实验室质量控制.ppt

1、分析实验室质量控制,河南省疾控中心地方病所 2014-12-16,内容,实验室管理规范 误差 实验室内质量控制 实验室间质量控制 数据处理,一个好的实验室应符合GB/T 27025-2008要求,GB/T 27025-2008,组织与管理 人员 设施和环境 设备 量值溯源 样品 记录 报告 外部支持和服务 抱怨,组织与管理,GB/T27025-2008（ISO/ICE 17025:2005）两大部分：管理要求和技术要求。 适用于实验室建立质量、管理和技术体系并控制其运作。 实验室或其所在的组织应是一个能够承担法律责任的实体。应有相应的完整的管理体系。,人员,有管理人员和技术人员; 是非常重要的

2、因素，实验室技术能力相当大程度体现在人员素质上，特别强调人的技能和经验，它是直接影响报告质量的要素; 技术人员要根据相应教育、培训、经验和可证明的技能进行资格确认，管理层对技术人员应制订教育、培训、技能目标。,设施和环境,属于资源保证过程; 具备必要的设施和环境条件进行有效的监控是保证检测工作正常开展的先决条件; 环境条件要能适应三方面的要求： 标准/规程的要求 特殊精密仪器设备的需要 人员本身的需要,设备,任何检测都要通过设备来实现，实验室应配备正确进行检测的全部设备； 设备应有标识、记录、日常维护和控制，有操作指导书，要有校准和检定。,量值溯源,溯源的目的就是强调全国和世界范围内量值的统一

3、，都能溯源到国家或国际计量基准，即SI单位的复现值，它是全球一体化和互认的基础。 溯源性：通过一条具有规定不确定度的不间断的比较链，使测量结果或标准的值能够与规定的参考标准（通常是国家或国际标准）联系起来的一种特性。 量值溯源是保证测量结果准确可靠的关键环节。,样品,通过抽样来获得样品。 抽样是取出物质、材料或产品的一部分作为其整体的代表性样品进行检测的一种规定程序。 抽样方法有多种方法，通常采用的统计抽样法是建立在概率统计理论基础上的。 抽样记录应做到清晰、明确、具体。,记录,是所取得的结果或提供完成活动的证据性文件。 分质量记录和技术记录两大类。 记录的作用： （1）是质量要求满足程度或质

4、量体系运行有 效性的客观证据 （2）是检测能力的客观证据 （3）是质量体系文件执行结果的客观证据 （4）是可追溯性的依据 （5）是采取纠正措施和预防措施的依据 要求：及时、完整、规范,报告,检测报告是实验室最终成果的体现，相当于企业的产品。能否出具高质量的报告，是实验室能否适应检测市场需求的核心问题。 报告的质量不仅仅与原始记录、数据整理、报告编制、复核与批准有关，更应扩展到检测的全过程， GB/T27025-2008规定的所有要素都是为保证报告质量服务的。,外部支持和服务,实验室所寻求的服务与供应品的采购应实施控制，以保证其符合GB/T27025-2008 的要求，符合供应品、试剂和消耗材料

5、的相关要求才能投入使用。,抱怨,客户满意程度很低时就会发出抱怨，甚至申诉； 客户有抱怨，说明我们的质量体系中某个环节出了问题，对于抱怨（申诉）一定要严肃认真，查清事实，及时处理。若因质量原因给客户造成经济损失，实验室应承担民事和法律责任。,典型的检测流程图和相关质量要素及要求,样品接收、入库 样品管理 样品验收、出入库登记、唯一性识别系统、待检和已 检样品的分别保管、样品制备、 样品的安全及存放。 编制检测计划 计划管理 委托通知单 通 项目 外协 量值溯源 量值溯源到国家基准，仪器设备按计划送检，仪器设 知 分包 供应 备标贴计量状态标记 客 数据 数据处理方式、数据记录格式、原始记录的更改

6、校核。 户 领出样品 仪器设备 准确度和规格符合标准要求、设备使用前必须校准、 进行检测 良好的维护和管理 人员素质 持证上岗、定期培训。 环境条件 环境条件符合标准要求、环境监控、进入检测区受控 检测方法 规程、标准和各类作业指导书 不合格 合格 各级复核 报告管理 报告的信息、内容、格式应符合准则要求、报告应受控 颁发报告 存入档案 档案管理 档案存放及保密，档案借阅,质量控制的目的，是把分析测试的误差控制在容许范围内，保证分析结果有一定的精密度和准确度，使分析数据在给定的置信水平内，有把握达到要求的质量。 质量控制的目的是控制误差，那 么误差究竟从那里来？,从盐中碘酸钾的直接滴定分析看误

7、差的来源,分析过程 误差的来源 不确定度的估计 基准碘酸钾 碘酸钾纯度 0.017% 碘酸钾称量 0.088mg 碘酸钾溶液配制 0.333ml 碘酸钾的摩尔质量 0.00054g/mol 标定硫代硫酸钠消耗体积 0.022ml 硫代硫酸钠 被标定的硫代硫酸钠体积 0.036ml 滴定盐中碘酸钾消耗硫代硫酸钠体积 0.022ml 盐中碘酸钾 被测盐的称量 0.0153g 结果统计 有效数字 正确使用有效数字 数据修约 正确进行数字修约 分析人员 技能 提高实验技能 责任心 杜绝过失误差 对颜色、界面等的识别能力 方法 方法本身的误差,测量和误差的关系,测量的准确是相对的，绝对的准确是不存在的。

8、 误差是可以控制的，受控的误差是允许的。 好的检验员应该对自己在实验室的每一个操作做到心中有数。 管理出质量，控制出质量。,什么是误差？,真值：在某一位置和状态下，某量的效应体现出的客观值和实际值 称为真值 。 真值是未知的，因此误差也是未知的； 真值是相对可知的，因此误差也是相对可知的； 所以真值也称理论真值、约定真值、相对真值。 误差：反映测试值偏离真值的大小，分为： 绝对误差=测试值-真值 相对误差=绝对误差/真值,误差=测试值-真值,误差的来源 误差常常不是独立的，而是联合作用的,标准误差：测试总是相对进行的，基准物、参考物质、 标准器等， 它们本身体现出来的量值就有误差，存在不确定度

9、。 装置误差：仪器的转换系统、传输系统、指示系统对测量和被测量单位的影响；制造仪器的误差；仪器调试不良的误差。 环境误差：工作环境、仪器的使用条件等引起测量的误差。 人员误差：测试人员感觉器官的差异、敏感性和固有习惯等产生的误差。 方法误差：方法本身不够完善引起的误差。,误差的分类和特点 系统误差、随机误差、过失误差,系统误差 由确定原因引起； 具有倾向性； 重复出现，有一定规律 不对称性 不服从正态分布 增加测量次数不能抵偿,随机误差 由偶然因素引起 无倾向性 不固定 对称性 测定次数足够符合正态分布 抵偿性：误差的算术均值随测量次数的无限增加而趋于零。,消除过失误差后误差的相互关系,误差

10、系统误差 随机误差 （真值） X（平均值） X1（测量值） 绝对准确度 偏差 单个测量准确度,系统误差影响分析的准确度，随机误差影响分析的精密度，从而影响分析的准确度,精密度高准确度不一定高； 精密度差准确度不可能高； 消除系统误差情况下，精密度高，准确度也高。,* +,+ +, +,*,*,实验室质量控制,实验室内质控 自我控制 发现随机误差和新出现的系统误差 评价分析质量的稳定性 是分析的基础、必需、常规,实验室间质控 外部控制 发现系统误差和实验室间数据的可比性 评价实验室的测试系统和实验室的分析能力 有效的校核是参加与标准实验室间的比对,实验室内部质量控制,灵敏度 定义 一个方法的灵敏

11、度是指该方法对单位浓度或单位量的待测物质的变化所引起的响应量变化的程度。它可以用仪器的响应量或其他指示量与对应的待测物质的浓度或量之比来描述。在实际工作中常以标准曲线的斜率度量灵敏度。一个方法的灵敏度可因实验条件的变化而改变，在一定的实验条件下，灵敏度具有相对的稳定性。,实验室内部质量控制,灵敏度意义： 痕量分析中检测的样品含量几乎与零管在同一数量级； 反映分析实验室和测试系统的本底和基础； 反映实验室及其分析人员的水平。,实验室内部质量控制,灵敏度方法1： 做一条标准曲线和6个空白管； 计算6个空白管光密度的均值和标准差； 用均值加上2倍标准差(尿碘为减去）得出一个值； 在标准曲线上算出这个

12、值相应的碘的浓度，即方法的灵敏度； 重复以上检测3次，算出平均灵敏度。 结果判断：平均灵敏度应等于或略小于方法规定的检测限，否则表明空白试验不合格，需要查找原因加以改进。,灵敏度,此3表为尿碘过硫酸铵法按方法检测结果。 3次检测灵敏度分别为2.1、3.7、5.3，平均灵敏度为3.7 g/L。,实验室内部质量控制,灵敏度方法2 做一条标准曲线和20个空白管。计算20个空白管光密度的均值和标准差，以均值减去3倍标准差的值代入回归方程，得到的碘的浓度即为灵敏度。 结果判断：灵敏度应等于或略小于方法规定的检测限，否则表明空白试验不合格，需要查找原因加以改进。,灵敏度,此表为尿碘过硫酸铵法按方法2检测结

13、果。 平均灵敏度为3.0 g/L。,实验室内部质量控制,精密度 1、批间精密度 做10次独立检测，每次做平行测试，共2-3个浓度 计算每个浓度10次共20个结果的均值、标准差和变异系数 2、批内精密度 一次检测2-3个浓度的样品，每个浓度做15个平行样 计算每个浓度的均值、标准差和变异系数,精密度-批间,精密度是指在一定条件下进行多次测定时，所得测定结果之间的符合程度，通常表示测量结果中随机误差的大小。 批间精密度的方法： 选取2个不同浓度尿样，独立检测10次，每次做平行检测。计算每次的均值，10次测量的均值、标准差及变异系数。 结果判断：变异系数应小于10%。,例1 低浓度尿样批间精密度测试

14、,精密度-批间,精密度是指在一定条件下进行多次测定时，所得测定结果之间的符合程度，通常表示测量结果中随机误差的大小。 批间精密度的方法： 选取2个不同浓度尿样，独立检测10次，每次做平行检测。计算每次的均值，10次测量的均值、标准差及变异系数。 结果判断：变异系数应小于10%。,例1 低浓度尿样批间精密度测试,精密度-批内,精密度是指在一定条件下进行多次测定时，所得测定结果之间的符合程度，通常表示测量结果中随机误差的大小。 批内精密度的方法： 选取两个不同浓度尿样，每份尿样做15个平行检测。计算均值、标准差及变异系数。 结果判断：变异系数应小于5%。,例1 低浓度尿样批内精密度测试,例2 高浓

15、度尿样批内精密度测试,实验室内部质量控制,加标回收率 意义：反映结果的准确度。 判断： 1、绘制回收率质控图，将结果标在其上判断； 2、结果不得超过检测方法规定的回收率范围； 3、方法未做规定的，以95%-105%为目标值计算出95%的可信区间，作为正常允许范围。,加标回收率 方法-选取20-100g/L尿样，标液浓度为400 g/L。按右表进行加标： 回收率的计算 （IA-IB）X100/IC IA：实测碘浓度 IB：1、2管平均碘浓度 IC：加标后碘浓度 3-8管的平均回收率 选另一浓度尿样重复以上实验，计算两次实验的平均回收率。,实验室内部质量控制,加标回收率-举例,两个浓度平均回收率为

16、96.28%。,回收率的局限性： 1、样品中某些干扰因素对检测结果具有恒定的偏差； 2、分析过程中对样品和加标样品的操作完全相同，以致操作、损失、环境污染等对二者产生相同的作用，使误差相互抵消，使分析中的一些问题难以发现； 3、样品中待测物在价态、形态上的差别、加标量的多少、样品中原浓度的大小等，均影响回收结果。,实验室内部质量控制,标准曲线的绘制、检验和回归 意义：1、反映方法的精密度和灵敏度； 2、分析仪器的精密度； 3、量取标准溶液量具的准确度； 4、分析人员的操作水平。 评价标准曲线： 1、相关系数 r 的绝对值 大于或等于0.999； 2、0管和300管的光密度差值应达到0.8 3、

17、任取标准曲线的2点代入方程，其理论值和拟合值的相对偏 差不超 过5%； 注意： 1、线性不好情况下，用数理统计的方法拟合回归方程，会引入无法消除的系统误差； 2、回归方程仅限于估算检测范围内的变量，而不能随意外推；,标准曲线检验,标准曲线评价： 此条标准曲线相关系数大于0.999 任取两点代入方程，其拟合值与理论值的相对偏差均不超过5% 零管光密度与300管光密度之差为1.391，大于0.8,实验室内部质量控制,平行双样测定 意义 1、减少随机误差； 2、对同批测定的精密度进行估计。 结果判断： 1、在常规批量分析中，应随机抽取样品总量的 10-20%做平行测定； 2、分光光度法痕量检测，平行

18、双样相对偏差不大 于10%，最好是5%； 3、同批检测或一段时间累计检测平行双样合格率 大于95%；,标准物质的对照分析 意义： 1、标准物质作为一个相对真值，其量值传递为不同时间、 地点的测试结果提供了可靠的参照； 2、分析人员对分析质量进行判断（特别是准确度），查 找系统误差，寻求改进； 3、供实验室人员“练兵”之用，提高技术素质。 注意：在实验室分析系统有良好的精密度的基础上使用 标准物质，才能获得预期的效果。,实验室内部质量控制,使用标准物质是发现系统误差的有效方法方法-检测样品时每隔25-30放入一组标准物质，与样品同时检测；每批样品应至少检测两个浓度标准物质。可用标准物质检测结果做

19、标准物质质控图，其标准值作为均值，均值不确定度作为上下控制限。,使用标准物质是发现系统误差的有效方法,使用标准物质发现随机误差改进质量,实验室内部质量控制,内质控图 制备内质控样品 (1)直接用标准物质 (2)实验室自己制备内质控样品,收集尿样,初测,低,中,高,混匀 分装,-20C 储存,均匀性检验 (1) 随机从全部制备的内质控样品中抽取约5%的样品 (2) 按程序检测这些样品 (3) 结果的变异系数应小于10%，最好为5%以内（标准物质） 定值 (1) 每天检测一次（单次或平行），共检测20天 (2) 计算 均值和 2SD , 3SD (3) 绘制质控图,如何使用质控样品 (1)批质控样

20、品 (2)由监督人员使用的盲样 （3）将质控样品检测结果标在质控图中,标准曲线,QC,样品,QC,样品,QC,内质控图,内质控样定值：每天检测一次，共检测20天，计算均值和标准差，得到绘制质控图所需的均值2SD，均值3SD 右表为20天检测原始结果及均值、标准差。,内质控图,左表为又检测了10次的原始结果。右图为内质控图。 质控图纵坐标是以20天测量结果的均值、均值SD、均值2SD、均值3SD绘制；横坐标为检测日期。 计算全部30天检测结果的均值和标准差，作为再绘制质控图的标准。,实验室内部质量控制,实验室内部比对 实验室内部比对包括不同测试人员间比对、仪器间和不同方法的比对。 人员比对：当测

21、试人员变动或新参加工作的人员上岗前培训时，应控制其他实验条件，让参加比对的两名检验员分别按照统一的操作规程，完成全程序检测，两人检测结果相对误差不大于5%。 仪器比对：当采用测试新仪器或想了解某仪器的测试性能时，让同一个有经验的检验员分别用不同仪器按照统一的操作规程完成检测，检测结果的相对误差不大于5%。 方法比对：当评价新方法时，选择有经验的检验人员分别用两种方法对同一样品和标准物质进行测试，结果作为评价新方法的依据。,实验室间质量控制,实验室间比对及能力验证试验 实验室间比对 定义：按照预先规定的条件，由两个实验室或多个实验室对相同或类似检测物品进行检测的组织、实施和评价。 目的： 确定某个实验室对特定试验或测量的能力，检测监控实验室的持续能力； 识别可能与实验室相关的问题如人员的检测力和仪器校准；,实验室间质量控制, 确定新方法的有效性和可比性，监控老方法的有效性和可比性； 向客户提供更高的可信度； 鉴别实验室间的差异； 确定一种方法的能力特性，通常称为共同试验； 给标准物质赋值，并评价其有效性。,实验室间质量控制,能力验证 能力验证一般用于： 获得能力验证满意结果的个体实验室对其采用合适的质量控制措施是一种鼓励；获得能力验证不满意结果的实验室，则通过反馈促使其采取纠正措施。 为特殊任务