干细胞移植治疗急性心肌梗死-徐强课件

1、干细胞移植治疗急性心肌梗死-徐强,干细胞移植治疗急性心肌梗死The effects of MSCs transplantation for acute myocardial infarction,天津中医药大学第二附属医院 The Second Teaching Hospital of TUTCM 徐 强,干细胞移植治疗急性心肌梗死-徐强,Background,干细胞移植治疗急性心肌梗死-徐强,Miranda D. Grounds, et al. The Journal of Histochemistry 130:1631-8,干细胞移植治疗急性心肌梗死-徐强,干细胞移植治疗急性心肌梗死-徐强

2、,是骨髓中除造血细胞以外的中胚层来源的细胞，其细胞特性稳定，在连续传代培养和冻存后仍具有多向分化潜能。 在特定的诱导条件下，骨髓间充质干细胞可以分化为间充质组织中的各类细胞，包括：骨、软骨、脂肪、肌腱、韧带等细胞。,骨髓间充质干细胞 （mesenchymal stem cell, MSC）,干细胞移植治疗急性心肌梗死-徐强,（K.D. Bunting, R.G. Hawley .Biology of the Cell 2003,95:563578）,MSC(mesenchymal stem cell) DIFFERITION,干细胞移植治疗急性心肌梗死-徐强,梗死的心脏注入富含鼠的骨髓干细胞后

3、，40%的心肌层得到恢复。 Olic. Nature. 2001,410:701-705 用人的骨髓来源的干细胞使心肌梗死鼠30%40%的心功能得到改善。 Kocher. Nat Med. 2001,7:430-436,干细胞移植治疗急性心肌梗死-徐强,Current problem-evidence,骨髓干细胞究竟能否分化成心肌细胞却始终有争议，目前仍无法完全证实MSC可分化为心肌细胞。,？,干细胞移植治疗急性心肌梗死-徐强,New Focus-microenvironment,急性心肌梗死后局部微环境发生的一系列炎症反应，对干细胞的存活、分化、迁移等都有很大影响。,干细胞移植治疗急性心肌梗

4、死-徐强,MSC,原代传代前细胞形态（100）,贴壁细胞增殖融合，铺满瓶底90% 左右，未贴壁细胞是造血干细胞及组织碎片,干细胞移植治疗急性心肌梗死-徐强,p1（100）,p4（100）,p3（100）,p2（100）,干细胞移植治疗急性心肌梗死-徐强,流式细胞鉴定,CD106 、CD90表达阳性， CD31、CD45表达阴性,干细胞移植治疗急性心肌梗死-徐强,DiL标记结果（200）,干细胞移植治疗急性心肌梗死-徐强,AMI,Normal,复方丹参滴丸对骨髓间充质干细胞移植治疗急性心肌梗死干预作用的实验研究,干细胞移植治疗急性心肌梗死-徐强,Normal AMI,干细胞移植治疗急性心肌梗死-

5、徐强,NBT,干细胞移植治疗急性心肌梗死-徐强,NORMAL AMI,干细胞移植治疗急性心肌梗死-徐强,AMI Group 左室后壁增厚，运动幅度变小,CDDPMSC Group 左室后壁厚度均匀，运动幅度正常,干细胞移植治疗急性心肌梗死-徐强,对AMI大鼠心脏射血分数的影响,孙兰军等，中华医学临床杂志，2008，6（2）：4,干细胞移植治疗急性心肌梗死-徐强,心肌梗死面积测定结果,模型组,MSCs复方丹参滴丸组,干细胞移植治疗急性心肌梗死-徐强,A，培养MSC用DiI（红色）和Hoechst33258（蓝色）染色的照片； B，心脏切片用Hoechst33258染色的照片，箭头显示部分移植的M

6、SC； C，对照组心脏几乎没有MSC定位；,干细胞移植治疗急性心肌梗死-徐强,MSC移植后成活和增殖,干细胞移植治疗急性心肌梗死-徐强,极少量移植地细胞能表达-actinin，说明开始向心肌细胞分化，但这种分化是不完全的，因为没有横纹的出现。相对较多的细胞表达血管性血友病因子(vWF) ，说明移植的MSC能够向内皮细胞分化。,干细胞移植治疗急性心肌梗死-徐强,CX-43染色,在同一视野看到Dil标记的植入的红色荧光的MSCs和二抗FITC标记的相应绿色荧光的 CX-43阳性表达,CDDP+MSC组（200）,干细胞移植治疗急性心肌梗死-徐强,CX-43染色,MSC组（200）,干细胞移植治疗急

7、性心肌梗死-徐强,Troponin 染色,CDDP+MSC组（200）,在同一视野看到Dil标记的植入的红色荧光的MSCs和二抗FITC标记的相应绿色荧光的 Troponin 阳性表达，,干细胞移植治疗急性心肌梗死-徐强,Troponin 染色,MSCs Group Troponin 表达（200）,干细胞移植治疗急性心肌梗死-徐强,对心脏胶原沉积的影响,HE Picrosirius red HE Picrosirius red,normal,MSCs+CDDP,MSCs,model,干细胞移植治疗急性心肌梗死-徐强,各心梗组大鼠的胶原含量无显著差异。但是，MSC和CDDP+MSC移植使心肌梗

8、死区I/III型胶原比值分别降低了77和84。说明细胞移植能增加III型胶原含量，改善心肌顺应性，可能会对心功能有益。,干细胞移植治疗急性心肌梗死-徐强,*,*,Balcalin induced migration of Mscs,干细胞移植治疗急性心肌梗死-徐强,Real-time quantitative RT-PCR analysis of VEGF, SCF, SDF-1 and MCP-1 mRNA change,* p 0.05, * p 0.01, compared to model. (n=6),*,*,*,*,*,干细胞移植治疗急性心肌梗死-徐强,*,*,干细胞移植治疗急性心

9、肌梗死-徐强,Conclusions,CDDP可能通过多种途径和机制干预诱导植入梗塞大鼠心肌干细胞的分化成活，并使植入细胞表达心肌特异性蛋白，说明植入细胞已分化为心肌样细胞，同时可抑制胶原沉积，改善微环境。 有望成为中医药治疗心血管疾病的一个新的发展方向，作为现代治疗方法的补充手段，为临床带来广阔的应用前景。,干细胞移植治疗急性心肌梗死-徐强,Is stem cell therapy for cardiac repair ready for patients?,干细胞移植治疗急性心肌梗死-徐强,Randomized Clinical Trials of Stem Cell Therapy for MI,Circulation. 2006;114:353-358.,干细胞移植治疗急性心肌梗死-徐强, Arrhythmias Restenosis, Accelerated Atherosclerosis, and Coronary Obstruction Abnormal Cellular Differentiation,In addition，Safety Concerns,干细胞移植治疗急性心肌梗死-徐强,Is stem cell therapy for cardiac repair ready for patients