寄生虫医学课件：双语寄生虫实验五

1、Experiment 5,.Malaria Parasite 疟原虫 .Toxoplasma 弓形虫 .Blastocystis hominis 人芽囊原虫 .Cryptosporidium 隐孢子虫 .Sarcocystis suihominis 猪人肉孢子虫,Purpose and Requirements,-Master morphological characteristics of erythrocytic cycle of plasmodium vivax; -Master morphological characteristics of early trophozoite and

2、 gametocyte of plasmodium falciparum; -Familiar with morphological characteristics of exoerythrocytic stage and the phases in the mosquito; -Familiar with preparation of blood film and stain; -Familiar with morphological characteristics of trophozoite and cyst of Toxoplasma; .拷贝文件夹“标本复习”，做好标本考试复习。 .

3、班长在下次实验课前2-3天，到106馆一楼112室领取玻片和透明胶。,Plasmodium vivax, P.v 间日疟原虫,In man,In female anopheline:,Exoerythrocytic stage 红细胞外期,Erythrocytic stage 红细胞内期,Life cycle of Malaria parasite include：,Exoerythrocytic stage 红外期,.在肝细胞内进行裂体增殖； .间日疟原虫和卵形疟原虫速发型子孢子红外期发育的时间分别是6-8天和9天，而迟发型子孢子为数月至年余；恶性疟原虫6天，三日疟原虫11-12天。,P.

4、v Erythrocytic cycle 红内期,Early trophozoit/ Ring form, R 早期滋养体/环状体,Large trophozoite, T 晚期滋养体/大滋养体,Schizont, S 裂殖体,Gametocyte,G, 配子体,裂体增殖周期48 h,-经姬氏或瑞氏染色，基本结构如下：,-被寄生红细胞变化：体积、颜色、薛氏小点 -疟原虫：核数目、胞质形状、疟色素,早期滋养体/环状体,P.v Early trophozoit/Ring form, R,. 核1个, . 胞质环形,胞质与核之间有空泡,呈戒指状, . 大小约为红细胞直径的1/3.,. 被寄生红细胞无

5、改变.,晚期滋养体/大滋养体,P.v Large trophozoite, T,. 被寄生红细胞体积稍增大,色淡,出现鲜红薛氏小点.,. 核1个, . 胞质增多变形,形状不规则，有空泡， . 胞质内出现棕褐色烟丝状的疟色素.,未成熟裂殖体,P.v Young schizont, YS,. 被寄生红细胞体积增大,色淡,出现鲜红薛氏小点.,. 核分裂, 数目12个, . 胞质渐变圆，空泡消失, . 疟色素分散在胞质中.,成熟裂殖体,P.v Mature schizont, MS,.被寄生红细胞体积增大,色淡,出现鲜红薛氏小点.,.核分裂, 数目12个, .胞质分裂,围绕核,形成裂殖子,数目12-2

6、4个, .疟色素集中成1-2团，位于虫体中央或一侧.,Microgametocyte 雄配子体,Macrogametocyte 雌配子体,.核1个,疏松,近中央,.核1个,致密,偏向一侧,.被寄生红细胞体积增大,色淡, 鲜红薛氏小点明显.,P.v Gametocyte, G 配子体,.细胞质几乎充满胀大的红细胞，疟色素均匀分布于其中.,Plasmodium falciparum, P. f 恶性疟原虫,36-48 h,T,YS,MS,外周血中不易见到！,P. f Erythrocytic cycle 红内期,P.f Early trophozoit, Ring form, R,早期滋养体/环状

7、体,. 核1个, . 胞质环形,胞质与核之间有空泡,呈戒指状, . 大小约为红细胞直径的1/5.,多虫型,双核型,边缘型,P.f Gametocyte, G 配子体,疟色素集中于核的周围,疟色素散于核的周围,.被寄生的红细胞因破裂而不见或仅见一部分,P.f Gametocyte, G 配子体,一个红细胞被P.f and P.v 同时感染,注意与裂殖体鉴别!,In female anopheline 在雌性按蚊体内发育,Exflagellation of macrogametocyte 雄配子体出丝,Oocyst located on the midgut wall of mosquito 蚊胃

8、壁上囊合子(卵囊),Oocyst 卵囊,Sporozoite子孢子,-Sporozoite 子孢子,-Sporozoite is the infected stage. -P. vivax and P. ovale sporozoite have two types: tachysporozoite and bradysporozoit.,-Thin blood film / thick blood film stained with Giemsa or Wrights stain.,-Thick blood film,-Thin blood film,Laboratory diagnosis

9、,-具体操作见后面,Toxoplasma gondii 刚地弓形虫,弓形虫滋养体(Giemsa stain),Trophozoite of Toxplasma gondii,-Tachyzoite 速殖子(吉氏染色),Tissue cyst of Toxplasma gondii 弓形虫包囊,Oocyst of Toxplasma gondii 弓形虫卵囊,Modified acid-fast stain 改良抗酸染色法,.Oocyst 卵囊,Cryptosporidium隐孢子虫,Sarcocystis suihominis 猪人肉孢子虫,Sarcocyst肉孢子囊,Blastocystis

10、 hominis 人芽囊原虫,Stained with Iodine,患者女性，47岁，因外伤于1997年4月5日入院手术。术前血常规，血红蛋白10.3g/L，红细胞3.351012/L，白细胞21.6109/L。术中输血400ml，术后第9天起不规则发热，实验室检查血红蛋白8.6g/L，红细胞2.71012/L，白细胞15.2109/L，晚幼红细胞30/100个白细胞。成熟红细胞易见破碎红细胞，红细胞内查见疟原虫小滋养体，确诊为恶性疟。经三联抗疟治疗后痊愈。,Case discussion 1,思考题：1.该患者有可能经什么方式感染恶性疟原虫？ 2.本病的诊断依据是什么？ 3.恶性疟与间日疟

11、的治疗一样吗？,患者男性，30岁，因头痛高热3天入院治疗，刚援非回国。血常规检查：血红蛋白15g/L，红细胞4.541012/L。入院后第2天出现昏迷，持继高热，反复多次镜检，于入院后第4天在红细胞内查见疟原虫小滋养体，同时在骨髓涂片中查见疟原虫小滋养体，确认为恶性疟原虫，会诊后确诊为恶性脑型疟。,思考题：1.从疟疾流行区（如非洲）工作、旅游、学习归国的人员，如发现原因不明的高热，应考虑其可能患了什么病？应做什么检查？ 2.试述脑型疟的临床表现及致病机制？,Case discussion 2,女，48岁，因右眼突然失明20余天入院。病人无诱因突然出现右眼失明，无眼部红、痛、闪光症状。入院后查：

12、右眼视力：光感、外眼无异常，玻璃体出血。静脉点滴血栓通，口服活血化疲、软坚散结中药，右眼视力无提高。局麻下行“右眼玻璃体切割术”，手术顺利。术后第1天，右眼视力0.2，结膜充血，角膜透明；瞳孔药物性散大，玻璃体清亮，眼底见视盘界清，色正常，C/D = 0.2，视网膜动脉稍红，A: V=1:2，颞下方视网膜可见陈旧性出血灶，考虑玻璃体出血即为此处出血灶渗入，局部伴色素沉着，脉络膜萎缩；术后第3天视力0.5；术后两次抽血查弓形体阳性（PCR法）。追问病史，病人儿童时期视力正常，近来病人有养猫史4年，最后诊断：右眼玻璃体出血；弓形体性视网膜脉络膜炎。,思考题：结合病例分析感染弓形虫的途径有哪些？,C

13、ase discussion 3,1.临床疟疾发作与疟原虫的繁殖有何关系？ 2.试讨论引起疟疾暴发性流行的原因。 3.简述如何诊断疟疾？ 4.刚地弓形虫感染为何分布很广？试述弓形虫致病的特点？ 5.什么叫机会致病性原虫？有哪些常见的机会性致病原虫？ 6.引起贫血的寄生虫有哪些？致病机理？,Questions:,1.鼠疟原虫(Plasmodium bergheri 伯氏疟原虫)接种小白鼠：取液氮保种的伯氏疟原虫，解冻后用生理盐水稀释。在无菌操作的条件下，给健康小白鼠作腹腔内注射，每只1ml，感染后3-5天，外周血即可查到原虫（由老师完成）。 2.薄血片制作：用剪刀剪去鼠尾未端少许，取洁净玻片一张

14、，从鼠尾取血一小滴置玻片中部，另取一张玻片作推片，将推片的短边接触血滴，待血液向两侧扩散后，以两玻片呈30-40角，将推片自右向左匀速快捷向前推进，即成薄血膜。理想的薄血膜应是血量和宽度适中，平滑不起波浪，未端成舌形。,实验操作：薄血涂片制作与染色,Preparation of blood film and stain,-血涂片制作和染色,Preparation of blood film and stain,1-3为薄血片制作；4-6为厚血片制作,-血涂片制作和染色,实验操作：薄血涂片制作与染色,3.固定：待血片阴干后，用甲醇固定薄血膜，自然晾干。 4.染色：按1毫升水加4滴吉氏原液的比例配

15、制染液。将涂有血膜的玻片血膜面朝下，一端架在铁丝上，用吸管滴注染液于玻板与血片之间，使染液与血膜完全接触，染色20min。 5.冲洗：自来水轻轻冲洗血膜，晾干镜检。,镜下观察血片的操作步骤及注意事项,1.10倍镜下经过观察后选择一较好的视野作为油镜下观察，避免红细胞严重重叠或太稀少的视野.,2.油镜下观察时按固定方向，如从左到右，以避免在同一部位重复观察。,1.10倍镜下经过观察后选择一较好的视野作为油镜下观察，避免红细胞严重重叠或太稀少的视野.,镜下观察血片的操作步骤及注意事项,3.注意与血小板、白细胞、淋巴细胞、细胞碎片、染液颗粒等鉴别。,1.10倍镜下经过观察后选择一较好的视野作为油镜下

16、观察，避免红细胞严重重叠或太稀少的视野.,2.油镜下观察时按固定方向，如从左到右，以避免在同一部位重复观察。,镜下观察血片的操作步骤及注意事项,1.10倍镜下经过观察后选择一较好的视野作为油镜下观察，避免红细胞严重重叠或太稀少的视野.,4.考虑为疟原虫时，依据形态特征分析是R、T、YS、MS or G。,5.形态典型的拍片，存图。,3.注意与血小板、白细胞、淋巴细胞、细胞碎片、染液颗粒等鉴别。,1.10倍镜下经过观察后选择一较好的视野作为油镜下观察，避免红细胞严重重叠或太稀少的视野.,2.油镜下观察时按固定方向，如从左到右，以避免在同一部位重复观察。,镜下观察血片的操作步骤及注意事项,分布于非

17、洲扎伊尔的加丹山区森林中，自然宿主为丛林鼠，蚊媒为杜氏按蚊。 红内期裂体增殖周期约24h，早期滋养体为典型的环状体，偶见双核型，晚期滋养体近似圆形，阿米巴样外形不典型，成熟裂殖体含裂殖子数在小鼠为6-10个，配子体形状类似人间日疟原虫。疟色素细小，黑色或金黄色。 多虫寄生在同一红细胞极为普遍(注意与裂殖体鉴别)。被寄生的红细胞胀大。 实验室里长期用红内期原虫转种，不易见到配子体。,附：伯氏疟原虫(Plasmodium berghei),实验内容,（一）示教内容： 1.间日疟原虫红细胞内期各期，恶性疟原虫早期滋养体和配子体、疟原虫囊合子、子孢子以及红外期标本：油镜下观察 2.弓形虫速殖子(吉氏染

18、色)：油镜下观察 3.隐孢子虫卵囊(改良抗酸染色)：图片示教 4.猪人肉孢子虫肉孢子囊：高倍镜下观,实验内容,（二）自已操作观察：中倍镜油镜下观察 1.间日疟原虫(P.v)薄血片：观察环状体(R)、晚期滋养体(T)、未成熟裂殖体(YS)、成熟裂殖体(MS)和配子体(G) 2.恶性疟原虫(P.f)薄血片环状体(R)：观察环状体 3.恶性疟原虫(P.f)薄血片配子体(G)：观察配子体 4.刚地弓形虫滋养体： 5.鼠疟原虫薄血片：观察各发育期,实验报告要求: -拍摄图片(共5张)包括: P.v 滋养体、未成熟裂殖体、成熟裂殖体、配子体中任选2个(如果找不到，可在自己做的鼠疟血涂片上观察拍片代替) P.fR和G 弓形虫滋养体 -只标注虫期名称，英中文 如图示:不需标注结构名称,Ring form环状体,不要使用红色字体； 文件名格式：学号姓名-5,用擦镜纸沾擦镜液擦拭油镜头和高倍镜头！ 将玻片标本归回到标本架上，注意左右槽对齐！ 将自已制做的鼠疟原虫玻片放入水槽锅头内！,离开教室前请完成以下工作：