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1、3.1.2 色谱分类,按固定相的固定方式分： 柱色谱、纸色谱、薄层色谱 按分离原理分： 吸附色谱、分配色谱、 离子交换色谱和凝胶排阻色谱,3.13 色谱特点 分离效能高；灵敏度高；分析速度快；应用范围广；未知物定性困难,用于高沸点或热不稳定有机物的分离分析,用于气体混合物和低沸点有机物的分离分析,按流动相的状态分： 气相色谱 和 液相色谱,3.1.4 色谱基本参数及色谱曲线的表征,1 色谱图（流出曲线）,峰高 h：色谱峰到基线的距离。（定量依据）,基线：无组分进入检测器时的信号时间曲线。,保留时间tR：从开始进样到色谱峰值出现所需的时间,保留值：具有特征性，定性依据,调整保留时间：组分在固定相

2、内的停留时间 tR/ tR tm,3.2.1 色谱分离过程中的基本关系式,1 分配系数(平衡常数）（K）：组分在两相（流动相、固定相）中的浓度之比。,2 分配比（k/）：组分在两相（流动相、固定相）中的质量之比。又称容量因子或容量比。,K与温度、压力、组分性质、流动相和固定相性质有关。,k与温度、压力、组分性质、流动相和固定相性质以及相比有关。,相比：流动相与固定相的体积之比（）,3.2色谱理论基础,3.保留值与容量因子的关系：,结论： K、 k 均表征了组分与固定相的作用力大小，其值越大，表明作用力越大，迁移速度越慢； 两组分的分配系数或分配比相差越大，越易实现分离,容量因子可以从色谱图上求

3、出； 调整保留时间与容量因子成正比。,4 相对保留值（选择性因子、分离因子）,组分2与组分1的调整保留时间之比（ 一般 1),是两组分在色谱体系中平衡分配差异的量度，它是热力学参数，与组分性质、流动相和固定相性质以及温度有关。是广泛应用的色谱定性依据,3.2.2塔板理论（热力学理论） ：分离效率的计算方法,设L表示色谱柱长，H塔板高度，n理论塔板数,结论：保留时间越长，峰越窄，柱效率越高；柱效率与组分性质及色谱条件有关；容量因子的大小决定了n和n有效的差别大小。,3.2.3 速率理论（动力学理论）：如何减小峰宽,1956年荷兰学者Van Deemter(范第姆特）提出： 范第姆特方程,(1)

4、A 涡流扩散项,A=2dp， 填充不规则因子， dp填充物平均粒径,（2）B / U : 分子扩散项（纵向扩散项）,B=2Dg,Dg 组分在气体流动相中的扩散系数，与组分、载气性质，柱温、柱压有关。,弯曲因子：硅藻土填充物0.50.7; 空心柱1,减小分子扩散项的措施： 采用分子量较大的载气（N2） 提高载气流速 降低温度,（3）CU 传质阻力项,C=Cg+Cl（适用于液体固定相）,气相传质阻力项Cg ：,液相传质阻力项Cl ：,其中dp填充物平均粒径， Dg 组分在气体流动相中的扩散系数,其中df液膜厚度，Dl 组分在液相中的扩散系数,减小传质阻力项的措施：采用分子量较小的载气（H2）；降低

5、载气流速；适当提高温度；减小填充物粒径；适当降低液膜厚度。,范第姆特方程曲线HU,最佳载气流速的选择,3.2.4 分离度,选择性因子较大即两组分保留值差别较大 热力学特性 柱效率（塔板数）高即色谱峰较窄 动力学特性,两组分完全分离的条件：,1 分离度的定义,分离度R: 两相邻色谱峰保留值之差与两峰宽之和的一半的比值。 热力学和动力学特性-分离性能的总指标,适合于对称峰（高斯峰）,适合于不对称峰,一般地，R1.5 时认为两峰已完全分离（重叠小于1）,2 分离度与柱效率和选择性因子的关系,设两相邻组分1、2的峰底宽度相等即wb1= wb2 = wb,代入上式,3分离度的优化,（1）分离度R与n的关

6、系,（2）分离度R与k/的关系,k/=25 最佳,（3）分离度R与的关系,解：（1）从图中可以看出，tR2=17min, Y2=1min, 所以； n = 16(tR2/W2)2 =16172 = 4624 (2) 解法一：tR1= tR1- tM =14-1=13min t”R2=tR2 tM = 17-1 = 16min,相对保留值 = tR2/tR1=16/13=1.231,解法二：两峰宽相等,12.7 色谱定性和定量分析,1 定性分析：依据保留值 （1）利用纯物质对照定性：适用于组分性质已有所了解，组成比较简单，且已有纯物质的样品分析。 （2）加入已知物增加峰高法：应用于指定色谱峰的定

7、性 （3）相对保留值法：要求基准物纯度高、与待测组分的保留值相近。适用于有文献值或待测组分纯物质的样品。特点：可消除实验条件波动带来的影响。 （4）保留指数定性法 规定：正构 烷烃CzH2z2的保留指数为100z 规律：保留指数与化合物的调整保留时间的对数成线性关系即I b + a lgt /R (x),方法特点：可消除实验条件波动带来的影响。重现性好，温度系数小，无需纯物质对照,（5）色质联用法：无需标准物质，适合于复杂,2定量分析,定量依据：被测组分的质量w与响应信号（峰面积）A成正比，即 W=f A, 其中f为校正因子 （1）峰面积的测量 A=1.065hw1/2 对称峰 A=1/2(w0.15+w0.85)h 不对称峰 自动积分仪法 峰高代替峰面积 剪纸称重法 （2）绝对校正因子,相对校正因子,常用，一般省去“相对”二字,标准物：苯（热导检测器）；正庚烷（氢焰检测器）。 可自测或查表得到,（3）定量计算方法,归一化法,适用条件：所有组分必须出峰。否则结果偏高。,特点：对多组分同时测定简单、准确；操作条件的变化对定量结果影响不大；微量组分的测量误差较大,内标法,对内标物的要求： 试样中原来不存在的纯物质 能完全与待测组分分离且保留时间相差不多 含量、灵敏度与待测组分相近 稳定性好。 内标法的优点 进样量不必准确 比值恒定 操作条件的变化对定量结果