【实验】培养基的配制和灭菌.ppt

1、欢迎您,綦江版画,“菌绣”,专题2 :微生物的培养与应用,课题1 微生物的实验室培养,微生物,微生物：个体难以用肉眼观察的一切微小生物的统称。 包括：细菌、病毒、真菌和少数藻类等。,特点：结构都相当简单,个体多数十分微小。通常要用光学显微镜或电子显微镜才能看到，有的甚至没有细胞结构。,事实1：绿色植物是自养型生物，提供一 定的光照和土壤条件能生存。,事实2：动物是异养型生物，需提供有机物才能生存。,微生物的代谢类型是什么呢？实验室要提供怎样的条件供其生长？,事实3：微生物无处不在，无孔不入。,如何保证在实验室培养纯净的某种微生物？,在实验室培养微生物，一方面需要为培养的微生物提供合适的营养和条

2、件，另一方面需要确保无处不在的其他微生物无法混入。,培养基,无菌技术,基础知识,（一）培养基 （二）无菌技术,课前自主学习检测（一）- 培养基,1、培养基是_。 2、按照物理性质分，培养基分为_和_。两者的区别在于是否加入_。 3、培养基中一般含有满足微生物生长所需的营养物质，包括_，此外培养基还需要满足微生物生长对_的要求。,固体培养基,液体培养基,凝固剂琼脂,碳源、氮源、无机盐和水,PH、特殊营养物质和氧气,提供碳元素的物质,提供氮元素的物质,按照微生物对营养物质的不同需求，配制出供其生长繁殖的营养基质。,技能训练1,教材P15：据牛肉膏蛋白胨培养基的营养构成表，请思考： 1、该培养基是固

3、体培养基还是液体培养基？ 2、该培养基的碳源和氮源分别是什么？,牛肉膏和蛋白胨既提供碳源又提供氮源,牛肉膏是用新鲜牛肉经过剔除脂肪、消化、过滤、浓缩而得到的一种棕黄色至棕褐色的膏状物。 蛋白胨用新鲜牛骨及牛肉混合提取，经过消化、过滤、浓缩、喷雾干燥而得到的一种浅黄色至类白色的干燥粉末。易溶于水，水溶液呈淡黄色。,技能训练2,假如你是一名生物实验员老师，请分别为同学们提前准备好培养基中相关的营养物质。（重点阐述碳源和氮源分别是什么） （先独立思考，最后小组可以小声交流） A组同学培养硝化细菌。 B组同学培养大肠杆菌。,碳源：二氧化碳;氮源：氨,碳源和氮源：蛋白胨或牛肉膏,碳源,无机碳源：,有机碳

4、源：,CO2、NaHCO3 、CaCO3,葡萄糖、蔗糖、麦芽糖、淀粉和纤维素等,自养微生物,异养微生物,氮源,无机氮源：,有机氮源：,氮气、铵盐、硝酸盐等,牛肉膏、蛋白胨、酵母膏、尿素等,归纳总结（一）,课前自主学习检测（二）-无菌技术,1、获得纯净培养物的关键是_。 2、请你判断一下材料或用具是否需要消毒或灭菌。如果需要，请选择合适的方法。 接种环 实验操作者的双手 试管 量筒 玻璃棒 吸管 锥形瓶 培养基 培养皿,防止外来杂菌的入侵,灼烧灭菌,酒精消毒,干热灭菌,干热灭菌,干热灭菌,干热灭菌,干热灭菌,高压蒸汽灭菌,干热灭菌,归纳总结（二）,1、煮沸消毒法:100煮沸5-6min 2、巴氏

5、消毒法：70-75 下煮30min或 80 下煮15min 3、化学药剂消毒法:用75%酒精进行皮肤消毒;氯气消毒水源 4、紫外线30min消毒，照射前，可喷石炭酸或煤酚皂等消毒液加强消毒效果,常用的消毒方法,归纳总结（二）,常用的灭菌方法,1、灼烧灭菌： 接种环、接种针、试管口、瓶口 2、干热灭菌： 玻璃器皿和金属用具 3、高压蒸汽灭菌： 100kPa、121 下维持15-30min.,芽孢,有些细菌在一定的条件下，细胞里面形成一个椭圆形的休眠体，叫做芽孢。芽孢的壁很厚，对干旱、低温、高温等恶劣的环境有很强的抵抗力。例如，有的细菌的芽孢，煮沸3小时以后才死亡。芽孢又小又轻，可以随风飘散。当环

6、境适宜（如温度、水分适宜）的时候，芽孢又可以萌发，形成一个细菌.,实验操作,（一）制备牛肉膏蛋白胨固体培养基 （二）纯化大肠杆菌,课前自主学习检测（三）-制备牛肉膏蛋白胨固体培养基,1、制备牛肉膏蛋白胨固体培养基的步骤包括：_。 2、如果需要调节PH，应该在_之后，_之前。,计算、称量、溶化、灭菌、倒平板,溶化,灭菌,观看“倒平板” 观影后完成以下问题： Q1：视频中分别对哪些材料或用具使用了哪些消毒或灭菌的方法？ Q2：动动手：参考视频和教材P15的“倒平板”的方法，和小组的同学们一起动手倒平板。（倒平板时注意无菌技术的操作）,技能训练3,观看“倒平板” 观影后完成以下问题： Q1：视频中分

7、别对哪些材料或用具使用了哪些消毒或灭菌的方法？ Q2：动动手：参考视频和教材P15的“倒平板”的方法，和小组的同学们一起动手倒平板。,技能训练3,你对视频中倒平板过程还有哪些疑问吗？,学习总结反思,一、培养基 二、无菌技术 三、制备牛肉膏蛋白胨固体培养基,课堂小练习,（2018.卷二）在生产、生活和科研实践中，经常通过消毒和灭菌来避免杂菌的污染。回答下列问题： （1）在实验室中，玻璃和金属材质的实验器具_（填“可以”或“不可以”）放入干热灭菌箱中进行干热灭菌。 （2）牛奶的消毒常采用巴氏消毒法或高温瞬时消毒法，与煮沸消毒法相比，这两种方法的优点是_。 （3）密闭空间内的空气可采用紫外线照射消毒，其原因是紫外线能_。在照射前适量喷洒_，可强化消毒效果。 （4）水厂供应的自来水通常经过_（填“氯气”“乙