1.基因工程的工具 (2).ppt

1、专题1 基因工程,第一节 基因工程的工具,海南省屯昌县屯昌中学 刘学,如何得到蜘蛛羊？,蜘蛛细胞,绵羊细胞,蜘蛛基因,阅读课本4-5页“限制性核酸内切酶分子手术刀”的相关内容，小组展示答案并纠正错误。,自主学习1,一、基因工程的工具-分子手术刀,限制酶有4000多种。以下是几种常用的限制酶 识别序列及切割位点。,回文诗： 客上天然居，居然天上客。 心清可品茶，茶品可清心。,1：识别,回文序列,限制性内切酶（EcoR）作用过程,注：限制酶的作用部位,磷酸二酯键,Sma,平末端平末端,中心轴线处切开,学生活动（一）,在人胰岛素基因两侧各有EcoRI限制酶识别的序列GAATTC,切割位点在G和A之间

2、，请小组合作提取人的胰岛素目的基因。,剪刀：代表EcoRI限制酶,Q1：剪切下来的末端是平整的吗？,Q2：将剪切下来4个末端两两放在一起，是否可以粘合？,Q3:为什么上述的黏性末端两两放在一起，都能发生碱基互补配对呢？,探究活动（一）,载体的种类,载体的必要条件,载体的作用,阅读课本第6页“分子运输车”运载体的相关内容，小组展示答案并纠正错误。,自主学习2,二、基因工程的工具-分子运输车,能复制并带着插入的目的基因一起复制,有切割位点,标记基因将来可用含青霉素的培养基鉴别。,基因工程中常用的载体质粒,质粒是一种裸露的、结构简单独立于细菌拟核之外、具有自我复制能力的双链环状DNA分子。,安全无毒

3、，大小适中,在天然质粒的基础上进行人工改造,12,类型,来源,功能,相同点,差别,EcoliDNA连接酶,T4DNA连接酶,阅读课本第5页“分子缝合针”DNA连接酶的相关内容，小组展示答案并纠正错误。,自主学习3,三、基因工程的工具-分子缝合针,DNA连接酶的作用过程,课后探究：DNA连接酶与DNA聚合酶是一回事吗?,学生活动（二）,模拟DNA重组操作，完成人胰岛素基因与质粒重组，小组合作尝试重组所有可能出现的连接情况。,白色纸条：运载体，环状 彩色纸条：目的基因 剪刀（代表EcoRI) 透明胶带（代表DNA连接酶）,Q1.目的基因与质粒连接时可能出现几种情况？,1. 载体与目的基因之间的连接

4、 2. 载体与目的基因的反向连接 3载体与载体的连接 4. 目的基因与目的基因的连接 5.载体的自身环化 6.目的基因的自身环化,Q2.如何避免出现上述情况？,选择两种限制酶同时切割目的基因和质粒，避免自身环化。,探究活动（二）,16,现实中的问题 中国每10人就有一个糖尿病患者 有效药物：胰岛素从猪的胰脏中提取 1位病人、1年需要3500头猪,生物科学技术的发展 1978年 把人胰岛素基因导入大肠杆菌中，大肠杆菌合成人胰岛素 10立方米的发酵罐培养生产一次，可供1位病人1年之需,课后作业：如何让大肠杆菌产生人的胰岛素基因？预习第二节内容，写出基因工程的操作步骤。,“分子手术刀”：限制性核酸内切酶,“分子缝合针”：DNA连接酶,“分子运输车”：载体,来源,作用,结果,分类,作用,载体种类,载体的条件,作用,基因工程的基本工具,课堂小结,1）不属于质粒被选为基