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文档简介

补体依赖的细胞毒实验,Complement-dependent cytotoxicity,LOGO,实验目的,LOGO,实验原理,LOGO,实验主要材料,LOGO,操作步骤,一、小鼠胸腺细胞悬液的制备 46周龄小鼠断颈处死，取出胸腺放至含有3 mL RPMI 1640培养液的平皿中，以剪刀和镊子将组织处理成单细胞悬液，利用移液器取出后放入试管内备用。,胸腺,注意事项： 小鼠断颈要迅速、彻底，以防小鼠挣扎过程中出血过多，也可事先摘眼球放血。,LOGO,操作步骤, 振荡混匀，置37C水浴箱，10min , 振荡混匀，置37C水浴箱，20min , 振荡混匀，滴片加盖玻片，镜检,Ag+Ab,+ complement,二、细胞毒实验： 按下表加样,PBS,LOGO,结果观察,台盼蓝染色：如果细胞膜不完整、破裂，台盼蓝染料进入细胞，细胞变蓝。 如果细胞膜完整，细胞不为台盼蓝染色，则为正常细胞或凋亡细胞。此方法对反映细胞膜的完整性，区别坏死细胞有意义。,A,B,A. 对照组 B. 实验组,注意事项： 台盼蓝染色后放置时间不能太长，否则出现假阳性。,

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