课题2　土壤中分解尿素的细菌的分离与计数 (2).pptx

1、教材版本：人教版 选修一 专题二,课题： 土壤中分解尿素的细菌的分离与计数,单位：抚顺德才高级中学,主讲人：赵丹阳,课题,CO（NH2）2+H2OCO2+2NH3,脲酶,分离,计数,目的,背景,研究思路,筛选菌株,统计菌落数目,设置对照,？,？,？,KH2PO4 Na2HPO4 MgSO47H2O 牛肉膏 蛋白胨 琼脂 水,一、筛选菌株,KH2PO4、Na2HPO4、MgSO47H2O、尿素、水,KH2PO4、Na2HPO4、MgSO47H2O、尿素、琼脂、水,配方一,配方二,配方三,配方四,“选择培养基”,KH2PO4 Na2HPO4 MgSO47H2O 葡萄糖 琼脂 水,二、统计菌落数目,

2、1、稀释涂布平板,2、显微镜直接计数,利用血球计数板，在显微镜下计算一定容积里样品中微生物的数量。,在稀释度足够高时，微生物在固体培养基上所形成的一个菌落 是由一个单细胞繁殖而成的，即一个菌落代表原先的一个单细胞。,利用选择培养基进行尿素分解菌的分离过程中，从对应稀释倍数为106的 培养基中，A、B两同学分别得到以下两种统计结果。 1、A同学筛选出150个菌落。 2、B同学筛选出50个菌落。 B认为A的培养基被杂菌污染了，或培养基中混入了其他含氮物质，因而 导致不能分解尿素的细菌也能在该培养基中生长。A确认为自己的操作无误，但也拿不出能令人信服的证据。 请你帮助A同学改进实验，提供具有说明了的

3、证据。,设置对照同等条件下，培养空白培养基,?,解决问题,三、设置对照,将未接种的培养基放在相同且适宜的条件下进行培养。,将样液接种到牛肉膏蛋白胨培养基表面，放在相同且适宜的条件下进行培养,接种了样液的选择培养基,课题背景,一、小组人员：每四人为一组 二、讨论素材：教材P23-P24知识、学案的提示 三、讨论内容： 1、实验操作流程？（可画图） 2、各步骤操作目的？ 3、画出培养基设置的实验组和对照组图示。 四、讨论要求：以模块图或实物流程图方式表示 五、讨论时间：5分钟 六、小组汇报：随机抽取某组,实验设计,小组讨论,土壤取样,1,样品的稀释与涂布,2,微生物的培养与观察,3,实验 操作,细

4、菌的计数,4,小组汇报,Q1：取样条件？部位？,1、土壤取样,2、 样品的稀释与涂布,Q2：为什么样品需要稀释？不同微生物的稀释倍数一样吗？为什么？,Q3：需要配置几种培养基？每个稀释倍数下一般设置几组平板？为什么？,思考问题,土壤中各种微生物的数量是不同的。例如：在干旱的土壤中的上层样品中：好氧及兼性厌氧细菌数约为2185万，放线菌约为477万，霉菌数约为23.1万,104,105,106,实验组：接种,对照组：未接种,动手画一画,3、 微生物的培养与观察,Q4：菌落的特征都有哪些？,4. 细菌的计数,甲地取样，在稀释倍数为105的三个培养基中得平板上的菌落数分别为212、256、21，涂平

5、板用的稀释液的体积为0.1mL，则每毫升样品中的菌落数为个。,乙地取样，在稀释倍数为105的三个培养基中得平板上的菌落数分别为180、230、456，涂平板用的稀释液的体积为0.1mL，则每毫升样品中的菌落数为个。,农民应该选择在哪块地种植？,or,Q5：为了保证结果准确，一般选择菌落数在什么范围的平板上进行计数？ Q6：为什么统计的菌落数往往比活菌的实际数目低？ :,尿素分解菌的鉴定,课题延伸,CO（NH2）2+H2OCO2+2NH3,脲酶,培养基碱性变强,酚红,培养基变红,课题小结,课题小练,1下表为本课题使用的培养基，分析培养基配方，回答下面的问题。,(1)在该培养基的配方中，为微生物的

6、生长提供碳源和氮源的分别是_。 (2)按物理性质划分该培养基属于_培养基，理由是培养基中含有_；该类培养基常用于微生物的_等。 (3)由于_， 所以该培养基只能用于能够合成_的微生物的培养。用此培养基培养土壤浸出液能够从土壤中筛选出_的细菌。 (4)在微生物学中，将_ _的培养基，称作选择培养基。,课题小练,2用稀释涂布平板法测定同一土壤样品中的细菌数，在对应稀释倍数为106的培养基中，得到以下几种统计结果，正确的是() A涂布了1个平板，统计的菌落数是230 B涂布了2个平板，统计的菌落数是215和260，取平均值238 C涂布了3个平板，统计的菌落数分别是21、212和256，取平均值163 D涂布了3个平板，统计的菌落数分别是210、240和250，取平均值233,3在本实验操作中对使用的平板和试管要进行标记