第五章---药物的鉴别

1、工业药物分析 第五章 药物的鉴别,主讲人：孙强强,基本要求,掌握：鉴别试验的目的、药物性状和物理常数的测定及其对药物鉴别的作用，常用鉴别方法与选择。 熟悉: 鉴别试验的影响因素与注意事项。 了解：鉴别试验方法的验证。,序言,定义：根据药物的分子结构、理化性质，采用物理、化学或生物学方法来判断药物的真伪。 目的：不是对未知物进行定性分析，而是证实贮藏在有标签容器中的药物是否为其所收载的药物。 意义：它是药品质量检验工作中的首项任务，只有在药物鉴别无误的情况下，进行药物的杂质检查、含量测定等分析才有意义。,性质：药物鉴别试验的试验方法虽有一定的专属性，但不足以确证其结构，因此不能赖以鉴别未知物。

2、化学药物的结构确证不同于药物鉴别试验，其主要任务是确认所制备的原料药的结构是否正确，适用于未知化合物的鉴别或者目标对象的结构确认。,第一节 鉴别试验的条件,（一）溶液的浓度 溶液的浓度主要指被鉴别物质的浓度，其大小影响结果的判断。（如化学法中要观察沉淀、颜色；UV法中max, A, E1%1cm) （二）溶液的温度 温度过高可使产物分解，导致颜色变浅，甚至观察不到结果。,（三）溶液的酸碱度 使反应物处于活化状态、反应产物处于稳定和以观察状态。 （四）试验时间 有机化合物的化学反应较慢，需要一定的反应时间和条件。 （五）干扰成分的存在 药物制剂的鉴别，其它成分则会干扰检查结果的现象观察。,第二节

3、 鉴别试验的项目,项目鉴别项下规定的试验方法仅用于鉴别药物的真伪，对于原料药，还应结合性状项下的外观和物理常数进行确认。 性状：反映了药物特有的物理性质，一般包括外观、溶解度和物理常数等。 (一)外观：指药品的外表感观和色泽，包括药物的聚集状态、晶型、色泽以及臭、味等性质。,如二巯基丁二钠的描述为“本品为白色至微黄色的粉末；有类似蒜的特臭”。,例子：CHP2010中盐酸异丙嗪的性状描述： 本品为白色或乳白色结晶性粉末；有微臭，味 （色泽） （聚集状态） （臭） 极苦；有引湿性；遇光渐变色；水溶液显酸性反应。 （味） 盐酸异丙嗪片的性状描述：本品为糖衣片，除去包 衣后显白色。,第二节 鉴别试验的

4、项目,(二) 溶解度：一定程度上反映了药品的纯度。药品在不同溶剂中的溶解性能用“极易溶解、易溶、溶解、略溶、微溶、极微溶解、几乎不溶或不溶”来描述。,第二节 鉴别试验的项目,(三) 物理常数： 用于药品鉴别，反映其纯杂程度。药典收载的物理常数包括：相对密度、馏程、熔点、凝点、比旋度、折光率、黏度、酸值、皂化值、羟值、碘值、吸收系数。,其测定结果不仅对药品具有鉴别意义，也可反映药品的纯度，是评价药品质量的主要指标之一。,1、熔点,例子：雌二醇熔点：本品的熔点为175180； 格列本脲的熔点：本品的熔点为170174。,CHP2010收载有三种测定方法,第二节 鉴别试验的项目,2、比旋度,在一定波

5、长与温度下，偏振光透过长1dm且每1ml中含有旋光性物质1g的溶液时测得的旋光度。 作用：反映手性药物特性及其纯度的主要指标，用以区别药品、检查纯度或测定制剂的含量。,第二节 鉴别试验的项目,维生素C的比旋度测定：20.521.5,例子,手性,第二节 鉴别方法,要求：专属性强、再现性好、灵敏度高、操作简便快速,光谱鉴别法,色谱鉴别法,TLC鉴别法,HPLC鉴别法,GC鉴别法,色谱鉴别法,显微鉴别法,生物学鉴别法,利用药效学和分子生物学等有关技术来鉴定药物品质的一种方法,主要用于抗生素、生物药物以及中药的鉴别,通常分为生物效应鉴别法和基因鉴别法两大类。 按对象目的不同可分为：免疫鉴别法、细胞生物

6、学鉴别法、生物效价鉴别法、纯指标鉴别法、DNA遗传标记法，mRNA差异显示鉴别法。,指纹图谱与特征图谱鉴别法,2.红外光谱鉴别法(Infrared spectrophotometry),用于组分单一、结构明确的原料药，特别适合不易区别的同类药物，专属性强，应用广泛。 Ch.P、JP、BP采用标准图谱对照法 USP、BP采用对照品法 试样制备方法： 压片法、糊法、膜法、溶液法,红外光区的波长范围约为0.75-1000m，又可分为近红外光区(0.75-2.5m)、中红外光区 (2.5-50m)和远红外光区(50-1000m)，相应的有近红外光谱、中红外光谱和远红外光谱。其中以 2.5-25m (波

7、数 4000-400cm-1)的中红外光谱应用最广，通常所说的红外光谱即指这一波段的中红外光谱。化合物的红外光谱用红外光谱图来描述。,特征区,指纹区,4.原子吸收法(Atomic Absorption) 利用原子蒸气可以吸收由该元素作为阴极的空心阴极灯发出的特征谱线的特性，根据供试溶液在特征谱线处的最大吸收和特征谱线的强度减弱程度进行定性、定量分析。,5.X射线粉末衍射法 晶体对X射线会产生衍射现象,不同的物质有其特定的衍射图。,三、色谱鉴别法,利用不同物质在不同色谱条件下，产生各自的特征色谱行为（比移值或保留时间）进行的鉴别试验。 采用与对照品在相同条件下进行色谱分离，并进行比较，根据两者保

8、留行为和检测结果是否一致来验证药品的真伪。,1.薄层色谱鉴别法 (Thin-Layer Chromatography),2.GC和HPLC鉴别法,三、色谱鉴别法,四、质谱鉴别法 (Mass Spectrometry),一、般鉴别试验（General Identification Test）,第三节 一般鉴别试验,只能证实是某一类药物，而不能证实是哪一种药物！ 只适用于纯品，混合药物或有干扰时不适用！,依据某一类药物的化学结构或物化性质的特征，通过化学反应来鉴别药物的真伪。,第三节 一般鉴别试验,中国药典附录收载的一般鉴别项目 无机金属盐类、无机酸盐、有机酸盐、有机氟化物类、芳香第一胺类、丙二酰

9、脲类、托烷生物碱类。,一、无机金属盐 1. 焰色反应 焰色反应是某些金属或它们的挥发性化合物在无色火焰中灼烧时使火焰呈现特征的颜色的反应。有些金属或它们的化合物在灼烧时能使火焰呈特殊颜色。这是因为这些金属元素的原子在接受火焰提供的能量时，其外层电子将会被激发到能量较高的激发态。处于激发态的外层电子不稳定，又要跃迁到能量较低的基态。不同元素原子的外层电子具有着不同能量的基态和激发态。在这个过程中就会产生不同的波长的电磁波，如果这种电磁波的波长是在可见光波长范围内，就会在火焰中观察到这种元素的特征颜色。利用元素的这一性质就可以检验一些金属或金属化合物的存在。这就是物质检验中的焰色反应。,第三节 一

10、般鉴别试验,常见的焰色反应：钠-黄、钾-紫、钙-砖红、钡-黄绿等。,2. 另外铵盐的检测,第三节 一般鉴别试验,3. 无机酸根的鉴别 氯化物: 硝酸银鉴定法以及二氧化锰氧化法。 硫酸盐: 氯化钡鉴定法、醋酸铅鉴定法以及盐酸排除法。 硝酸盐: 硫酸及硫酸亚铁显色法、与铜反应生成红棕色气体法、高锰酸钾排除法。 磷酸盐: 硝酸银鉴定法、氯化铵镁沉淀法及钼酸铵沉淀法。,二、有机酸盐,FeCl3反应,加稀HCl，即析出白色沉淀；分离，沉淀溶于醋酸铵溶液。,中性时呈红色,酸性时呈紫色,1.水杨酸盐,2.酒石酸盐 取供试品中性溶液，置洁净的试管中，加氨制硝酸银试液数滴，置水浴中加热，即生成游离银并附在试管内壁形成银镜。,1.有机氟化物,有机氟化物变成无机氟化物,三、其他的鉴别试验,2.芳香第一胺类,生成橙黄到猩红