除菌过滤验证PPT演示幻灯片

1、1,除菌过滤验证颇尔生命科学中国技术研究中心,2,除菌过滤及验证发展简史,1983 ASTM issues（美国标准检测方法组织）发布微生物挑战标准实验方法 1987 FDA发行无菌工艺指南，提出除菌过滤 1994 FDA 发行指南文件 3 “凡过滤工艺，包括预过滤器、除菌过滤器等，需进行描述。” “必须提交验证报告，包含过滤器细菌挑战数据、化学兼容性数据” “产品过滤分装点的过滤器对产品的影响，需进行描述 (例如, 吸附活性组分、释放溶出物等).”,1. ASTM, “Standard Test Method for Determining Bacterial Retention of Me

2、mbrane Filters Utilized for Liquid Filtration” Standard No. F838-83 (1983, No. F838-05, rev. 2005) 2. FDA Guideline on Sterile Drug Products Produced by Aseptic Processing, 1987 3. FDA Guidance for Industry for the Submission Documentation for Sterilization Process Validation in Applications for Hum

3、an and Veterinary Drug Products, 1994,3,除菌过滤及验证发展简史,1995 FDA 人用药物 CGMP 通告 4 “除菌过滤工艺需要特别严格的验证。” “确保在最恶劣状态下，工艺参数得到充分研究、评估、记录。” “在药物开发阶段到上市药物的生产阶段，除菌过滤工艺的这些相关数据都必须提供。”,4、FDA Human Drug CGMP Notes, Dec. 1995,4,除菌过滤及验证发展简史,1998 PDA 发行除菌过滤验证技术报告（ Technical Report No. 26） 5 1998-2003 FDA 内部稿, 2002 议案, 2003

4、 指南草稿 2004 FDA 发行无菌工艺指南修正版6,5、PDA Technical Report No. 26, “Sterilizing Filtration of Liquids,” PDA Journal of Pharmaceutical Science and Technology, v.52, no. S1 (supplement), March, 1998 6、FDA Guidance for Industry - Sterile Drug Products Produced by Aseptic Processing Current Good Manufacturing P

5、ractice (Section IX. Validation of Aseptic Processing and Sterilization), 2004,5,除菌级过滤器定义,1987 无菌工艺指南7 “通过107/cm2 缺陷假单胞菌（ P. diminuta ）挑战的过滤器 ” 2004 无菌工艺指南8 “适当验证的过滤器，能从流体中滤除全部微生物”,7、FDA Guideline on Sterile Drug Products Produced by Aseptic Processing, 1987 8、FDA Guidance for Industry - Sterile Dru

6、g Products Produced by Aseptic Processing Current Good Manufacturing Practice, 2004,6,附录1 无菌药品 第六十二条 可采用湿热、干热、离子辐射、环氧乙烷或过滤除菌的方式进行灭菌。每一种灭菌方式都有其特定的适用范围，灭菌工艺必须与注册批准的要求相一致，且应当经过验证。 第六十三条 任何灭菌工艺在投入使用前，必须采用物理检测手段和生物指示剂，验证其对产品或物品的适用性及所有部位达到了灭菌效果。,新版GMP,7,附录1 无菌药品 第四十一条 过滤器应当尽可能不脱落纤维。严禁使用含石棉的过滤器。过滤器不得因与产品发生

7、反应、释放物质或吸附作用而对产品质量造成不利影响。 第七十五条 非最终灭菌产品的过滤除菌应当符合以下要求： （四）过滤除菌工艺应当经过验证，验证中应当确定过滤一定量药液所需时间及过滤器二侧的压力。任何明显偏离正常时间或压力的情况应当有记录并进行调查，调查结果应当归入批记录。 （五）同一规格和型号的除菌过滤器使用时限应当经过验证，一般不得超过一个工作日。,新版GMP,8,过程验证的基本原则指南, 1987,“验证: 建立有文件支持的证据，能高度确保某个特定的过程将持续地生产出符合预先确定的规格和质量要求的产品。”,9,过滤器验证三阶段,核心验证 持续验证 工艺特定验证,10,核心验证：PALL过

8、滤器验证指南,由PALL公司进行验证并提供数据 标准条件(ASTM F838-05)下细菌挑战数据 符合1987年FDA 无菌工艺指南“除菌级”定义 参考润湿流体（水或醇）前进流完整性数据和细菌挑战结果关联 标准溶媒（常为水或醇）中滤芯溶出物数据 生物安全性数据（美国药典）,11,完整性 (100%) 100前进流检测 与相应的细菌截留数据相关联 细菌挑战试验 (批次抽样) 蒸气高压灭菌 (批次抽样),持续验证：除菌级过滤器上市标准,12,流出物冲洗 (抽样) 内毒素(热原), 清洁度, pH, TOC, 电导率 依据USP标准 材料验证 生物安全 依据USP Biol. Toxicity,

9、in vivo,(体内的生物毒性 ）Class VI（第六级）-121C 可控的、清洁的装配环境 高压纯水冲洗,持续验证：除菌级过滤器上市标准,13,P级证书,14,条件通常与核心验证时不同,流体差异 工艺差异,工艺特定验证,现正被法规监管所强调,15,除菌过滤器的验证,Drug/Biologics Master File (DMF/BMF) at FDA,生物相容性 USP 生物反应性,生物安全性基础研究,16,有效性验证方案设计,“无需在实际生产区域进行过滤器有效性验证试验（包括微生物挑战性试验）。 然而，实验室试验必须模拟实际的生产条件。 过滤器有效性验证试验较为复杂，过滤器用户无力承担

10、时，常常由外部实验室或过滤器制造商进行试验。 “然而, 对于有效性验证数据（关于过滤器生成无菌滤出物的功效）的复核，过滤器用户负有责任。,17,参数验证目标,检测流体对过滤器、 B. diminuta 假单胞菌以及对微生物特性潜在的影响 细菌存活性和截留性检测 化学兼容性检测 检测过滤器对产品组分的影响 溶出物析出物检测 组分吸附检测 产品润湿完整性检测数据,18,考虑的关键因素:,pH 表面张力 粘度 等渗溶摩 离子强度,产品,温度 压力 时间 滤出体积 流速,工艺,在产品料液中的存活性,细菌,验证实验：细菌存活性与细菌挑战,19,细菌挑战实验,料液类型,料液中接种细菌挑战,料液循环过滤工艺

11、时间 清洗过滤器 用接种细菌的替代溶液挑战,料液循环过滤工艺时间 清洗过滤器 用接种细菌的料液挑战,非杀菌,中度杀菌,杀菌,20,细菌挑战试验典型实验装置,21,除菌级过滤器细菌拦截实验的标准,Brevundimonas diminuta (ATCC 19146)缺陷假单胞菌，或其它代表“最恶劣”状况的微生物种群 严格控制的培养条件 (美国实验材料协会ASTM F838-05规范) 合适微生物尺寸 (B. diminuta 0.3 x 0.8 m) 微生物个体独立分散 证明可穿透0.45 m 对照过滤器 模拟“最恶劣”工艺条件 挑战量 1 x 107 cfu/cm2 对滤液进行全流体无菌检测,

12、22,“当考虑化学兼容性时，重要的是应包含过滤器的全部组成.” “完整性检测是和细菌挑战试验关联的物理测试方法，是一种兼容性测试的方法”,验证实验：化学兼容性,PDA TR26 Sterilizing Filtration of Liquids, 2008,23,化学兼容性检测,确认过滤器与客户工艺流体化学兼容性 过滤器与工艺流体在设定条件下接触特定时间 通过接触前、后过滤器完整性检测结果判断 外观检查 全滤芯挑战，仅用膜片测试是不够的 水流量、称重等方法不适合，因其制定接受标准困难 同材质和结构的滤芯可以不考虑面积大小,24,“他们 （制药商）必须有数据显示溶出物的种类、数量和毒性”,验证实

13、验：溶出物检测,Motisse (FDA) Human Drug CGMP Notes, 1994,25,溶出物的来源: 硬件、支撑层、滤膜、润湿剂、添加剂等。 对过滤器溶出物进行定量、定性分析 不挥发物残留 (NVR)定量检测 紫外可见光谱UV-Vis 、红外光谱FTIR 、气质联用GC/MS等方法定性检测 依据工艺流体特性选择模型溶剂* 检测条件反映工艺温度和时间,* Weitzmann, C., “ The use of model solvents for evaluating extractables from filters used to process pharmaceutic

14、al products,” Pharmaceutical Technology, 21 (#4), 72-99 (1997),溶出物检测,26,吸附作用评估,PDA TR26 Sterilizing Filtration of Liquids, 2008,EU guidelines to GMP Annex 1,27,吸附作用评估,100%,滤出体积,浓度,28,验证实验：产品润湿完整性检测数据生成,水润湿实验的缺点 使用前的试验稀释产品 使用前-试验后水的去除验证 使用后-试验时产品的去除验证 时间,29,确定用客户产品润湿过滤器时恰当的完整性参数 完整性检测方法包括： 前进流、泡点、压力衰

15、减 产品润湿完整性数据与标准流体润湿完整性数据进行关联 标准流体润湿的完整性数据与细菌挑战数据关联（参见验证指南 ） 产品润湿完整性数据源自实验检测值，不是理论计算值,产品润湿完整性检测数据,30,产品润湿完整性检测数据生成,对大多数用户产品可行 使用产品润湿的数据可使生产简单 法规对使用参数的评价要求 法规要求灭菌后使用前的试验 文件和测试要求已经变得更加复杂,31,过滤器验证要求小结,实验 0.2m 0.2m 气体 化学兼容性 Yes Yes Yes 吸附 可能 可能 No 细菌挑战 Yes No 可能 产品润湿IT值 可提供 No No 溶出物 Yes Yes No 常规 IT Yes

16、No Yes,32,选择最恶劣条件产品分类,参考“1987 Aseptic Processing Guideline”（无菌工艺指南）对产品进行分类 “最恶劣条件” 的调整必须科学地进行 “是指这样一组条件，其中包括了极端的环境、工艺极限的上限与下限 （标准操作程序之内的相应指标亦涵括在内）；在最恶劣条件下, 产品事故或工艺失效的发生概率升至最高 (对比理想条件)，但未必一定导致产品事故或工艺失效。” 通常，最高组分含量和最极端操作条件（最大流速、最大压差、极端温度等）是“最恶劣条件”的典型代表,33,最恶劣条件的选择,34,过滤器验证报告内容,细菌存活性 确定物料杀菌特性，合理的清洗方案 细

17、菌截留性 确认最恶劣工艺条件下滤膜除菌能力 化学兼容性 确认最恶劣工艺条件下过滤器与物料接触后的完整性 溶出物 对过滤器在模型溶媒中溶出物进行定性、定量测定 吸附效应 特定产品的滤出液中产品定性、定量测定 产品润湿完整性数据 建立产品润湿的完整性检测参数,35,Pall公司的验证服务流程,签订合作协议,客户填写PPQ表格,Pall为客户编写验证方案,双方完善验证方案,客户向Pall送达： 1。签署/批准的验证方案 2。产品样品/MSDS表,Pall完成验证实验,Pall完成验证报告,客户审查接收验证报告,1填表格,2送物料,3收报告,36,颇尔生命科学中国技术中心,资质 ISO9001:2000 ISO 14001: 2004 OSHAS 18001: 1999 （2008年2月， Lloyds Register Qualit