第22章感染性疾病与感染免疫检测

1、第二十二章感染性疾病与感染免疫检测第一节细菌感染的免疫检测一、链球菌感染二、伤寒沙门菌感染 三、结核分枝杆菌感染第二节 真菌感染性疾病的免疫检测一、深部真菌感染二、类真菌感染第三节病毒感染性疾病的免疫检测一、流感病毒感染二、轮状病毒感染三、肝炎病毒感染四、冠状病毒感染思考题小结第四节先天染的免疫检测一、弓形虫感染二、风疹病毒感染 三、巨细胞病毒感染四、单纯疱疹病毒感染第五节 寄生虫感染的免疫检测一、疟原虫感染二、血吸虫感染三、 丝虫感染四、华支睾吸虫感染五、猪囊尾蚴感染感染性疾病的概念 感染（infection）是病原体以某种传播形式从传染源传播到易感者，并在宿主体内生长繁殖，释放毒素或导致机

2、体内微生态平衡失调的病理生理过程。 大多数病原体是由外界侵入的，受病原体侵袭力、致病力及宿主免疫状态等多种因素的影响，其破体内的微生态平衡后产生各种不同的感染谱，出现感染性疾病（infection diseases）。第一节 细菌感染的免疫检测抗细菌特异性免疫应答B细胞和抗体介导的体液免疫应答T细胞介导的细胞免疫应答一、链球菌感染 （一）化脓性链球菌免疫学检查生物学性状 抗链球菌溶血素“O”抗链激酶试验抗透明质酸酶（ADH） 抗DNA酶B（DNA-B）抗链球菌多糖体（ASP）X 是引起化脓性疾病的常见细菌X A群链球菌有较强的侵袭力X 可产生多种酶和外毒素 ASO的临床检测胶乳凝集试验免疫散射

3、比浊法 ASO检测的临床意义ASO增高常见于： 急性咽炎等上呼吸道感染 风湿性心肌炎 心包炎 风湿性关节炎 急性肾小球肾炎等 免疫功能不全ASO可不增高 （二）猪链球菌生物学性状X 由多种链球菌感染引起猪多种临床症状的传染病X 猪链球菌病病血清型众多、抗原结构复杂X 目前该病分布范围极广 猪链球菌的免疫学诊断ELISA免疫荧光技术SPA协同凝集试验乳胶凝集试验二、伤寒沙门氏菌感染 免疫学检测方法肥达氏凝集试验凝集时抗体效价1:80为阳性酶联免疫吸附试验 (ELISA）检测伤寒杆菌的抗原和抗体三、结核分枝杆菌感染生物学性状X分枝杆菌科分枝杆菌属X 人型和牛型是人类的主要致病菌X 可诱导抗感染细胞

4、免疫和体液免疫反应痰涂片结核杆菌抗酸染色 结核菌素试验 分枝杆菌抗体检测 核杆菌抗原检测 结核特异性IgG的检测免疫学检测方法第二节 真菌感染性疾病的免疫检测真菌（fungus）的种类繁多，但能引起人类疾病的真菌仅有100多种。真菌感染除可引起表面感染外，部分真菌可以导致人类深部组织感染，甚至全身感染， 严重者可致死亡。一、深部真菌感染深部真菌是指表皮以外组织器官即皮肤深层和内脏如肺、脑、消化道等的病源真菌和条件治病真菌。最常用的免疫学检测 循环抗原检测胶乳凝集试验ELISA 循环抗体检测X最常见和主要的深部真菌X近年在菌血症中的比例明显升高（一）念珠菌感染X主要的致病菌为新型隐球菌X新型隐球

5、菌的感染虽为全身性，但主要累及中枢神经系统和肺部。常用的免疫学检测 循环抗原检测胶乳凝集试验ELISA循环抗体检测（二）隐球菌感染 （三）曲霉菌感染X可在身体许多部位引起病变，以肺部病变最为常见X主要包括过敏性肺曲霉菌、侵袭性肺曲霉菌常用的免疫学检测 循环抗原检测胶乳凝集试验ELISA RIA 循环抗体检测二、类真菌感染常用的免疫学检测： ELISA 胶乳微粒凝集试验卡氏肺孢子虫（pneumocystis carinii），又称卡氏肺囊虫。曾被归类于原虫，但对其超微结构和核糖体RNA种系发育的研究提示其归类应倾向于真菌，有学者提出将其单列为类真菌。第三节 病毒感染性疾病的免疫检测病毒入侵后能引

6、起全身感染，抗病毒的防御机制和抗 细菌机制相似，但巨噬细胞、NK细胞、干扰素和补体等所发挥的作用更为明显。病毒具有较强的免疫原性， 能诱导机体产生免疫应答，有助于病毒的清除并预防 再次感染。一、流感病毒感染 （一）流感病毒生物学性状T 流感病毒可分为甲、乙、丙三型T 甲型和乙型流感病毒经常发生变异T 易造成暴发和新的流行流感病毒电镜照片病毒抗体的检测 血凝抑制试验 补体结合试验 时间分辨免疫荧光技术病毒抗原的检测 常采用免疫荧光或酶标记技术 快速、灵敏度高 有助早期诊断免疫学诊断v 禽流行冒（AI）简称v 是一种从呼吸系统到严重的全身性败血症等多种症状的综合病征v 高致病性亚型多为H5或H7血

7、清型v 抗原检测 血凝抑制试验 神经氨酸抑制试验 琼脂免疫扩散试验 ELISA法 抗体斑点-ELISA（Dot-ELISA）免疫学诊断v 抗体检测 特异性IgM 特异性IgG（二）病毒二、轮状病毒感染轮状病毒（rotavirus）是婴幼儿胃肠炎和腹泻的重要病原体轮状病毒感染的实验室检查T 电镜检查病毒颗粒T 免疫学检测TRT-PCR状病毒电镜照片抗原检测T ELISAT 免疫酶斑点试验抗体检测：T 可采用ELISA法T 检测血清中特异性IgM、IgG抗体，T 通常感染5天后可测出IgM水平升高免疫学诊断三、肝炎病毒感染 （一）甲型肝炎病毒 免疫学检测生物学性状X属小RNA病毒科X仅有1个血清型

8、特异性抗体检测 ELISA 化学发光法） 乙型肝炎表面抗原（HBsAg乙肝核心抗体-IgM 乙肝病毒前S1抗原乙肝核心抗体-IgG 抗乙肝病毒前S1抗体乙型肝炎表面抗体（抗-HBs） 乙肝病毒前S2抗原乙型肝炎e抗原（HBeAg） 抗乙肝病毒前S2抗体乙型肝炎e抗体（抗-HBe ） 乙型肝炎核心抗原（HBcAg乙型肝炎的诊断标志物（二）乙型肝炎病毒 乙型肝炎表面抗原(HBsAg)生物学性状vvvvvv存在于Dane颗粒的表面位于病毒表面是一种糖蛋白4种亚型(adr,adw,ayr,ayw)判断HBV感染的指标之一刺激机体产生保护性抗体即抗-HBsE 可对血清中的HBsAg进行定量检测， 对肝炎

9、病人动态疗效观察很有价值检测方法：T SPRIA（固相放射免疫法）T ELISA（酶联免疫吸附试验）T RPHA（反向间接血凝试验）T 化学发光法（4）如果仅表现为HBsAg阳性者，传染性较弱。临床意义（1） 乙肝的筛选和普查。（2） HBsAg不能完全排除乙型肝炎。（3） 同时出现HBsAg和抗-HBs，可能是不同亚型重复感染。 乙型肝炎表面抗体(HBsAb)生物学性状v 是一种保护性抗于病毒表面v 是机体感染或接种乙肝疫苗的标志v 如一过性HBsAg阳性，则抗-HBs可以为临床意义（1）抗-HBs阳性提示急染后的康复。（2） 在接受抗-HBs阳性血液的受血者中，可出现短暂性的抗-HBs 阳

10、性。（3） HBV疫苗接种后，可出现抗-HBs阳性。（4） 抗-HBs与HBsAg同时阳性可见于暴发性肝炎或慢性活动性肝炎患者。（5）HBsAg含量消失同时伴抗-HBs的出现，是目前临型肝炎治疗的最终目标。慢性乙 乙型肝炎e抗原(HBeAg)生物学性状v 是乙肝传染性的标志v HBeAg阳性可能性越大v HBsAg效价越高检出率就越高v HBeAg阳性标志着较强的感染和传染性 乙型肝炎e抗体(HBeAb)生物学性状v 多出现于急性肝炎恢复期的病人中v 比抗-HBs转阳要早v 常在HBsAg即将消失或已经消失时检出v 存在于乙肝恢复期及痊愈的病人血清中v 也可出现于慢性肝炎v 肝硬化或无症状的H

11、BsAg携带者可长期存在 乙型肝炎核心抗原(HBcAg)生物学性状v 是乙肝病毒存在的直接标志v HBcAg与HBV复制呈正相关v 可反映HBV的活动性及复制程度v 有助于乙肝疗效和预后的判断临床意义（1） 急性乙肝的诊断（2） 预后判断（3） 区分慢性活动性或非活动性肝炎（4） 暴发型乙型肝炎诊断 乙型肝炎核心抗体(HBcAb-IgM)生物学性状v 早期HBV感染的特异性血清学标志v 效价降低常提示预后较好v 有助于区分慢性活动性或非活动性肝炎v 暴发型乙型肝炎诊断 乙型肝炎核心抗体(HBcAb-IgG)生物学性状v 出现较早v 不是保护性抗体v 有流行病学调查意义 不同血清标志物组合模式的

12、临床意义HBV血清学标物临床意义血液传染性HBsA g抗HBs抗HBcHBeA g抗HBe+-+-潜伏期或者急性乙肝早期高+-+-急性或者慢染，以抗HBV-IgM鉴别（“大三阳”）高+-+-+乙肝后期或者慢性携带者（“小三阳”）低-+-+痊愈或者恢复期，有免疫力无-+-痊愈，有免疫力无-+-过去感染，但无法检出抗HBs；低水平慢染未知-+-疫苗接种或者很早以前曾感染过无 乙肝病毒前S1蛋白(pre-S1)生物学性状v 仅在HBV-DNA阳性血清中检出v 传播病毒的危险性明显高 乙肝病毒前S2蛋白(pre-S2)生物学性状v 有一个高免疫性的抗原决定蔟v 具有多聚蛋白受体v HBV的感染和复制有

13、密切的关系v 作为HBV复制标志之一v 与HBV-DNA活动呈正相关 两对半和三对的检测方法检测方法两对半三对双抗夹心法前S1双抗夹心法表面抗原HBsAg双抗夹心法表面抗体HBsAb双抗夹心法e抗原HBeAg竟争法e抗体HBeAb竟争法核心抗体HBcAb （三）丙型肝炎病毒感染生物学性状v 丙肝病毒（heptatitis C Virus，HCV）是导致丙型肝炎的重要病原体v 抗HCV不是中和抗体，无保护性v 抗HCV是HCV感染的标志性物质 免疫学检测 HCV-IgM阳性可作为HCV活动性复制的血清学标志。 HCV-IgM与慢性丙肝患者的急性发作有关。 （四）丁型肝炎病毒感染生物学性状 HDV

14、是一种缺陷病毒 丁肝的临床表现一定程度上取决于同时伴随的HBV感染状态 HDV是一种单股负链RNA病毒 免疫学检测主要针对HDV Ag 、抗HDV总抗体、HDV IgG、HDV IgM （五）戊型肝炎病毒感染戊型肝炎病毒是一单股正链无包膜的RNA病毒 实验室检查 病毒分离 免疫学检查 分子生物学检测v 抗体检测： HEVIgM出现和消失均较早 HEVIgM持续时间短 是HEV急染的诊断指标免疫学诊断v 抗原检测： 可用免疫荧光法、免疫电镜直接检测组织内的HEVAg。 用ELISA法检测分泌物如粪便或胆汁中的HEVAg。四、SARS生物学性状v 是一种新型的冠状病毒v 病毒是单链RNA病毒v 是

15、一种人畜共患病原体v 目前已发现SARS病毒有6个变种实验室检测 免疫学检测 分子生物学技术 免疫学诊断 v 免疫荧光技术 v ELISA技术 感染早期 抗体可无法检出，急性期到恢复期的阳转或者是抗体效价的4倍增长，提示有近期感染。第四节 先天染的免疫检测流产、死胎、胎儿畸形等 ！先天染指的是胎儿在母体内所受到的感染。包括：弓形体、巨细胞病毒、风疹病毒单纯疱疹病毒等。一、弓形虫感染生物学特性v 弓形虫（toxoplasma ，TOX）寄生于各种有核细胞内，引起弓形虫病。v 组织检查或动物接种如获得阳性可确诊v 目前多使用免疫学的方法进行v 特异性抗体的检测 以全虫抗原检测 用虫体裂解后的提取物

16、质为抗原 以滋养体为抗原v 循环抗原（CAg）的检测（双抗体夹心ELISA）免疫学诊断二、风疹病毒感染生物学特性v 是由风疹病毒（rubella virus，RUV）引起的出疹性呼吸道感染病。v 病后可获得终身免疫力v 孕早期感染可导致胎儿畸形v 属RNA病毒v 仅有一个血清型 免疫学诊断总抗体效价vIgG检测v v IgM检测免疫学诊断 免疫学诊断常采用血凝抑制试验、中和试验或补体结合法来测定总效价BACK 免疫学诊断v 常采用血凝抑制试验、中和试验或补体结合法来测定总效价v IgG的测定尚可帮助了解人群风疹隐染水平及观察疫苗接种的效果BACKv 常采用血凝抑制试验、中和试验或补体结合法来测

17、定总效价v IgG的测定尚可帮助了解人群风疹隐接种的效果。染水平及观察疫苗v 婴儿出生时如有特异高效价IgM抗体，可确诊为先天性风疹BACK免疫学诊断三、巨细胞病毒感染生物学性状v 由人巨细胞病毒(HCMV)引起的一种全身v 又称为巨细胞包涵体病v 属疱疹病毒科v 是人类疱疹病毒组中最大的一种v 核心为双股线形DNA染综合征v HCMV抗原检测 免疫荧光检查（DEAFF） HCMV抗原血症诊断v HCMV抗体检测 特异性IgG和IgM抗体免疫学诊断巨细胞病毒感染产后婴儿四、单纯疱疹病毒生物学性状v 单纯疱疹病毒（HSV）是一种DNA病毒v HSV可分为HSV-1和HSV-2两个亚型。v HSV

18、-1型主要引起v 感染-2型主要引起以外的部位部位皮肤粘膜的感染。v HSV抗原检测 免疫荧光法 ELISA法v HSV抗体检测 间接免疫荧光法 ELISA法免疫学诊断第五节 寄生虫感染的免疫学检测寄生虫寄生的部位对其致病性有着重大影响。控制感染同时不造成严重组织损坏需要抗寄生虫免疫应答的诱导和维持与对此应答的调节间的精细平衡。一、疟原虫感染疟原虫寄生于人体红细胞和肝细胞中，可引起疟疾(malaria)。v 抗体的检测 间接荧光抗体试验。 间接红细胞凝集试验 ELISA 斑点免疫结合试验免疫学诊断v 抗原的检测 放射免疫试验 固相放射免疫抑制试验二、血吸虫感染v 血吸虫病是指血吸虫寄生在静脉系

19、统引起的疾病v 血吸虫病是一种免疫性疾病v 宿主感染血吸虫后一般发生两类免疫反应 一是对沉着于组织中的虫卵的反应 另一是对幼虫或成虫诱导的感染具有保护性的抵抗反应v 环卵沉淀反应（COPT）v 间接红细胞凝集试验（IHA）v ELISAv 乳胶凝集试验（LA）v 酶联免疫印迹技术免疫学诊断血吸虫血吸虫病（大肚子病）三、猪囊尾蚴病（囊虫病）生物学性状v 猪囊尾蚴病，俗称“囊虫病”，v 猪带绦虫的幼虫寄生人体各组织所致的疾病。v 猪囊尾蚴病的实验室诊断主要为免疫学技术，包括对其抗原及抗体的检测。v 抗体检测 IgE 抗体 IgG 抗体v 循环抗原检测免疫学诊断舌肌内的囊尾蚴皮下的囊尾蚴猪囊虫病思考题1. 感染性疾病的免疫应答与机体哪一类免疫反应有关？2. 细菌感染与病毒感