医学微生物学课件：8-11 球菌

1、第八章 球 菌,球菌是细菌中的一大类。 对人类有致病性的病原性球菌主要引起化脓性炎症，又称为化脓性球菌； 其中革兰阳性菌主要包括葡萄球菌、链球菌；革兰阴性菌包括脑膜炎奈瑟菌、淋病奈瑟菌等。,化脓性球菌（Pyogenic coccus）是一类能够感染人体并引起化脓性炎症的细菌。常引起皮肤、皮下软组织、深部组织的化脓性感染乃至内脏器官的脓肿，并引起浓毒血症。,革兰氏阳性球菌,革兰氏阴性球菌,葡萄球菌属（Staphylococcus）是一群革兰阳性球菌，因常堆聚成葡萄串状，故名。 广泛分布于空气、土壤、人和动物的皮肤及与外界相通的腔道中；多数为非致病菌，少数可导致疾病。,一、葡萄球菌属,葡萄球菌,（

2、一）生物学性状 形态与染色 球形或稍呈椭圆形，葡萄串状排列。 无鞭毛，不能运动；无芽胞，除少数菌株外一般不形成荚膜。 革兰染色阳性；其衰老、死亡或被白细胞吞噬后，可被染成革兰阴性。,培养特性 兼性厌氧 营养要求不高，在普通培养基上生长良好。在肉汤培养基中呈均匀混浊生长；在琼脂平板上形成直径约2 mm、圆形凸起，边缘整齐，表面光滑，湿润，不透明的菌落。,不同种的菌株可产生不同的脂溶性色素，如金黄色、白色、柠檬色。 葡萄球菌在血琼脂平板上形成的菌落较大，有的菌株菌落周围形成明显的全透明溶血环（溶血）；凡溶血性菌株大多具有致病性。,金黄色葡萄球菌,表皮葡萄球菌,生化反应 多数葡萄球菌能分解葡萄糖、麦

3、芽糖和蔗糖，产酸不产气 触酶阳性 致病性菌株能分解甘露醇。,抗原构造 葡萄球菌A蛋白(SPA)：存在于细菌细胞壁的一种表面蛋白，位于菌体表面，具有抗吞噬的作用。 SPA可与人及多种哺乳动物血清中的lgG的Fc段非特异结合，因而可用含SPA的葡萄球菌作为载体，结合特异性抗体后作为诊断试剂，进行协同凝集试验。,荚膜：几乎所有金黄色葡萄球菌菌株的表面有荚膜多糖抗原的存在，有利于细菌的黏附，与细菌的侵袭力有关。 多糖抗原：存在于细胞壁，可作为细菌分型的依据。,分 类,金黄色葡萄球菌（S. aureus）；表皮葡萄球菌；腐生葡萄球菌； 根据能否产生凝固酶（coagulase）可分为凝固酶阳性和凝固酶阴性

4、葡萄球菌 根据噬菌体分型：分为4个噬菌体群和23个噬菌体型。,抵抗力,葡萄球菌耐干燥，耐高盐，对外界因素的抵抗力强于其他无芽胞细菌。 对青霉素、庆大霉素敏感，不过由于抗生素的选择作用，导致耐药菌株逐年增多，对青霉素G的耐药菌株已达90%以上，尤其是耐甲氧西林的金黄色葡萄球菌（MRSA）已成为医院内感染常见的致病菌。,（二）致病性与免疫性,1、致病因子： （1）酶 凝固酶：两种（结合、游离）；促使血浆凝固，保护病原菌；常作为鉴别葡萄球菌有无致病性的重要标志。 耐热核酸酶：100 , 15 min不被破坏；水解核酸 透明质酸酶、磷脂酶等,血浆凝固酶（Coagulase）,血浆凝固酶是能使含有枸椽酸

5、钠或肝素抗凝剂的人或兔血浆发生凝固的酶类物质，致病菌株多能产生，常作为鉴别葡萄球菌有无致病性的重要标志。,凝固酶和葡萄球菌的毒力关系密切。 凝固酶阳性菌株进入机体后，使血液或血浆中的纤维蛋白沉积于菌体表面，阻碍体内吞噬细胞的吞噬，即使被吞噬后，也不易被杀死。 同时，凝固酶集聚在菌体四周，亦能保护病菌不受血清中杀菌物质的作用。葡萄球菌引起的感染易于局限化和形成血栓，与凝固酶的生成有关。 凝固酶具有免疫原性，刺激机体产生的抗体对凝固酶阳性的细菌感染有一定的保护作用。慢性感染患者血清可有凝固酶抗体的存在。,凝固酶有两种： 游离凝固酶：为分泌至菌体外的蛋白质。作用类似凝血酶原物质，可被人或兔血浆中的协

6、同因子激活变成凝血酶样物质后，使液态的纤维蛋白原变成固态的纤维蛋白，从而使血浆凝固。 结合凝固酶：结合于菌体表面并不释放，又称为凝聚因子，在该菌株的表面起纤维蛋白原的特异受体作用，细菌混悬于人或兔血浆中时，纤维蛋白原与菌体受体交联而使细菌凝聚。 凝固酶耐热，粗制品10030分钟或高压灭菌后仍保持部分活性，但易被蛋白分解酶破坏。,（2）毒素 葡萄球菌溶素：破坏多种细胞；对人类致病的主要是溶素，经甲醛处理可制成类毒素。 肠毒素：引起食物中毒 杀白细胞素 毒性休克综合征毒素-1：噬菌体群金葡产生；超抗原家族；引起机体多个器官系统的功能紊乱 表皮剥脱毒素：噬菌体群金葡产生； 破坏皮肤细胞间的连接，引起

7、烫伤样皮肤综合征。,2、致病类型： （1）化脓性感染 皮肤：疥、痈、毛囊炎、伤口化脓等 器官：中耳炎、骨髓炎、肺炎等 全身：败血症、脓毒血症,（2） 毒素性疾病 急性胃肠炎 毒素休克综合征 烫伤样皮肤综合征：多见于新生儿、幼儿或免疫力低下的成人,（3）医院感染 凝固酶阴性葡萄球菌，条件致病菌 表皮葡萄球菌引起的人工瓣膜性心内膜炎、静脉导管感染、腹膜透析性腹膜炎、血管移植物感染、人工关节感染等 腐生葡萄球菌引起的女性尿路感染,免疫性 人类对致病性葡萄球菌具有一定的天然免疫力。只有当皮肤粘膜受创伤后，或机体免疫力降低时，才易引起感染。 患病后所获免疫力不强，难以防止再次感染。,（三）微生物学检查,

8、根据不同病症采取不同标本； 涂片镜检发现革兰阳性球菌，可向临床发初步报告“查见类似葡萄球菌属革兰阳性球菌”；并进一步用培养法和合适的鉴定技术予以证实。 对于凝固酶阳性的致病性葡萄球菌大多为金黄色葡萄球菌，应及时快速鉴定并进行药敏实验，尽快报告临床。,致病性葡萄球菌的主要鉴定依据,金黄色色素 -溶血（完全溶血） 凝固酶、耐热核酸酶阳性 发酵甘露醇,注意个人卫生、消毒隔离和防止医源性感染； 治疗应根据药敏试验结果，防止耐药性菌株扩散。,（四）防治原则,凝固酶阴性葡萄球菌（CNS）,葡萄球菌是临床较常见的感染菌，随着大量头孢菌素尤其是第三代头孢菌素等高效广谱抗菌药物的广泛使用，耐甲氧西林葡萄球菌（M

9、RSA）在全球范围内不断增加，耐甲氧西林凝固酶阴性葡萄球菌（MRCNS）作为MRS和凝固酶阴性葡萄球菌（CNS）家族中的一员，其检出率和多重耐药性呈逐年增高趋势，已成为医院感染的主要病原菌之一。,链球菌属(Streptococcus)是化脓性球菌中另一类常见的细菌，广泛存在于自然界和人及动物胃肠道和鼻咽部，大多数为正常菌群。 链球菌属中对人类致病的主要是A群链球菌和肺炎链球菌。,二、链球菌属,链球菌,根据对红细胞的溶血能力分类：,甲型溶血性链球菌：菌落周围有12 mm宽的草绿溶血环，称甲型溶血或溶血。这类链球菌亦称草绿色链球菌。此类链球菌为条件致病菌。 乙型溶血性链球菌：菌落周围形成一个24

10、mm宽，界限分明、完全透明的溶血环，完全溶血，称乙型溶血或溶血。这类细菌又称溶血性链球菌，致病力强，引起多种疾病。 丙型链球菌：不产生溶血素，菌落周围无溶血环，故又称不溶血性链球菌，一般不致病。,按C抗原不同可分成A、B、C、D、E、F、G、H、K、L、M、N、O、P、Q、R、S、T等20个群（族）。 对人致病的大多属于A群。A群又称为化脓性链球菌（Pyogenic streptococcus）。,根据抗原结构的分类：,分为需氧、兼性厌氧和厌氧等三大类链球菌。,根据对氧的需求分类：,形态与染色： 球形或卵圆形，呈链状排列，短者48个细菌组成，长者有2030个细菌组成。幼令培养物大多可见到透明质

11、酸形成的荚膜，随着培养时间延长，因菌自身产生透明质酸酶而使荚膜消失。无芽胞，无鞭毛。革兰染色阳性。,（一）生物学性状,链球菌,培养特性 兼性厌氧。对营养要求较高，普通培养基中需加有血液、血清等才能生长。血琼脂平板上形成灰白、光滑、圆形突起小菌落，不同菌株有不同溶血现象。,-溶血（乙型溶血）,-溶血（甲型溶血）,抗原构造 蛋白质抗原：又称表面抗原，具有型特异性，如M蛋白； 多糖抗原：位于细胞壁，具有群特异性 核蛋白抗原：无特异性,生化反应 发酵葡萄糖和多种糖，不产气； 触酶阴性,抵抗力 抵抗力弱，大多数菌种对干燥和消毒剂敏感；除肺炎链球菌，本菌属较少引起耐药性，对青霉素、红霉素、氯霉素、四环素等

12、均敏感。,种类多，分类复杂，根据其在血平板上的溶血现象以及Lancefield抗原血清分型大致分成 1）溶血性链球菌（A、C、G群） 2）B群溶血性链球菌 3）溶血性链球菌 4）不溶血D群链球菌,（二） 致病性与免疫性,A群链球菌：化脓性链球菌/溶血性链球菌，致病力最强，引起的疾病约占人类链球菌感染的90% B群链球菌：无乳链球菌，是呼吸道和女性泌尿生殖道的正常菌群；本菌是引起牛乳腺炎的病原菌；现发现该菌还能引起新生儿败血症和脑膜炎，且死亡率极高。,溶血性链球菌包括肺炎链球菌和草绿色链球菌群，多为条件致病菌。 不溶血D群链球菌通常不致病，正常寄居在皮肤、呼吸道、消化道和泌尿生殖道。,致病因素

13、1 菌体细胞壁成分 M蛋白：是A群链球菌的主要致病因子，具有抗吞噬和抵抗细胞内杀菌作用；与心肌、肾小球基底膜有共同抗原成分，刺激机体产生特异性抗体，与自身免疫性疾病有关 荚膜：具有抗吞噬作用，是肺炎链球菌的主要毒力因子；当有荚膜的光滑型（S）细菌失去荚膜成为粗糙型（R）时，其毒力降低或消失 脂磷壁酸：与细菌粘附有关,2 侵袭性酶 链道酶（SD）：DNA酶，使脓汁稀薄易于扩散 链激酶（SK）：激活溶纤维蛋白酶，使之溶解血块或阻止血浆凝固；重组SK可用于治疗血栓性疾病 透明质酸酶、胶原酶、神经氨酸酶,3 外毒素 链球菌溶素：1）SLO：对白细胞、血小板、心肌细胞、神经细胞等有毒性，刺激机体产生抗S

14、LO抗体，可作为新近链球菌感染或风湿活动的辅助诊断； 2）SLS：无抗原性，破坏白细胞和血小板，与血平板上菌落周围的溶血环形成有关； 致热外毒素：SPE，曾称猩红热毒素、红疹毒素；蛋白质，对热稳定；超抗原，刺激诱发炎症反应，导致发热、休克及组织损伤。,致病类型 1 侵袭性疾病 A群链球菌可引起皮肤和皮下组织急性化脓性炎症、扁桃体炎、咽炎、乳突炎、肾盂肾炎、产褥热等 无乳链球菌可引起新生儿菌血症和脑膜炎 肺炎链球菌可引起大叶性肺炎、支气管炎、中耳炎、鼻窦炎、脑膜炎等 草绿色链球菌可引起亚急性细菌性心内膜炎、泌尿道感染等,2 毒素性疾病 猩红热：由产SPE的A群链球菌引起的全身中毒性疾病 3 变态

15、反应性疾病 风湿热：常继发于A群链球菌感染的咽炎，10岁以下儿童易感，临床表现以风湿性关节炎、风湿性心脏病为主 急性肾小球肾炎：多见于儿童和少年，临床表现为蛋白尿、浮肿和高血压,免疫性,A群链球菌感染后，可产生特异性免疫。由于链球菌型别多，各型之间无交叉免疫力，故常可反复感染。 猩红热病后可产生对同型的致热外毒素抗体，能建立稳固的同型抗毒素免疫。,（三）微生物学检查,标本直接镜检 分离培养 生化鉴定 血清学试验 抗链球菌溶素O试验,（四）防治原则,链球菌主要通过飞沫传染，应对病人和带菌者及时治疗，以减少传染源。 对急性咽峡炎和扁桃体炎患者，尤其是儿童，须治疗彻底，防止变态反应疾病的发生。 A群

16、溶血性链球菌对青霉素敏感。其它群链球菌对抗菌药物敏感性不同，临床治疗时最好先作药物敏感试验。,三、肺炎链球菌,肺炎链球菌，俗称肺炎球菌，常寄居于正常人的鼻咽部。仅少数菌株有致病力，是细菌性肺炎的主要病原菌。,革兰阳性球菌 菌体呈矛头状，多成双排列，又名肺炎双球菌；在咳痰或脓液中，有单个存在，成双或短链状排列，在液体培养基中常呈短链排列 菌体周围可形成肥厚的荚膜,（一）生物学性状,肺炎链球菌（革兰染色）,培养特性 兼性厌氧 营养要求高，在含有血液或血清的培养基中才能生长。初次培养需要一定浓度的CO2箱刺激生长。 在血液琼脂平板上可形成细小、灰色、有光泽的扁平菌落，菌落周围有草绿色溶血环。肺炎球菌

17、因荚膜多糖使菌落呈黏液状；因产生自溶酶，平板上培养48h后出现中心凹陷的“脐窝状”菌落。,肺炎链球菌“脐窝状”菌落,抗原结构与分型 1、荚膜多糖抗原：肺炎链球菌分型的依据 2、菌体抗原：C多糖、M蛋白,抵抗力 抵抗力较弱，对一般消毒剂敏感。 荚膜菌株抗干燥能力较强。 易出现耐药性变异。,致病物质,荚膜：荚膜的抗吞噬作用是肺炎球菌主要的致病作用：有荚膜的光滑（S）型菌有毒力，失去荚膜的粗糙（R）型毒力减低或消失。 肺炎链球菌溶素O 脂磷壁酸 神经氨酸酶,（二）致病性与免疫性,所致疾病,肺炎球菌主要引起人类大叶性肺炎、支气管炎，也可引起中耳炎、脑膜炎等。本菌从上呼吸道侵入，经支气管到达肺组织。少数

18、病例中，先入血流，引起菌血症而后入肺部。 正常人群一般不致病，只能形成带菌状态，当机体免疫功能降低才能引起疾病。病人突然发病，恶寒、发热、咳嗽、胸痛、咳痰为铁锈色。,免疫性,肺炎球菌感染后，可立建立较牢固的型特异性免疫，同型病菌二次感染少见。 正常机体对肺炎球菌感染的抵抗力较高，即在未经治疗的病例中也有70%可自愈。自然康复取决于机体产生荚膜多糖型特异性抗体，病后56天就可形成。,（三）微生物学检查,肺炎链球菌的鉴定 革兰染色阳性矛头状成对排列；有荚膜； 在血琼脂平板上形成光滑湿润小菌落，溶血，培养稍久后菌落凹陷呈脐窝状； 胆汁溶菌试验阳性；菊糖发酵试验阳性（与草绿色链球菌相区别） 动物毒力试

19、验,（四）防治原则,防止呼吸道传染 对于抵抗力低下人群可使用荚膜多糖疫苗接种，预防肺炎链球菌性肺炎等，效果良好。 根据药敏试验，选用敏感的抗菌药物进行治疗。,四、肠球菌属,肠球菌属是人类和动物肠道正常菌群的一部分。 对人致病的主要有粪肠球菌和屎肠球菌。,五、奈瑟菌属,奈瑟菌属是一群革兰阴性球菌，常成双排列。 对人致病的只有脑膜炎奈瑟菌和淋病奈瑟菌。,淋病奈瑟菌,脑膜炎奈瑟菌,（一）生物学性状,革兰阴性双球菌；无鞭毛，无芽胞，某些菌种可形成荚膜； 专性需氧，但初次培养时，需要510% CO2刺激生长；最适生长温度3537 ，低于30不生长； 对培养条件要求较高，普通培养基上不生长，在含有血清或血

20、液的培养基上方能生长； 培养2472小时后,在血琼脂平板或巧克力琼脂平板上，形成圆形、光滑、湿润、透明，似露滴状的小菌落。,脑膜炎奈瑟菌,淋病奈瑟菌,生化反应 氧化酶阳性 触酶阳性 氧化分解葡萄糖 对糖的分解能力、硝酸盐还原能力等不同，常作为菌种间的鉴别依据,抵抗力 对寒冷、干燥和热的抵抗力弱，因此在微生物学检查中应注意标本的保温保湿，最好床边接种。 对化学消毒剂敏感。,脑膜炎奈瑟菌,脑膜炎奈瑟氏球菌俗称脑膜炎球菌，为流行性脑脊髓膜炎（流脑）的病原菌。好发于学龄儿童、青少年，发病高峰为冬末春初。 主要致病物质为荚膜、菌毛、内毒素。 可寄居于正常人鼻咽腔，多引起隐性感染，或表现为上呼吸道症状，少

21、数发展为菌血症或败血症，累及脑、脊髓膜，出现发热、头痛、脑膜刺激征阳性、甚至休克等。,（二）致病性与免疫性,成人对脑膜炎球菌有较强免疫力，感染后仅12%的表现脑膜炎。儿童免疫力较弱，感染后发病率较高。母体内抗体可通过胎盘传给胎儿，故6个月以内婴儿患流脑很少。 感染后机体产生的抗荚膜多糖抗体、抗外膜蛋白抗体，有特异杀伤脑膜炎球菌的作用。,防治原则,关键是要尽快消除传染源、切断传播途径和提高人群免疫力。 对易感儿童注射纯化流脑荚膜多糖疫苗，进行特异性预防。,淋病奈瑟菌,淋病奈瑟菌俗称淋病双球菌或淋球菌，是人类淋病的病原体。 淋病是常见的性传播疾病，淋病奈瑟菌主要通过性接触直接感染泌尿生殖道、口咽和

22、肛门直肠黏膜，或在分娩时经产道感染新生儿。 临床表现包括单纯性淋病、盆腔炎、口咽部和肛门直肠淋病、淋菌性结膜炎、播散性淋病。,致病因素 菌毛 IgA1蛋白酶：灭活黏膜表面存在的特异性IgA1抗体，促进细菌的粘附 外膜蛋白P：与吸附易感细胞有关，是细菌分型的基础 脂多糖：其分子结构与人类细胞表面糖鞘脂分子结构相似，使淋病奈瑟菌逃避机体免疫系统的识别,人类对淋病奈瑟菌的感染无天然抵抗力，感染后多数患者可自愈，并出现特异性抗体，但免疫力不持久；再感染和慢性感染患者较普遍存在。 微生物学检查主要是采取尿道脓性分泌物涂片，革兰氏染色镜检，如在中性粒细胞中发现革兰氏阴性双球菌时，就有诊断价值，必要时进行分

23、离培养。 对患者应早期用药，彻底治疗。 新生儿出生时可用1%硝酸银溶液滴眼，预防新生儿淋菌性结膜炎。,第九章 肠杆菌科,肠杆菌科（Enterobactericaeae）,是栖居在人和动物的肠道内的一大群形态、生物学性状相似的革兰阴性杆菌。 广泛分布在自然界中，包括植物、土壤、水以及人和动物的肠道中，多数是正常人肠道菌群的重要成员，在机体的其他部位相对较少。,肠杆菌科细菌大多数是肠道正常菌群或条件致病菌；少数为病原菌（伤寒沙门菌、志贺菌、致病性大肠埃希菌）。内毒素是肠道杆菌的主要致病物质，部分肠杆菌还可产生外毒素致病。 肠道感染：各种急慢性肠道感染、食物中毒、旅行者腹泻等。 肠道外感染：除志贺菌

24、外，肠杆菌科细菌还可引起泌尿道、呼吸道、伤口和中枢神经系统的感染，且多为医院感染。,肠杆菌科细菌共同的生物学性状,革兰阴性，杆状或球杆状；无芽胞，多数有鞭毛，致病性菌株多数有菌毛。 兼性厌氧；营养要求不高，在普通培养基上生长良好，为中等大小的光滑型菌落。 生化反应活泼，发酵葡萄糖；触酶阳性；氧化酶阴性；还原硝酸盐（乳糖发酵是区别致病菌和条件致病菌的重要标志）,菌体（O）抗原、鞭毛（H）抗原和表面抗原 易出现变异菌株，如耐药性转移等 抵抗力不强：对热、干燥、一般化学消毒剂均敏感 耐胆盐；对染料有一定抵抗力（肠道选择培养基）,大肠埃希菌，即大肠杆菌（E.coli），为埃希菌属代表菌种。 一般多不致

25、病，为人和动物肠道中的常居菌，在一定条件下可引起肠道外感染。 某些血清型菌株的致病性强，引起腹泻，统称致病性大肠杆菌。 常作为水源、物品、食品等污染的指标。,一、大肠埃希菌,（一）生物学性状,形态与染色 革兰阴性杆菌，中等大小。大多数菌株有周鞭毛，菌毛包括普通菌毛与性菌毛，有些菌株有荚膜。 培养特性 在血琼脂平板上，有些菌株产生型溶血。在肠道选择鉴别培养基上因发酵乳糖形成有颜色、直径23mm的光滑型菌落。,大肠杆菌（E. coli）,大肠埃希菌菌落特征（BAP）,大肠埃希菌菌落特征（MAC）,生化反应 能发酵多种糖类，产酸产气； 大部分菌株发酵乳糖； 动力阳性 IMViC试验结果为“ ”,抗原

26、构造 较复杂，有O、K、H抗原。O抗原为是细菌分群的主要基础。K抗原为荚脂多糖抗原，从病人新分离的致病性大肠杆菌多有K抗原，有抗吞噬和补体杀菌作用。H抗原为鞭毛抗原。大肠埃希菌的血清型别按OKH的顺序，以数字表示。,（二）致病性,定植因子（colonization factor , CF）：也称粘附素，即大肠杆菌的菌毛，具有较强的免疫原性。 肠毒素：是肠产毒型大肠杆菌在生长繁殖过程中释放的外毒素，分为耐热（ST）和不耐热（LT）两种。,致病物质,（1）不耐热肠毒素：对热不稳定，65经30分钟即失活。由A、B两个亚单位组成，其中A亚单位是毒素的活性部分，B亚单位与小肠粘膜上皮细胞膜表面的GM1神

27、经节苷脂受体结合后，A亚单位穿过细胞膜与腺苷酸环化酶作用，使胞内ATP转化cAMP。当cAMP增加后，导致小肠液体过度分泌，超过肠道的吸收能力而出现腹泻。LT的致病与霍乱弧菌肠毒素相似。 （2）耐热肠毒素：对热稳定，100经20分钟仍不被破坏。ST可激活小肠上皮细胞的鸟苷酸环化酶，使胞内cGMP增加，在空肠部分改变液体的运转，使肠腔积液而引起腹泻。,所致疾病,1肠道外感染： 多为内源性感染，以泌尿系感染为主，如尿道炎、膀胱炎、肾盂肾炎、上行性尿道感染多见于已婚妇女。也可引起腹膜炎、胆囊炎、阑尾炎等。 婴儿、年老体弱、慢性消耗性疾病、大面积烧伤患者，大肠杆菌可侵入血流，引起败血症。 早产儿，尤其

28、是生后30天内的新生儿，易患大肠杆菌性脑膜炎。,2肠道感染：某些血清型大肠杆菌能引起人类腹泻。根据其致病机理不同，分为四种类型。 肠产毒型大肠杆菌（ETEC）：引起婴幼儿和旅游者腹泻。 肠侵袭型大肠杆菌（EIEC）：致病机制与志贺菌所致痢疾类似，引起脓血便。 肠致病型大肠杆菌（EPEC）：是婴幼儿腹泻的主要病原菌。 肠出血型大肠杆菌（EHEC）：引起散发性或暴发性出血性结肠炎和溶血性尿毒综合征。,引起肠道感染的大肠埃希菌的主要致病特征,（三）微生物学检查,大肠埃希菌肠道外感染的鉴别 肠道选择鉴别培养基上菌落特征 生化反应 大肠埃希菌肠道感染的鉴别 证实为大肠埃希菌 血清学分型 肠毒素或者毒力因

29、子的检测,（四）防治原则,改善卫生环境，加强饮食卫生的检查与监测。 菌毛疫苗、肠毒素疫苗接种预防。 抗生素治疗应在药敏试验的指导下进行，减少耐药性变异的发生。,二、 志贺菌属,志贺菌属是引起人类细菌性痢疾的主要病原菌，俗称痢疾杆菌，灵长类动物是其天然宿主。,（一）生物学性状,形态与染色 革兰阴性短小杆菌，无芽胞，无荚膜，无鞭毛，多数有菌毛。 培养特性 兼性厌氧菌，能在普通培养基上生长，形成中等大小，半透明的光滑型菌落。在肠道杆菌选择性培养基上因不发酵乳糖形成无色菌落。,志贺菌菌落特征(MAC),生化反应 分解葡萄糖，产酸不产气； 除个别菌株外，均不发酵乳糖； 动力阴性,抗原构造与分类 有K、O

30、抗原而无H抗原。K抗原是自患者新分离的某些菌株的菌体表面抗原，不耐热，加热1001小时被破坏。K抗原在血清学分型上无意义，但可阻止O抗原与相应抗血清的凝集反应。O抗原包括群特异性抗原和型特异性抗原，前者常在几种近似的菌种间出现；型特异性抗原的特异性高，用以区别菌型。根据志贺氏菌抗原构造的不同，可分为四个群和数十个血清型。,(1）A群:又称痢疾志贺菌, 不发酵甘露醇。有12个血清型，其中8型又分为三个亚型。 （2）B群：又称福氏志贺菌，发酵甘露醇。有15个血清型（含亚型及变种）。 （3）C群：又称鲍氏志贺菌，发酵甘露醇，有18个血清型，各型间无交叉反应。 （4）D群：又称宋内志贺菌，发酵甘露醇，

31、并迟缓发酵乳糖，一般需要34天。只有一个血清型。,抵抗力 本属细菌对理化因素的抵抗力较其他肠杆菌科细菌为低，在运送时须使用含有缓冲剂的培养基。,（二）致病性,1侵袭力：志贺菌的菌毛能粘附于回肠末端和结肠粘膜的上皮细菌表面，继而在侵袭蛋白作用下穿入上皮细胞内，一般在粘膜固有层繁殖形成感染灶。此外，凡具有K抗原的痢疾杆菌，一般致病力较强。,致病物质,2内毒素：各型痢疾杆菌都具有强烈的内毒素。内毒素作用于肠壁，使其通透性增高，促进内毒素吸收，引起发热，神志障碍，甚至中毒性休克等。内毒素能破坏粘膜，形成炎症、溃疡，出现典型的脓血粘液便。内毒素还作用于肠壁植物神经系统，使肠功能紊乱、肠蠕动失调和痉挛，尤

32、其直肠括约肌痉挛最为明显，出现腹痛、里急后重（频繁便意）等症状。,3外毒素：A群志贺菌还可产生外毒素，称为志贺毒素。为蛋白质，不耐热，75801小时被破坏。该毒素至少具有三种生物活性：神经毒性，将毒素注射家兔或小鼠，作用于中枢神经系统，引起四肢麻痹、死亡；细胞毒性，对人肝细胞、猴肾细胞和HeLa细胞均有毒性；肠毒性，具有类似大肠杆菌、霍乱弧菌肠毒素的活性，可以解释疾病早期出现的水样腹泻。,所致疾病,志贺菌几乎只引起肠道感染，很少侵入血流。 细菌性痢疾是最常见的肠道传染病，夏秋两季患者最多。传染源主要为病人和带菌者，通过污染了痢疾杆菌的食物、饮水等经口感染。人类对志贺菌易感，10200个细菌可使

33、1050%志愿者致病。一般说来，痢疾志贺菌所致菌痢的病情较重；宋内志贺菌引起的症状较轻；福氏志贺菌介于二者之间，但排菌时间长，易转为慢性。我国常见的流行菌株为福氏志贺菌和宋内志贺菌。,1急性细菌性痢疾：分为典型菌痢、非典型菌痢和中毒性菌痢三型。中毒性菌痢多见于小儿，发病急，常无明显的消化道症状而呈现严重的全身中毒症状，临床表现为高热、休克等，病死率高。 2慢性细菌性痢疾：急性菌痢治疗不彻底，或机体抵抗力低、营养不良或伴有其他慢性病时，易转为慢性。病程多在二个月以上，迁延不愈或反复发作。 3. 携带者：健康带菌、恢复期带菌、慢性带菌,免疫性,病后免疫力不牢固，不能防止再感染。但同一流行期中再感染

34、者较少，即具有型特异性免疫。 痢疾杆菌菌型多，各型间无交叉免疫。 机体对菌痢的免疫主要依靠肠道的局部免疫，即肠道粘膜细胞吞噬能力的增强和sIgA的作用。sIgA可阻止痢疾杆菌粘附到肠粘膜上皮细胞表面，病后三天左右即出现，但维持时间短，由于痢疾杆菌不侵入血液，故血清型抗体（IgM、IgG）不能发挥作用。,（三）微生物学检查,标本的快速检测 抗原检测：乳胶凝集试验、免疫荧光技术 核酸检测：针对编码侵袭因子的区段 血清学鉴定 凡是生化反应符合志贺菌属者需作血清学鉴定 毒力试验 豚鼠眼结膜试验 PCR方法,（四）防治原则,加强卫生学监测 隔离病人和消毒排泄物 检测带菌者，特别是从事餐饮业人员 抗生素治

35、疗感染个体，但该菌很容易出现多重耐药,三、沙门菌属,沙门菌属（Salmonella）是一大群寄生于人类和动物肠道内生化反应和抗原构造相似的革兰氏阴性杆菌。 分类复杂，有多种血清型。与人类关系密切的沙门菌有：伤寒沙门菌，甲、乙、丙型副伤寒沙门菌，鼠伤寒沙门菌，猪霍乱沙门菌，肠炎沙门菌等十余种。,（一）生物学性状,形态与染色 革兰阴性直杆菌，较细长；有菌毛，多数具有周鞭毛，能运动，一般无芽胞，无荚膜。 培养特性 兼性厌氧菌，对营养要求不高，在普通琼脂平板上形成中等大小、半透明的光滑型菌落。在肠道杆菌选择性培养基上因不发酵乳糖形成无色菌落。,生化反应 不发酵乳糖 发酵葡萄糖，伤寒沙门菌产酸不产气，大

36、多产生硫化氢,抗原构造：主要有3种抗原成分，即菌体（O）抗原、鞭毛（H）抗原及表面抗原（Vi抗原等）。 O抗原：为多糖类脂蛋白质复合物，具耐热性。O抗原共有58种，以阿拉伯数字顺序排列，现已排至第67，但其中有9种被删除，故数字是不连续的。每个沙门菌的血清型可含一种或数种O抗原。O抗原是分群的依据；凡含共同抗原成分的血清型归为一个群。其刺激机体产生的抗体以IgM为主，与相应的抗血清反应时呈颗粒状凝集。,H抗原：不稳定的蛋白质抗原；沙门菌H抗原有两个相（双相菌），第一相称特异相，第二相为沙门菌所共有，称非特异相；H抗原是沙门菌定型的依据，刺激机体产生的抗体以IgG为主，与相应的抗血清呈絮状反应。

37、,表面抗原：包括Vi抗原、M抗原。Vi抗原是不耐热的酸性多糖聚合物，经人工培养基传代后也易丧失；位于菌体最表层，有抗吞噬及保护细菌免受相应抗体和补体的溶菌作用。Vi抗原存在时可阻止O抗原与相应抗体凝集；可用Vi噬菌体对带这一类抗原的沙门菌进行分型。,抵抗力 对理化因素的抵抗力不强，但对某些化学物质如胆盐、煌绿等耐受性要比其它肠杆科细菌强，故可用中等强度的肠杆菌选择性培养基SS琼脂对粪便标本中的沙门菌进行分离培养。,（二）致病性与免疫性,1、致病因素 侵袭力：沙门杆菌侵入小肠粘膜上皮细胞，穿过上皮细胞层到达上皮下组织。细菌虽被细胞吞噬，但不被杀灭，并在其中继续生长繁殖，这可能与Vi抗原和O抗原的

38、保护作用有关。菌毛的粘附作用也是细菌侵袭力的一个因素。 内毒素：引起发热、白细胞减少。大剂量时可发生中毒性休克。内毒素可激活补体系统释放趋化因子，吸引粒细胞，导致肠道局部炎症反应。 肠毒素,2、致病类型,（1）肠热症：是伤寒病和副伤寒病的总称，主要由伤寒杆菌和甲、乙、丙型副伤寒杆菌引起。伤寒的典型症状包括发热、头痛、腹泻、腹痛并可引起呼吸系统、肝、脾和（或）神经系统的致命损伤，病程约34周。病愈后部分患者可自粪便或尿液继续排菌3周至3个月，称恢复期带菌者。约有3%的伤寒患者成为慢性带菌者。副伤寒病与伤寒病症状相似，但一般较轻，病程较短，约13周即愈。,伤寒沙门菌到达小肠后，穿过肠粘膜上皮细胞侵

39、入肠壁淋巴组织，经淋巴管至肠系膜淋巴结及其他淋巴组织并在其中繁殖，经胸导管进入血流，引起第一次菌血症。此时相当病程的第1周，称前驱期。病人有发热、全身不适、乏力等。细菌随血流至骨髓、肝、脾、肾、胆囊、皮肤等并在其中繁殖，被脏器中吞噬细胞吞噬的细菌再次进入血流，引起第二次菌血症。,此期症状明显，相当于病程的第23周，病人持续高热，相对缓脉，肝脾肿大及全身中毒症状，部分病例皮肤出现玫瑰疹。肾脏中的细菌可随尿排出；存于胆囊中的细菌随胆汁排至肠道，一部分随粪便排出体外。部分细菌可再次侵入肠壁淋巴组织，出现超敏反应，引起局部坏死和溃疡，严重者发生肠出血和肠穿孔。第4周进入恢复期，患者逐渐康复。,（ 2）

40、急性胃肠炎(食物中毒)：是最常见的沙门菌感染，多由鼠伤寒杆菌、猪霍乱沙门菌、肠炎沙门菌等引起。系因食入未煮熟的病畜病禽的肉类、蛋类而发病。潜伏期短，一般424小时，主要症状为发热、恶心、呕吐、腹痛、腹泻。细菌通常不侵入血流，病程较短，一般24天内可完全恢复。,（3）败血症：病菌进入肠道后，迅速侵入血流，导致组织器官感染，如脑膜炎、骨髓炎、胆囊炎、肾盂肾炎、心内膜炎等。出现高热、寒战、厌食、贫血等。在发热期，血培养阳性率高。 （4）无症状带菌者：-的患者症状消失后年仍可在粪便中检出沙门菌。,3、免疫性,伤寒或副伤寒病后有牢固的免疫性，很少再感染。主要依靠细胞免疫，表现为单核巨噬细胞系统在淋巴因子

41、的作用下，胞内酶数量增多，活性增强，从而杀死寄生在细胞内的细菌。 体液免疫方面，局部抗体较重要，尤其是slgA具有特异性防止伤寒杆菌粘附于肠粘膜表面的能力。抗O和抗Vi抗体能抵抗病原菌的感染。至于血循环中IgM、IgG抗体对胞内寄生菌无免疫作用。,（三）微生物学检查,标本采集：根据疾病类型、病情和病程的不同分别采集不同标本；伤寒病于发病第一周取血，第2、3周取粪便作培养，全病程可作骨髓培养 标本直接检查：镜检；抗原检测（商品化乳胶凝集试剂，快速检测） 分离培养与鉴定：MAC、SS等选择鉴别培养基 血清学分型：先用多价O抗血清进行分群，再用单价因子血清检查，综合O、H、Vi因子血清的检查结果判断

42、沙门菌的血清型,抗体检测：应在病程的早期及中后期分别采集两次血清，进行肥达反应 肥达反应（Widal test）：用已知伤寒、副伤寒沙门菌的O、H抗原，检测受检血清中有无相应的抗体的半定量凝集试验。 与细菌分离培养同时进行或在前者失败的情况下，能辅助诊断伤寒、副伤寒A、B和C引起的肠热症。,本试验在肠热症患者第一周末时，即可出现阳性结果，判定结果时必须考虑下述情况。 1正常抗体水平：正常人因隐性感染或预防接种，血清中可含有一定量抗体，其效价随各地区情况而不同。一般说来，伤寒O凝集价1：80、H凝集价1：160时才有诊断价值。 2动态观察：判断肥达反应结果须结合临床症状、病期等。单次凝集效价增高

43、，有时不能定论。如间隔数天重复采血，若效价随病程延长而逐渐上升4倍以上，有诊断意义。,（四）防治原则,做好水源和食品的卫生管理，切断传播途径； 发现、确诊和治疗带菌者，带菌期间不能从事饮食行业的工作； 伤寒Vi荚膜多糖疫苗进行免疫预防； 目前治疗肠热症使用的有效药物主要是环丙沙星。,第十章 弧菌属,弧菌属（Vibrio）细菌是一群菌体短小，弯曲成弧形、运动活泼的革兰阴性菌。 广泛分布在自然界，尤其是水中。 大多数为非致病菌，与人类感染密切相关的有霍乱弧菌、副溶血性弧菌。,霍乱弧菌（V. cholerae）是引起烈性传染病霍乱的病原体，曾在世界上引起多次大流行，主要表现为剧烈的呕吐、腹泻、失水，

44、死亡率甚高。属于国际检疫传染病。 霍乱弧菌包括两个生物型：古典生物型和埃尔托（El Tor）生物型。这两种型别除个别生物学性状稍有不同外，形态和免疫学性基本相同，在临床病理及流行病学特征上没有本质的差别。自1817年以来，全球共发生了七次世界性霍乱大流行，前六次均由古典型引起，第七次是埃尔托型所致。,霍乱弧菌,1992年在印度东南部又发现了一个引起霍乱流行的新血清型菌株O139（Bengal），它引起的霍乱在临床表现及传播方式上与古典型霍乱完全相同，但不能被O1群霍乱弧菌诊断血清所凝集，抗O1群的抗血清对O139菌株无保护性免疫。在水中的存活时间较O1群霍乱弧菌长，因而有可能成为引起世界性霍乱

45、流行的新菌株。,（一）生物学性状,形态与染色 从病人体内新分离出的细菌形态比较典型，菌体弯曲呈弧状或逗点状，革兰染色阴性。经人工培养后，易失去弧形而呈杆状。 有菌毛，无芽胞，有些菌株有荚膜。菌体一端有单根鞭毛，运动活泼。,鱼群样排列,菌体一端有单根鞭毛，运动活泼,取霍乱病人米泔水样粪便作悬滴观察，可见细菌运动极为活泼，呈穿梭样或流星样运动。,霍乱弧菌的运动模式图,培养特性 兼性厌氧 营养要求不高，在pH8.89.0的碱性蛋白胨水或碱性琼脂平板中生长良好。 因其他细菌在这一pH不易生长，故碱性蛋白胨水可作为选择性增殖霍乱弧菌的培养基。,生化反应 氧化酶阳性 触酶阳性 能发酵多种糖类 还原硝酸盐

46、吲哚试验阳性,抗原性,有耐热O抗原和不耐热H抗原 根据O抗原不同，可分成多个血清群，其中O1和O139群引起霍乱，其余血清群可引起胃肠炎。 O1群根据生物学特性又可分为2个生物型：古典生物型和El Tor生物型。,抵抗力,霍乱弧菌古典生物型对外环境抵抗力较弱，El-Tor生物型抵抗力较强，在河水、井水、海水中可存活13周，在鲜鱼、贝壳类食物上存活12周。耐低温，耐碱。 霍乱弧菌对热、干燥、日光、化学消毒剂和酸均很敏感，在正常胃酸中仅生存4分钟。湿热55，15分钟或100，12分钟即死亡。水中加0.5ppm氯15分钟可被杀死。以1：4比例加漂白粉处理病人排泄物或呕吐物1小时可达到消毒目的。,（二

47、）致病性,人类在自然情况下是霍乱弧菌的唯一易感者，主要通过污染的水源或食物经口传染。 致病物质：霍乱肠毒素；鞭毛、菌毛 所致疾病：可从无症状或轻型腹泻到严重的致死性腹泻，引起我国的甲类法定传染病霍乱。 临床表现：呕吐、腹泻、脱水、代谢性酸中毒、低碱血症和低容量性休克、心律不齐和肾衰竭等。 O139群感染比O1群严重，半数患者出现痉挛，细菌可进入外周血引起发热、菌血症、败血症。,在一定条件下，霍乱弧菌进入小肠后，依靠鞭毛的运动，穿过粘膜表面的粘液层，可能藉菌毛作用粘附于肠壁上皮细胞上，在肠粘膜表面迅速繁殖，经过短暂的潜伏期后便急骤发病。该菌不侵入肠上皮细胞和肠腺，也不侵入血流，仅在局部繁殖和产生霍乱肠毒素，此毒素作用于粘膜上皮细胞与肠腺，使肠液过度分泌，从而患者出现上吐下泻，泻出物呈“米泔水样”并含大量弧菌，此为本病典型的特征。,霍乱肠毒素是蛋白质，不耐热，56经30分钟，即可破坏其活性。该毒素属外毒素，具有很强的抗原性。现已能将该毒素高度精制成晶状，仍保持极强的生物学活性。 霍乱肠毒素由A和B两个亚单位组成，A亚单位又分为A1和A2两个肽链，两者依靠二硫链连接。A亚单位为毒性单位，其中A1肽链具有酶活性，A2肽链与B亚单位结合参与受体介导的内吞作用中的转位作用。B亚单位为结合单位，能特异地识别肠上皮细胞上的受体。,霍乱肠毒素的B亚单位与小肠粘膜上皮细胞表面的G