药分自考辅导.ppt

1、药物分析（自考辅导）第6版,主编 刘文英 主讲 杜 斌,人民卫生出版社,学习方法,以结构性质鉴别检查含量测定为主线，掌握我国药典中常用药物的分析原理，找出有关内容的联系，融汇贯通 。,绪 论,一、药典正确书写： 中华人民共和国药典（2010年版）或 中国药典（2010年版） Chinese Pharmacopoeia（缩写Ch.P.） 9版药典：53、63、77、85、90、95、2000、 2005、2010。,二、常用国外药典,美国药典（The United States Pharmacopoeia) 美国国家处方集(The National Formulary) USP（34）-NF（2

2、9）,2010,5,1正式施行 英国药典（British Pharmacopoeia）BP（2010） 日本药局方JP（15）,三、药品质量管理规范,我国对药品质量控制的全过程起指导作用的法令文件有: GLP Good laboratory Practice （药品非临床研究质量管理规定） GMP Good Manufacture Practice （药品生产质量管理规范） GSP Good Supply Practice （药品经营质量管理规范） GCP Good Clinical Practice （药品临床试验质量管理规范）,第 一 章药 典 概 况,中国药典,生物制品（三部）,一、中国

3、药典Ch.P.(2010),药典内容,凡 例,正 文,索 引,附 录,药典正文中所收载药品或制剂的质量标准的内容：,性状、鉴别、检查、含量测定、类别、贮藏、制剂。,标准品、对照品,称取“0.1g”,系指称取重量可为0.06-0.14g 称取“2g”,系指称取重量可为1.5-2.5g 称取“2.0g”,系指称取重量可为1.95-2.05g 称取“2.00g”,指称取重量可为1.995-2.005g,精密度规定：,空白试验定义,指在不加供试品或以等量溶剂代替供试液，按同法测得的结果。,规定“精密称定”时，系指称取重量应准确 至所取重量的千分之一。 规定“称定”时，系指称取重量应准确至所 取重量的百

4、分之一。,规定“量取”时，系指可用量筒或按照量取 体积的有效数位选用量具。 取用量为“约”若干时，系指取用量不得超 过规定量的10。,中国药品生物制品检定所,药品检验工作的法定机构,省、自治区食品药品检验所,市食品药品检验所,药品检验工作的基本程序：,取样、鉴别、检查、含量测定、写出报告。,第二章药物的鉴别试验,鉴别：判断已知药物及其制剂的真伪。,常用的鉴别方法有 ： 化学法、光谱法、色谱法、生物学法。 影响鉴别反应的因素： 被测物浓度、试剂用量、溶液温度、pH值、反应时间、干扰物质。,化学鉴别法必须具备的特点： 反应迅速、现象明显、专属性强、再现性好。,第三章,药物的杂质检查,一、中国药典（

5、2010年版）中检查项下包括四个方面：,杂质检查 有效性（制酸力、吸着力） 安全性（热原、异常毒性、降压物、无菌） 制剂的检查（重量差异、崩解时限、含量均匀度等）,二、杂质的种类与来源,来源：生产过程中引入 贮藏过程中引入 种类：一般杂质 特殊杂质 信号杂质 毒性杂质 有机杂质、无机杂质、残留溶剂 （按理化性质分）,按来源分,按性质分,一般杂质：自然界中分布较广泛，在多种药物的生产或贮藏过程中容易引入的杂质。 如：酸、碱、水分、氯化物、硫酸盐、铁盐、重金属、砷盐、硫化物、氰化物、澄清度、溶液的颜色、干燥失重、水分、易炭化物和有机溶剂残留量等。,原理：,Ag+ Cl- AgCl 与标准氯化钠溶液

6、比浊。 灵敏度：标准NaCl（10gCl- /ml ） 50-80gCl-/50ml此范围内AgCl 的混浊度明显。 HNO3的作用：加速AgCl的生成，产生较好的 乳浊液，避免Ag2O、Ag3(PO4)、 Ag2CO3、Ag2SO4沉淀产生。,HNO3,原理：,SO42+Ba2+ BaSO4 与标准K2SO4（100g/ml）溶液比浊。 灵敏度100-500g/50ml。 稀HCl作用：防止BaCO3、Ba3(PO4)2生成。 酸度过大可使硫酸钡溶解，减 低灵敏度，50ml供试品中含 2ml稀盐酸为宜。,HCl,重金属系指在实验条件下能与S2-作用显色的金属杂质。 显色条件：弱酸性溶液（pH

7、3-3.5) 结果：重金属硫化物微粒均匀混悬在溶液中所呈现的颜色。 Ag、Pb、Hg、Cu、Cd、Bi、As、Sb、Sn、 Zn、Co、Ni。,第一法：硫代乙酰胺法,适于溶于水、稀酸和乙醇的药物。 CH3CSNH2H2O CH3CONH2H2S H2SPb2+(微量） PbS 标准硝酸铅溶液10g/ml比浊。 灵敏度10-20g/25ml 。 加CH3CSNH2前先用，NH3H2O调pH值至溶液 对酚酞呈中性，再加pH3.5醋酸盐缓冲液。,pH3.5,第二法：炽灼后硫代乙酰胺法,用于含芳环、杂环及在水、稀酸、乙醇中难溶的有机药物。 方法：将供试品炽灼破坏（500-600）后按第一法检查。,第三

8、法：硫化钠法 溶于碱而不溶于弱酸或在稀酸中产生沉淀的药物，如磺胺类、巴比妥类，均在碱性溶液中Na2S试液检查重金属。 第四法：微孔滤膜法 适于含重金属只有2-5g的供试品，即微孔滤膜过滤法，对铅斑比较，又称铅斑法。,古蔡法(Gutzeit),原理：金属锌和酸作用生成新生态的H2，与药物中微量砷盐反应生成具挥发性的AsH3 ,遇HgBr2试纸，产生黄色至棕色的砷斑，与定量标准砷溶液所产生的砷斑比较。,As3+ AsO33- AsO43-,新生态H2,SnCl2,AsH3,HgBr2,Pb(Ac)2棉花,砷 斑,（黄 棕）,AsH(HgBr)2 (黄) As(HgBr)3 (棕),试剂的作用：,S

9、nCl2 KI Pb(Ac)2棉花,SnCl2：,将As5+还原为As3+ 使KI生成的I2还原为I-，I-与Zn2+形成配离子，使AsH3 不断产生。 与Zn形成锌锡齐使H2均匀放出。 抑制SbH3生成,将As5+还原为As3+。 AsO43- + I - AsO33- + I2 抑制SbH3生成。 SbH3 + HgBr2 锑斑（干扰）,KI,除去微量硫化物（Pb2+S2- PbS) 与 HgBr2作用生成色斑，干扰结果。 控制AsH3放出速度。 Pb(Ac)2棉花用量多或塞得过紧，AsH3不易通过，除不尽H2S。,Pb(Ac)2棉花的作用,Ag-DDC法 （二乙基二硫代氨基甲酸银法）,A

10、g-DDC,红色胶态银 510nm处比色,A 对A供,AsH3,示例1,药典规定检查砷盐时，应取标准砷溶液2.0ml（每1ml相当于1g的As)制备标准砷斑，今依法检查NaBr中砷盐，规定含砷量不得超过0.0004%,问应取供试品多少克？ 解：已知L=410-6, V=2.0ml, C=10-3mg/ml, 求S.,热分析法：在程序控制温度的情况下，测定物质的物理化学性质与温度关系的仪器分析法。,差示扫描量热法：程序控温下，测量传输给待测物和参比物的能量差与温度关系。E-T,差示扫描量热法示例,原料纯度的测定： 在DSC曲线图上，纯化合物的熔融峰非常尖锐，混有杂质时则熔融峰随着杂质量的增加而逐

11、渐变宽，熔融起始温度下降，峰的高度降低，熔程变大。因此，熔融峰的变化可测定物质的纯度。图中曲线13表示纯度依次下降。,三、杂质的检查与限量计算,杂质限量：药物中所含杂质的最大容许量。 表示方法：百分之几或百万分之几。,对照法：取一定量的被检杂质标准液和一定量供试品溶液，相同条件下处理，比较结果（遵循平行原则：供试管与对照管应同步操作 ）。 灵敏度法：在供试品溶液加入一定量试剂，在一定反应条件下，不得有正反应出现。 比较法：取供试品一定量依法检测，测定特定待检杂质的参数，与规定的限量比较，不得更大。,特殊杂质检查,IR：在杂质检查中主要用于无效或低效晶型检查。 如：甲苯咪唑中，检A晶型。,A晶型

12、在640cm-1有强吸收，在662cm-1弱吸收。 C晶型弱 有强吸收。,故取供试品；10%A晶型的对照品 640cm-1 662cm-1 校正吸收值 D1 D2 R = D1/D2 对照品 校正吸收值 D1 D2 R= D1/D2 供试品,若R R，则本品中的A晶型在10%以下。,薄层色谱法是药典中最常用的特殊杂质检查方法 杂质对照品法（适合杂质已知且有对照品） Eg.枸橼酸乙胺嗪（驱蛔灵）检N-甲基哌嗪 供试品（50mg/ml） 杂质对照品（50g/ml）,判断:供试品如显与对照品相应的杂质斑点,其颜色与对照品溶液的主斑点比较,不得更深。,供试品溶液自身稀释对照法 对象：杂质结构不明确或无

13、杂质对照品。 条件：供试品与杂质显色相同，显色灵敏 度相近。 判断：供试品如显杂质斑点, 其颜色与对照品溶液 的主斑点比较,不得更深。,杂质对照品法与供试品溶液自身稀释对照法并用,对象：药物中存在多个杂质。 条件：已知杂质有对照品，采用杂质对照品法检 查；共存的未知杂质或无杂质对照品采用供 试品自身稀释对照法检查。,对照药物法,对象：无杂质对照品且杂质斑点颜色与主成分斑点 颜色有差异。 条件：选用质量符合规定的与供试品相同的药物作 为杂质对照品。 判断：供试品如显杂质斑点,不得多于对照品药物中 杂质斑点数,颜色不得更深。,系统适用性试验：,理论塔片数 分离度 重复性 对照溶液连续进样5次，A值

14、 RSD2.0% 拖尾因子0.95-1.05,第四章,药物定量分析与分析方法验证,湿法破坏凯氏定氮法,凯氏定氮仪 硫酸钾 过氧化氢 高氯酸,分解破坏有机物质的有效、快速、简便的方法。 原理：有机药物 各种价态卤素化合物 一定价态卤化物 定性、定量、检查 仪器装置 锥形瓶：硬质玻璃、磨口（500, 1000, 2000ml）。 瓶塞：空心、下端熔封一段呈螺旋状铂丝。 样品：包裹在无灰定量滤纸中心 氧瓶：通O2 1min,燃烧,吸收液,干法破坏氧瓶燃烧法,紫外-可见分光光度法用于含量测定的方法一般有对照品比较法、吸收系数法、计算分光光度法。 吸收系数有百分吸收系数和摩尔吸收系数，中国药典采用百分吸

15、收系数。 HPLC法测定供试品中主成分含量时，常用的方法是内标加校正因子法和外标法。,药品分析方法的验证,准确度 精密度 专属性 检测限 定量限 线性与范围 耐用性,准确度：指用该方法测定结果与真实值接近的程度，用回收率表示。,精密度（precision):在相同条件下多次测定结果，现了此法的再现性。 可用相对平均偏差、相对标准差、标准差表示。 重复性：相同条件下，同一人员测定结果的精密度。 中间精密度：同一实验室，不同时、不同人、不同设备测定结果的精密度。 重现性：不同实验室、不同人员测定结果的精密度。 数据要求：报告标准偏差、相对标准偏差、可信限,专属性：在样品介质中有其他组分共存时，该法

16、对供试物准确而专属的测定能力。,检出限：分析方法能够从背景信号中区分出药物时，所需样品中药物的最低浓度。 无需定量测定，是一种限度试验的参数，只需指出高于或低于该规定浓度即可，即用%、ppm或ppb。 仪器分析：以信噪比（2：1或3：1）时样品的最低浓度来确定检测限。,定量限：在保证具有一定可靠性（准确度和精密度）的前提下，分析方法能测定出的样品中药物的最低浓度。它须符合一定的精密度和准确度的要求。 定量限和检测限的区别：定量限定量测药物的最低浓度，且最低浓度须符合一定的精密度和准确度。检测限是估计值，无需定量，没有精密度、准确度的要求。,线性是指在给定范围内，供试物浓度与结果成线性关系。 U

17、V法：标准系列，浓度点n =5; A = 0.3.0.7 建立回归方程C=aA+b；r0.9999。 HPLC法：标准系列，浓度点n =57; 以C对h或A或与内标物的峰面积之比， 建立回归方程r0.9999。,范围：指达到一定精密度、准确度和线性、测试方法适用的高低限度或量的区间。 原料药和制剂含量测定：范围应为测试浓度的80%120%。 制剂含量均匀度检查：范围应为测试浓度的70%130%。,耐用性：在测定条件下有小的变动时，测定结果不受影响的承受程度。 典型的变动因素有：被溶液的稳定性、样品提取次数、时间等。 HPLC法变动因素有：流动相组成与pH，色谱柱，柱温，流速等。 GC法变动因素

18、有：色谱柱，固定相，担体，柱温，进样口和检测器温度等。,生物样品分析方法,在测定生物样品中药物及其代谢物时，一般要在测定前进行样品的前处理，即进行分离、纯化、浓集。 一、常用品种的种类、采集和贮藏 生物样品包括各种体液和组织，常用是血液（血浆、血清、全血）、尿液、唾液。,二、生物样品分析其前处理技术,（一）除蛋白质目的：使结合型的药物释放出来，以便测定药物的总浓度；去除蛋白质也可预防提取过程中蛋白质发泡，减少乳化的形成，以及可以保护仪器性能，延长使用期限。,去除蛋白质方法：1.加入与水相混溶的有机溶剂2.加入中性盐 3.加入强酸 4.加入含锌盐及铜盐的沉淀剂5.酶解法,第五章,巴比妥类药物的分

19、析,一、巴比妥类药物的结构,镇静催眠药，巴比妥酸的衍生物。,1,巴比妥类药物的环状结构中含有酰亚胺基团， 易发生互变异构，在水溶液中发生二级电离， 因此本类药物的水溶液显酸性。,典型药物,苯巴比妥 (phenobarbital) R2 -C6H5 司可巴比妥钠 (secobarbital sodium) R1 -CH2CH=CH2 硫喷妥钠(thiopetal sodium) C2上S取代物的钠盐,弱酸性 水解反应 与重金属离子的反应 与香草醛的反应 紫外吸收光谱特征,二、巴比妥类药物的理化特性,母核部分 的反应,与强碱成盐：,结构中酰亚胺，水解，放出氨气使 红色石蕊试纸变蓝。,与银盐的反应,

20、可溶,白色沉淀,1，5，5-三取代的巴比妥类药物，只能生成可溶性一银盐。,棕红色,与碘试液的反应 与高锰酸钾的反应 司可巴比妥+KMnO4 MnO2,棕色,三、鉴别试验,丙二酰脲类鉴别反应（银盐、铜盐） 取代基的鉴别 不饱和取代基的鉴别 芳环的鉴别苯巴比妥 （甲醛硫酸反应、硝酸，亚硝酸) 硫元素的鉴别,五、含量测定,银量法 溴量法 司可巴比妥,适于5位取代基中含双键的巴比妥类,司可巴比妥+Br2 产物 （定量过量） Br2（剩余）+ 2KI 2KBr + I2 I2 + 2Na2S2O3 2NaI + Na2S4O6,芳酸及其酯类药物的分析,第六章,一、水杨酸类药物,水杨酸 阿司匹林 对氨基水

21、杨酸钠,典型药物的结构,二、苯甲酸类药物,典型药物的结构,苯甲酸及其钠盐,一、阿司匹林中特殊杂质的检查,阿司匹林在空气中久放置时，易发生颜色变 化，其原因是阿司匹林水解产生水杨酸，其酚羟基被氧化成醌式有色杂质。 游离水杨酸（比色法检查） 水杨酸含酚羟基能与高铁反应呈紫堇色,二、对氨基水杨酸钠中特殊杂质的检查,间氨基酚的检查 Ch.p采用双相滴定法进行检查 间氨基酚溶于乙醚，而对氨基水杨酸钠不溶。在乙醚-水相中用盐酸滴定，用消耗盐酸的量控制其限量。,酸碱滴定法 亚硝酸钠滴定法（永停法指示终点） 双相滴定法,直接滴定法,阿司匹林、布洛芬原料药均可采用此法测定含量，其原理基于游离羧基具有酸性。,溶剂

22、：中性乙醇 滴定剂：NaOH溶液 指示剂：酚酞 讨论：为何用中性乙醇为溶剂？ 防止阿司匹林酯结构水解，致使测定结果 偏高，故不用水为溶剂。 为何选用酚酞？ 强碱滴定弱酸，化学计量点偏碱性，故选 用碱性区变色的酚酞。 滴定时应不断振摇且稍快地进行，防止局 部碱度过大而促使其水解。,两步滴定法（阿司匹林片、肠溶片）,中和 （目的：除去酒石酸、枸橼酸、水解产物、水杨酸、醋酸的干扰 ） 水解与测定 中和后的溶液中，加入定量过量的氢氧化钠液，置水浴上加热使酯结构水解，迅速放冷至室温，再用硫酸滴定液(0.05mol/L）滴定剩余的碱，并将滴定的结果用空白试验校正。 每1ml氢氧化钠溶液（0.1mol/L）

23、相当于阿司匹林（分子量180.16）的量是 18.02mg,双相滴定原理：,苯甲酸钠易溶于水，其水溶液呈碱性，可用盐酸滴定液滴定，但在滴定过程中析出的游离酸不溶于水，并且使滴定终点的pH突跃不明显，不利于终点的正确判断。因此，利用苯甲酸能溶于有机溶剂的性质，在水相中加入与水不相混溶的有机溶剂乙醚，置分液漏斗中滴定，滴定过程中产生的苯甲酸不断萃取入有机层中，减少苯甲酸在水中的浓度，使滴定反应完全，终点清晰，同时可降低苯甲酸的离解。 指示剂：甲基橙 终点：水层显持续橙红色,第七章,芳香胺类药物的分析,HCl,盐酸普鲁卡因,对乙酰氨基酚 (解热镇痛),肾上腺素 去氧肾上腺素,二、特殊杂质的检查,酮体

24、检查（肾上腺素类药物中均检查酮体 ） 杂质来源:原料残存 检查方法:UV法检测 利用酮体在310nm波长处有最大吸收，而药物本身在此波长处几乎没有吸收，规定一定浓度溶液在310nm波长处的吸收度限制酮体的量。,三、含量测定,亚硝酸钠滴定法（盐酸普鲁卡因的含量测定采用该法） 非水溶液滴定法,猩红色,普鲁卡因,测定原理： Ar-NH2+NaNO2+2HCl Ar-N2+Cl- 指示终点的方法： 永停滴定法（ChP、BP） 外指示剂法（KI淀粉糊剂或试纸） 2NaNO2+2KI+4HCl2NO+I2+2KCl+2NaCl+2H2O,反应速度 NaNO2+ HCl HNO2+ NaCl HNO2+ H

25、Cl NO+Cl-+ H2O Ar-NH2 Ar-NH-NO Ar-N=N-OH Ar-N=N+Cl-,NO+Cl-,慢,快,快,KBr+HCl HBr NOBr K大 HCl NOCl,HNO2,HNO2,加入适量溴化钾（目的：加速反应， 增加NOBr 浓度） 测定时加盐酸的其作用为： 重氮化反应速度加快。 酸度增高能增加重氮盐的稳定性。 防止生成偶氮氨基化合物。,测定条件：,提示：有机碱的盐酸盐需加醋酸汞。 有机碱的硫酸盐，只滴至HSO4-。 若碱性较弱，终点不明显，可加醋酐。 如：非水滴定法测定盐酸丁卡因含量所用的试剂：高氯酸、结晶紫、冰醋酸、醋酐、醋酸汞。,非水滴定：,盐酸利多卡因,+

26、,溶剂：冰醋酸（加醋酸汞消除氢卤酸的干扰，加醋酐以提高弱碱性并滴至HSO4-） 滴定剂：高氯酸（0.1mol/L） 指示剂：结晶紫或电位法指示终点,第八章杂环类药物的分析,典型药物的结构,异烟肼 尼可刹米,pKb=8.8,二、鉴别试验,吡啶环的开环反应 （戊烯二醛反应 、二硝基氯苯反应 ） 酰肼基团的反应（还原反应 、缩合反应 ）,异烟肼INH,黄至黄棕,戊烯二醛反应,尼可刹米,黄色,深红色,二硝基氯苯反应,Oxidant: I2、Br2、KBrO3、AgNO3,还原反应,香草醛,异烟腙（黄色）,缩合反应,三、有关物质检查,异烟肼中游离肼的检查 (来源:原料引入、降解产生) 薄层色谱法 中国药

27、典对异烟肼原料及注射剂中，游离肼的检查，均采用TLC(硫酸肼对照),托烷类药物的分析,一、基本结构与化学性质,典型药物的结构,硫酸阿托品 氢溴酸东莨菪碱,*,深紫色,莨菪酸,Vitali反应为托烷类生物碱的特征反应。本类药物与发烟硝酸共热，水解并得深紫色的三硝基衍生物。,非水滴定法测含量，正确判断反应的摩尔比,硫酸阿托品测定（碱性较强的一元碱 ）1：1 (BH+)2SO42- + HClO4 (BH+)ClO4- +(BH+)HSO4- 硫酸奎宁测定（二元碱 ）1：3 (C20H24N2 H+)2SO4 + 3HClO4 (C20H24N2 2H+)2ClO4- +(C20H24N2 2H+)

28、HSO4-ClO4- 硫酸奎宁片的测定： 硫酸奎宁片剂碱化处理，生成奎宁游离碱，再用高氯 酸标准溶液滴定 1：4,吩噻嗪类药物的分析,盐酸氯丙嗪、盐酸异丙嗪,硫氮杂蒽母核,与金属离子络合呈色（原理）,红色,本类药物的紫外特征吸收，主要由母核三环的系统所产生，一般具有三个峰值。 max:205, 254,300nm min:220nm,280nm 最强峰多在250265nm。,盐酸氯丙嗪注射液的测定,VC在盐酸氯丙嗪最大吸收波长254nm处有吸收，干扰注射液的测定。选用306nm波长测定盐酸异丙嗪注射液的含量时，VC在此波长处则不产生干扰。,苯并二氮杂卓类药物,环庚三烯,卓,一、结构特征与典型药

29、物,典型药物的结构,地西泮 氯氮卓,含量测定,一、非水溶液滴定法（原料药）,基本原理,二、比色法,酸性染料比色法 基本原理 影响因素 应用示例 钯离子比色法（选择性地用于未被氧化的吩噻嗪类药物的测定）,酸性染料：溴百里酚蓝、溴酚蓝、溴甲酚紫和溴甲酚绿 原理: 酸性染料比色法定义,水相最佳pH值的选择 pH值过小，酸性染料以分子状态存在。 酸性染料 生成的离子对在有机相中溶解度大，染料在有机溶剂中不溶或很少溶解；同时要求生成的离子对，于其最大吸收波长处有较高的吸收度 浓度太高，则易产生严重的乳化层。 有机溶剂的选择 （氯仿、二氯甲烷、苯、甲苯） 水分的影响,红色,癸氟奋乃静,钯离子比色法,指示终

30、点方法：自身指示剂法、电位法或永停法,三、提取中和法,在用提取中和法测定生物碱类药物时，最常用的碱化试剂为 氨水 ，最常用的提取溶剂为 。,第九章 维生素类药物的分析,第一节维生素A的分析,R：-H 维生素A醇VA retinol -COCH3 维生素A醋酸酯Vitamin A acetate -COC15H31 维生素A棕榈酸酯VA palmitate,共轭多烯侧链的环己烯,8 6 4 2,9 7 5 3 1,含量测定,UV法（三点校正法） 为何要采用三点校正法？ 测定原理 测定方法,三点校正法,杂质的吸收在310-340nm波长范围内呈一条直线，且随波长的增大吸收度减小。 物质对光的吸收具

31、有加和性。,波长的选择： 1 VitA醋酸酯的max（328nm） 2 3 分别在1的两侧各选一点（316，340nm）,第二节维生素B1的分析,氨基嘧啶环CH2噻唑环(季铵碱),鉴别试验,硫色素反应,硫色素（蓝色荧光）,第三节维生素C的分析,L抗坏血酸,*,*,含量测定,碘量法 原理、方法、讨论 如何消除抗氧剂的干扰?,指示剂 淀粉指示液,H+,取本品约0.2g，精密称定，加新 沸过的冷水100ml与稀醋酸10ml使溶 解，加淀粉指示液1ml，立即用碘滴 定液（0.1mol/L）滴定，至溶液显蓝 色，在30秒内不褪。每1ml碘滴定液 (0.1mol/L)相当于8.806mg的C6H8O6,（

32、1）条件:醋酸，减慢VitC被O2氧化速度,（2）溶剂:新沸过的水 （3）立即滴定 （4）附加剂干扰的排除,赶走水中O2,减少O2的干扰,片剂 滑石粉 过滤,注射剂 抗氧剂 ,丙酮 甲醛,Na2SO3 NaHSO3 Na2S2O3 Na2S2O5,10,甾体激素类药物的分析,环戊烷骈多氢菲母核,2,10,6,21,1、肾上腺皮质激素（皮质酮的衍生物）：代表物为可的松、泼尼松、地塞米松。 结构特点： A环 具有43酮基 C环 有OH D环 有CCH2OH（醇酮基），多数为-羟基。,主要分析基团： 43酮基,皮质酮,常用的两种四氮唑盐,2，3，5三苯基氯化四氮唑（TTC） max = 480490

33、nm,蓝四氮唑（BT）max = 525nm,TTC,2e,(H),BT,2e,BT单甲 （红色）,双甲（蓝色）,三苯甲 （红色）,四氮唑比色法,2e,蓝四氮唑（BT） BT 单甲 BT-双甲,碱的种类及加入顺序的影响：常用氢氧化四甲基铵，一般先加四氮唑盐溶液后加碱。 应用范围：本法广泛适用于皮质激素的测定。,（2）雌激素（卵泡激素）,雌二醇,炔雌醇,结构特点：A环为苯环；C3上有酚羟基；D环C17位有羟基；C10无甲基。,2、雌激素,主要用于雌激素药物的分析。 Kober反应分两步：,硫酸乙醇,呈黄色,水或稀酸,呈桃红色,max = 465nm max =515nm,Kober反应,雌激素,

34、（I）max=372nm,+,（II）max=465nm,（III）max=515nm,（黄）,（桃红）,雌二醇-3-甲醚,3、孕激素 也称孕酮或黄体激素。代表物：黄体酮(progesterone) 结构特征：A环具有43酮基；D环C17上有 甲基酮COCH3,黄体酮,4 -,2 -,蓝紫色,黄体酮可与亚硝基铁氰化钠反应生成蓝色,第十一章抗生素类药物的分析,内酰胺类抗生素的分析 氨基糖苷类抗生素的分析 四环素类抗生素的分析,抗生素：在低微浓度下即可对某些生物的生命活动有特异抑制作用的化学物质的总称。,一、结构与性质,代表物：青霉素类和头孢菌素类。 青霉素族抗生素在酸、碱、羟胺、青霉素酶、Cu2

35、+等金属离子条件下易发生水解和分子重排，导致-内酰胺环的破坏。,* *,*,3个手性C,-内酰胺环 氢化噻嗪环,* *,母核为7-氨基头孢菌烷酸（7-ACA）,2个手性C,第三节,氨基糖苷类抗生素,二、鉴别试验,麦芽酚反应 坂口反应,链霉素,麦芽酚,此反应为链霉素所特有,麦芽酚反应,链霉胍,链霉胍,坂口反应,第四节 四环素类抗生素,一、结 构,1,2,3,4,5,6,7,8,9,10,11,12,四并苯环母核 代表物：四环素、土霉素、金霉素。,*,四环素,差向四环素,脱水四环素,差向脱水四环素,pH26,pH26,pH2,pH2,（黄粉末）,（淡黄）,（橙红）,（砖红）,抗生素的效价测定主要分

36、为微生物检定法 和HPLC两大类。,第十二章,药物制剂分析,片 剂 的 分 析,重量差异检查 崩解时限检查 含量均匀度检查 溶出度检查 释放度检查,一、常规检查,一般,特殊,重量差异检查： 以称量法测定每片与平均片重之间的差异程度。凡规定检查含量均匀度的片剂，可不进行此项检查。,规定：20片中超出重量差异的药片不得多于2片，并不得有1片超出限度的一倍。,崩解时限：固体制剂在规定的检查方法和液体介质中，崩解溶散并通过筛网所需时间的限度。 含量均匀度：小剂量的片剂、膜剂、胶囊剂或注射用的无菌粉末等每片（个）含量偏离标示量的程度。制剂凡检查含量均匀度，不再检查重量差异。 溶出度：药物从片剂（或胶囊剂

37、）等固体制剂在规定的溶剂中溶出的速度或程度。,附加剂： 淀粉、糊精、蔗糖、乳糖及少量的硬脂酸镁、滑石粉等。 附加剂的干扰及排除 糖类 硬脂酸镁,含量测定方法,糖类主要干扰氧化还原类型，尤其对采用强氧化剂（KMnO4,KBrO3）测定含量的主药有影响。 排除：采用氧化势稍低的Ce(SO4)2作滴定剂。,Fe2+ + Ce4+ Ce3+ +Fe3+,干扰：（1）Mg2+干扰配位滴定； （2）硬脂酸根干扰非水滴定。 排除：（1）加掩蔽剂（如酒石酸）消除Mg2+的干扰。 （2）当硬脂酸根干扰时，排除的方法有： 以草酸为掩蔽剂；以有机溶剂提取后再测定。,含量相当于标示量的百分数,三、结果的表示,注射剂的

38、分析,注射液常见干扰及排除：干扰的反应类型？ 抗氧剂的干扰及排除 加入掩蔽剂 加酸分解 加入弱氧化剂 利用主药与抗氧剂UV差异,二、含量测定,抗氧剂：亚硫酸钠、亚硫酸氢钠、焦亚硫酸钠、硫代硫酸钠、维生素C等。 干扰的反应类型：碘量法、铈量法、亚硝酸钠滴定法。 干扰排除：1、加掩蔽剂：甲醛、丙酮 实例： 1、Vc注射剂的碘量法测定,2、加酸分解：亚硫酸钠、亚硫酸氢钠、焦亚硫酸钠，可被强酸分解，如磺胺嘧啶钠注射液采用亚硝酸钠滴定法，其中亚硫酸氢钠的排除为： NaHSO3 + HCl NaCl + H2O + SO2,A,243 254 306,3、利用主药和抗氧剂紫外吸收光谱的差异 例：盐酸氯丙嗪

39、注射液的测定 盐酸氯丙嗪 max（254nm，306nm），Vc的 max （243nm） 在306nm处测定，按E=115计算,Vc,盐酸氯丙嗪,第十三章 生物制品分析概论,生化药物：从动物、植物及微生物提取的，也可用生物-化学半合成或用现代生物技术制得的生命基本物质及其衍生物、降解物及大分子结构修饰物等。 生物合成药物：由微生物代谢所产生的药物和必须利用微生物及其酶转化反应共同完成的半合成药物。 酶活力测定：以酶为分析对象，测定样品中酶的含量或活性。 酶法分析：以酶为分析工具或试剂，测度样品中酶以外其他物质的含量。,一、定 义,生物制品特殊杂质的是包括： 外源DNA 突变蛋白 残余抗生素,

40、生物制品的种类,疫苗类药物 抗毒素及抗血清类药物 （如抗狂犬病血清 ） 血液制品 重组DNA制品 诊断制品 氨基酸 等,生物制品具有的特点：,分子量不是定值 结构确证难 需检查生物活性 能参与、影响和调控人体代谢和生理功能 需做效价测定,第十四章中药及其制剂概论,中药指纹图谱:中药材、提取物或中药制剂等经适当处理后，采取一定的分析手段，得到能标示该中药材、提取物或中药制剂特性的共有峰的图谱。 显微鉴别:利用显微镜来观察药材及含药材粉末的中成药的组织构造、细胞形状及化合物的特征，以鉴别中药的真伪。,中药指纹图谱的分类,按测度手段分类：中药化学指纹图谱和中药生物指纹图谱。 按应用对象分类：中药材指纹图谱、中药原料药指纹图谱、生产工艺过程中间产物指纹图谱和中药制剂指纹图谱。,中药材生产质量管理规范为GMP。 液体制剂提取分离