体CXCR4参与到此过程； NMR和SPR方法，证明了HMGB1与CXCL12存在相互作用。,ELISA、CBA、Bio-Plex的比较,Thank you!,ProteOn XPR36的应用简要介绍,研究背景,有炎症和损伤的组织，会产生大量不同的细胞因子和炎症因子，这些因子与白细胞游走和归巢相关。虽然这些因子单独所起的作用已经了解的比较透彻，但是，这些细胞因子与其它细胞因子或者炎症因子结合后所发挥的作用却知之甚少。 HMGB1有很多受体什么的，不知道是不是所有的都需要在什么反应中起作用，大致是要说他研究的这个还不清楚 HMGB1是一个由坏死细胞或者细胞在应激条件下释放的核蛋白，该蛋白能通过与TL