酸性蛋白酶和碱性蛋白酶的性质比较.ppt

1、酸性蛋白酶和碱性蛋白酶的来源和性质比较,目录,酸性蛋白酶的来源与性质,碱性蛋白酶的来源与性质,3,蛋白酶的定义、分类与来源,1,2,两类蛋白酶的性质比较,4,1 蛋白酶,（1）定义： 蛋白酶是水解蛋白质肽链的一类酶的总称。,（2）蛋白酶分类,按其水解多肽的方式分为：内肽酶和外肽酶 按其活性中心和最适pH值分为：丝氨酸蛋白酶、巯基蛋白酶、金属蛋白酶和天冬氨酸蛋白酶 按其反应的最适pH值分为：酸性蛋白酶、中性蛋白酶和碱性蛋白酶,（3）蛋白酶的来源,蛋白酶广泛存在于动物内脏、植物茎叶、果实和微生物中。 微生物蛋白酶，主要由霉菌、细菌，其次由酵母、放线菌生产。,2 酸性蛋白酶,（1）定义：是一类适合在

2、酸性条件(pH15)下水解蛋白质的酶类。 酸性蛋白酶是指蛋白酶具有较低的最适pH，而不是指酸性基团存在于酶的活性部位，酸性蛋白酶的最适PH从1到5。从酶的活力-PH曲线分析，在酶的活性部位中含有一个或更多的羧基。这一类蛋白酶中研究最彻底的是胃蛋白酶。,酸性蛋白酶来源,酸性蛋白酶主要来源于动物的脏器 ( 胃蛋白酶等) 和微生物分泌物。 产酸性蛋白酶的微生物菌种有很多，如米曲霉、 黑曲霉、 芽孢杆菌、根酶、青霉、微小毛霉等,酸性蛋白酶性质,酸性蛋白酶是一类具有复杂理化性质的化合物，不同微生物菌种分泌的酸性蛋白酶虽具有一些共同的性质，但在底物特异性、抑制剂、激活剂等方面均存在一定的差异，在最适pH、

3、最适温度、pH耐受性以及耐温上各不相同。不同金属离子及其浓度对酸性蛋白酶的影响也不同。,（1）酸性蛋白酶的pH适应性 酸性蛋白酶的最适 pH 为 2.5 5.0， 但不同微生物的酶稍有差异 （2）酸性蛋白酶的温度适应性 酸性蛋白酶的适宜温度 为 30 50 ， 最适作用温度为40 左右。 在温度较低时，酶活性随温度的上升而增大，在温度达到酶的最适温度后，酶活力随温度升高而急剧下降，失活很快。一般50 以下可保持稳定，但随产酶微生物菌种不同而有所差异。,酸性蛋白酶性质,酸性蛋白酶性质,（3）酸性蛋白酶的抑制剂 酸性蛋白酶活性中心含有2个天冬氨酸残基，因此大多数抑制剂可通过酯化作用而迅速使之钝化，

4、使酸性蛋白酶失活。 酸性蛋白酶一般对重氮化合物、十二烷基硫酸钠（SDS）以及1，2-环-3-对硝基苯氧基丙烷（EPNP）敏感，而对异丙氟磷酸（DFP）、对氯汞苯甲酸（CMB）及乙二胺四乙酸（EDTA）不敏感。 （4）金属离子对酸性蛋白酶的影响 Ag+对酸性蛋白酶有轻度抑制作用，而Cu2+、Mn2+对其有激活作用,3 碱性蛋白酶,（1）定义：是一类最适pH在9-11范围内的蛋白酶，因他们的活性中心大多含有丝氨酸，所以又称丝氨酸蛋白酶。 碱性蛋白酶广泛应用于洗涤剂、食品、医疗、酿造、丝绸、制革等行业。,（2）碱性蛋白酶的来源,碱性蛋白酶主要存在于细菌、放线菌和真菌中。 微生物（菌种） 地衣芽孢杆菌

5、、短小芽孢杆菌、嗜碱性芽孢杆菌、灰色链霉菌、费氏链霉菌等,碱性蛋白酶性质,大多数微生物碱性蛋白酶作用于肽链的中间，生成二个肽。除酶本身的氨基酸残基外，不具有特定的活性基团，酶发挥作用是不需要特定的激活剂，而需要金属离子激活，如除去金属离子就不能作用，必须的金属离子有Mn2+、Mg2+、Zn2+、Co2+、Fe2+等 。酶的活性中心有丝氨酸，故又称丝氨酸蛋白酶。因此，这类蛋白酶遇到作用于丝氨酸的试剂二异丙基氟磷酸（DFP）便失活，这是碱性蛋白酶的一个重要特征。但是碱性蛋白酶对金属螯合剂EDTA、重金属和巯基试剂却不敏感。钙离子对此酶有一定的稳定作用。碱性蛋白酶有较大的耐热性，55下放置30min能保留大部分活力。碱性蛋白酶作用位点要求在水解点羧基侧具有芳香族或疏水