布洛芬含量测定方

1、布洛芬含量测定方法综述布洛芬的概况布洛芬（Ibuprofen，简称IB），是一种非甾体抗炎药，具有镇痛、抗炎、解热等作用，其作用机制主要通过对环氧酶的抑制而减少前列腺素的合成，从而降低神经痛觉的敏感性，同时通过下体温调节而起解热作用。该药适用于多种关节炎、非关节性的各种软组织疼痛、急性轻中度疼痛等。其分子式：C13H18O2 分子量：206.28 化学名：2-甲基-4-(2-甲基丙基)苯乙酸 结构式： 布洛芬的存在形式有多种多样，如：布洛芬胶囊、布洛芬片 、布洛芬缓释胶囊、布洛芬缓释片、布洛芬混悬液、布洛芬颗粒、布洛芬软胶囊等。布洛芬现有的测定方法目前已有检测方法：分光光度法，高效液相色谱法，

2、原子吸收法等。本文就以布洛芬片为例对布洛芬含量测定方法做一个简单的综述。1.紫外分光光度法 布洛芬片含量测定方法，中国药典2005年版采用的中性乙醇作溶剂，用氢氧化钠保准溶液进行滴定。此用紫外分光光度法对布洛芬片进行含量测定，方法简洁，结果精确。效果也较为理想。1.1仪器、试剂与药品日本岛津UV2100紫外分光光度仪，METTLER AE-240型电子天平；布洛芬原料（经滴定法测定含量为100.6%）；布洛芬片（湖北亨迪药业有限公司）；试剂为分析纯。1.2方法与结果1.2.1 测定波长的选择 取布洛芬原料药25mg，置100ml量瓶中，加0.4%的氢氧化钠溶液溶解并稀释至刻度，制成0.25mg

3、/ml的溶液。滤液在紫外分光光度计下235nm300nm扫描,在265nm与273nm波长处有最大吸收，在245nm与271nm波长处有最小吸收，259nm的波长处有肩峰，与中国药典2005版描述一致。本方法在265nm波长处测定吸收度。1.2.2 标准曲线的制备 精密称布洛芬原料约500mg置100ml量瓶中，加0.4%的氢氧化钠溶液并稀释至刻度，摇匀，滤过。精密量取续滤液2、4、6、8、10ml分别置100ml量瓶中，加0.4%的氢氧化钠溶液稀释至刻度摇匀，照分光光度法分别在265nm波长处测定吸收度，并绘制标准曲线。见图1： 按最小二乘法计算回归方程为A=-0.0229 +1.857C（

4、mg/ml）， r=0.9995 ， 本品在0.10.5（mg/ml）时吸收度和溶液浓度呈良好的线性关系。 1.2.3溶液稳定性试验 取1 项下的溶液分别在室温下放置0小时、1小时、2小时、4小时后再进行吸收度测定， 结果基本不变。1.2.4 回收率实验 精密称取本品原料200mg，共5份，分别加入处方量中的各辅料制成模拟布洛芬片， 混匀。精密称定， 精密称取约相当于布洛芬25mg， 置100ml量瓶中， 加0.4%氢氧 化钠溶液溶解并稀释至刻度， 摇匀， 过滤。滤液在265nm波长处测定吸收度(A) ， 根据回归方程求出浓度并计算回收率。结果见表1 。 1.2.5 样品测定 取本品20片出去

5、糖衣，精密称定，砚细，精密量取约相当于布洛芬25mg，按，回收率测定步骤，稀释样品，测定吸收度，按回归方程计算含量。结果与滴定法比较，结果见表2：小结 紫外分光度法测定布洛片的含量，方法简便，快速，结果 准确可靠，可以推广使用。2.高效液相色谱（HPLC）法2.1 仪器与试药Series型高效液相色谱仪，SSI500紫外检测器，色谱柱： AgilentC8柱(150mm4.6mm，5um) ;布洛芬对照品(中国药品生物制品检定所,批号0179-9702) ;乙腈为色谱纯,磷酸为分析纯，水为超纯水；布洛芬片(市售品) 。 2.2方法与结果 2.2.1色谱条件 色谱柱 ：AgilentC8柱(15

6、0mm4.6mm，5um);流动相：乙腈-0.01mol/L磷酸溶液（40：60）;检测波长：220nm；流速：1.0ml/min；进样量：10ul;理论板数按布洛芬峰计算应不低于1000。2.2.2 对照品溶液的制备 取经五氧化二磷干燥器内减压干燥至恒重的布洛芬对照品适量， 精密称定， 加6.%甲醇溶解并稀释制成1ml中约含0.80mg的溶液，即得。2.2.3 样品溶液的制备 取本品20片，去糖衣，研细，精密称取细粉适量(约相当于布洛芬0.2g) ， 置50ml量瓶中，加甲醇30ml超声10min使溶解，加水至刻度,摇匀，滤过，精密量取续滤液2ml,置10ml量瓶中， 加60%甲醇溶液至刻度

7、，摇匀,即得。 2.2.4 空白干扰实验 按处方比例和工艺 ，制成不含布洛芬的阴性供试品。进行测定，在与样相同保留时间处未出现色谱峰， 对测定无干扰( 见图 1 ) 。 2.2.5 线性关系 精密量取对照品约100mg,精密称定，置50ml量瓶中,加60%甲醇15ml超声10min使溶解。加60%甲醇溶液至刻度，摇匀。精密量取该溶液1.0、2.0、3.0、4.0、5.0、6.0、7.0分别至于10ml量瓶中，各用60%甲醇溶液稀释至刻度，摇匀。进样10ul，记录色谱图。以峰面积（A）为纵坐标，浓度（C）为横坐标绘制标准曲线。得回归方程为：A=35865.61C+2395.21，r=0.9998

8、（n=7）结果表明，布洛芬浓度在2001400ug/ml范围内线性关系良好。2.2.6 精密度实验 精密量取对照品溶液(0.8mg/ml)10ul， 按上述色谱条件重复进样5次,结果布洛芬峰面积RSD为0.73。2.2.7 重复性实验 取同批样品6份，照“样品测定”项下操作，测得样品中布洛芬含量平均值为99.2 ，RSD为1.1 5 ( n=6 )，表明本法重复性良好。2.2.8 回收率试验 采用加样回收试验法。取已知含量的样品适量9份 ，分别加入布洛芬对照品相当于样品中已知含量的80，100，120各3份，照样品测定项下方法测定 ，计算含量，结果见表 1 。2.2.9 稳定性实验 取同批样品

9、溶液分别于0，2，4，6，8，10h后进样测定，测得布洛芬含量为98.5 ，RSD为0.89。结果表明，布洛芬溶液在10h内稳定。2.2.10 样品测定HPLC法 分别精密量取对照品溶液和样品溶液 各 10ul， 注入液相色谱仪，按上述色谱条件测定，记录峰面积,以外标法计算 3 批样品中布洛芬含量，结果见表2。UV法 取本品20片，除去糖衣后，精密称定，研细，精密称取适量( 约相当于布洛芬0.5g) ,加中性乙醇20ml ，振摇溶解，用垂熔玻璃漏斗滤过，容器与滤器用中性乙醇，洗涤4次，每次10ml，洗液与滤液合并 ，加酚酞指示液5 滴，用氢氧化钠滴定液(0.1mol/L) 滴定，测得布洛芬的含

10、量，结果见表2： 3 单扫描示波极谱法 3.1 仪器与试剂仪器 ：JP-303型极谱分析仪（成都仪器厂）。三电极体系：工作电极-滴汞电极，参比电极-饱和甘汞电极，对电极-铂丝。LK98BI微机电化学分析系统（天津兰力科化学电子高技术有限公司）三电极体系：工作电极-悬汞，参比电极-饱和甘汞电极，对电极-铂丝。LK98A电极工作站。试剂：布洛芬（湖北金龙福药业有限公司）标准液：1.010-3mol/L。准确称0.0206g布洛芬，用少量乙醇溶解，用水定容在100ml容量瓶中；K2S2O8（北京化学试剂三厂）溶液：0.1mol/L；HAc-NaAc(pH=4.2)缓冲溶液：0.2mol/L，取0.2

11、mol/L HAc和0.2mol/L NaAc按2.77：1（V/V）混合配制。其余试剂均为分析纯，实验用水为二次蒸馏水。3.2 实验方法 加入5ml HAc-NaAc(pH=4.2)缓冲溶液，0.5ml布洛芬标准溶液于比色管中，加水稀释至刻度（12.5ml）摇匀，转移至电解池中。于-0.8-1.4V作线性扫描，扫描速率为100mV/s。静止时间为2s。记录在-1.06V处的极谱波的二阶倒数峰峰电流。循环伏安法实验由LK98BII型微机电化学分析系统完成。结果1.在测量布洛芬极谱催化波的电位范围内为了抑制底电流的影响，本文采用二阶导数技术记录极谱图，峰形尖锐，容易准确测量。其单扫描示波极谱图如

12、图1所示。a. 0.08 mol/L HAc-NaAc(pH=4.2)缓冲溶液（Buffer）b. a+2.010-7mol/L布洛芬（Ibuprofen）c. b+0.1 mol/L K2S2O8图1 布洛芬二次导数单扫描极谱图2校准曲线及检出限 在本文所选定最佳支持电解质中，布洛芬催化波的二次导数峰电流ip与其浓度在4.010-85.010-7mol/L范围内呈线性关系，其线性方程为：ip/nAs-2=-102.3+6.21010 C (mol/L)，相关系数r=0.9980 (n=8)。检测限为2.010-8mol/L。10次平行测量2.010-7mol/L布洛芬含量的RSD为2.2 %

13、。3加标尿样回收率的测定 准确移取一健康人尿样若干份1ml于10ml容量瓶中，分别加入适量布洛芬标准溶液，按实验方法作回收实验见表1，结果满意，表明该方法有可能用于生物样品的测定。 表1 回收实验Table1 Recovery tests (n=4)4. 离子色谱法4.1 仪器与试剂 2010i型离子色谱仪(美国戴安公司),C2R3A色谱数据处理机(日本岛津公司)。主要试剂:布洛芬、碳酸钠、碳酸氢钠、氢氧化钠均为分析纯。去离子水:电导率约为0.2S/cm。样品为江西赣江制药有限公司生产的布洛芬片4.2色谱条件HPLC2AS4分离柱;流动相:1.5mmol/L碳酸钠-1.5mmol/L碳酸氢钠;

14、检测器:紫外检测器;检测波长:215nm。4.3样品的提取 取布洛芬片1片,准确称量后置入碾钵中碾碎,准确称取0.006g左右置入一50mL烧杯中,加30mL淋洗液入烧杯中,超声提取30min,用0.45m微孔滤膜过滤(压滤),用淋洗液洗过滤系统3次,定容于50mL容量瓶,准确移取10mL所配溶液于另一50mL烧杯中,用淋洗液稀释到刻度待测。4.4淋洗液的选择布洛芬在碱性溶液中离解成负一价的阴离子,所带的电荷较低,其上虽有苯环,但由于其上的苯环距负电荷中心很远,不能与负电荷中心共轭,故带电荷部分不容易极化变形,与阴离子交换剂的亲和力较弱,则选用浓度较低的1.5mmoL/L碳酸钠-1.5mmoL

15、/L碳酸氢钠淋洗液,分离效果良好4.5工作曲线和检出限 在选定的条件下,布洛芬在浓度140mg/L范围内,布洛芬浓度与峰高(mm)线性关系良好,回归方程为y=0.1067x-0.1384,相关系数为0.9995。在选定的条件下,布洛芬的最低检出浓度为2.4210-5g/L4.6样品的检测及加入回收率试验 将处理好的样品在给定条件下进样,记录色谱图,7次平行测定,RSD等于0.92%。做加入回收率试验,结果见表1。此布洛芬片剂的标示量为每片含0.1g布洛芬,中华人民共和国药典1规定布洛芬的含量应为标示量的98%105%,以上结果均在规定范围以内。5. 毛细管气相色谱法1仪器与试药 仪器：GC90

16、0B高性能气相色谱仪（上海天普分析仪器有限公司）；N2000色谱工作站；瑞士梅特勒-托利多MS精密天平（梅特勒-托利多中国公司）；AS-01无油隔膜真空泵（北京优晟联合科技有限公司）；SB25-12D超声波清洗机（宁波新芝生物科技股份有限公司）；RE-501旋转蒸发仪（深圳市朗诚实业有限公司）；MEM-MERT真空烘箱（上海人和科学仪器有限公司）；Kertone实验室超纯水机（科尔顿中国有限公司）；H.S11-1电热恒温水浴锅（上海昨非实验室设备有限公司）；SOCOREX可调容量移液器（北京桑翌实验仪器研究所）；AHS-6890自动顶空进样器（北京华仪三谱仪器有限责任公司）。 1.2色谱柱：石

17、英毛细管柱（0.53mm1.0m，30m，SE-30）。 1.3对照品：咖啡因对照品(中国药品生物制品检定所)、布洛芬对照品(中国药品生物制品检定所)。 1.4试剂：水为纯化水，其它试剂均为分析纯。 1.5试药：布洛芬胶囊（北京万辉双鹤药业有限责任公司，国药准字H11022549）2测定方法确定 2.1色谱条件石英毛细管柱（0.53mm1.0m，30m，SE-30）；载气：氮气；汽化室温度220；检测器温度260；柱温200。进样量：1l，分流比1:8。2.2对照品溶液的制备2.2.1内标液的配制。取咖啡因10mg置于10ml容量瓶内，加甲醇溶解并定容至刻度（每毫升含1mg咖啡因），即得。2.

18、2.2对照品溶液的制备。精密称取布洛芬对照品50mg至25ml容量瓶中，加甲醇溶解并定容，即得。2.2.3供试品溶液的制备。取装量差异项下的供试品内容物，研细，精密称取（相当于布洛芬20mg），置具塞锥形瓶中，精密加入甲醇10mL，密塞，精密称定重量，超声处理(240W，40kHz)30min，放冷,精密称定，用甲醇补足重量，摇匀，滤过。取续滤液，即得。2.3专属性试验依照处方取除布洛芬，按样品制备工艺制成阴性对照样品，照2.2.3项下供试品溶液的制备方法制成阴性液，依上述方法测定，结果在布洛芬出峰处阴性液无色谱峰，结果阴性试验没有干扰，表明本方法专属性良好。2.4精密度试验精密称取布洛芬对照

19、品20mg至10ml容量瓶中，加甲醇溶解并定容。照上述色谱条件，精密吸取1l，连续进样6次，记录峰面积。结果，RSD=0.99%，表明本方法精密度良好。2.5对照品的线性考察分别精密称取布洛芬对照品5.0、10.0、20.0、40.0、80.0mg至10ml容量瓶中，分别加入内标液1ml，加甲醇溶解并定容。取上述溶液，分别精密上述溶液吸取1L，注人气相色谱仪，依照2.1项下的色谱条件测定，记录色谱峰。以布洛芬与内标峰面积比值(Y)为纵坐标，浓度(X)为横坐标，绘制标准曲线，计算回归方程为：y=0.031x一1.721（r=0.99996）。结果表明，布洛芬在0.58mgmL-1范围内呈良好的线

20、性关系。2.6重现性试验称取同一批的布洛芬样品6份，按测定方法项下的方法制备供试品溶液，测定含量，并计算样品的RSD值，结果RSD为0.98%，结果表明此方法的重现性良好。2.7准确度试验取对照品适量，加入到样品中，加入量分别相当于样品含量的80、100、120。取模拟片照“含量测定”项下方法试验，计算回收率为99.6%，RSD为0.93%。 2.8样品稳定性试验取同一批布洛芬样品，按2.2.3项下的供试品制备方法制备供试品，将供试品置室温下放置，分别于第0、1、2、3、4、5小时，精密吸取供试品溶液10?l注入液相色谱仪中，记录色谱图。测定布洛芬中布洛芬的RSD=0.63%。结果表明供试品5

21、小时内稳定。2.9样品含量测定依照上述含量测定方法，测定布洛芬三批样品中布洛芬的含量，结果三批样品的含量分别为98.9%、99.1%、98.5% 小结 测定布洛芬多采用酸碱滴定法测定，酸碱滴定法专属性不强，采用毛细管气相色谱法具有较强的专属性。酸碱滴定法与毛细管气相色谱法具有相似的精密度和准确度，但毛细管气相色谱法方法简便。本实验表明此方法分离效果好、方法简便、快捷、准确,、专属性好，可用于布洛芬片中布洛芬的含量测定。6高效毛细管电泳11仪器 LUMEXCAPEL105型毛细管电泳仪，LUMEXLtd，Russia；ChromSpec15x数据处理工作站及紫外检测器（190400nm）；双光束

22、紫外可见分光光度计TU1901，北京普析通用仪器责任公司；未涂层熔融石英毛细管，内径为75m65cm（有效长度57cm），河北永年锐沣色谱器件公司；KQ250B超声波清洗仪昆山市超声仪器公司。12药品及试剂对硝基苯酚（CP），其他试剂均为分析纯。实验用水为二次蒸馏水，实验中所有溶液进入毛细管之前均用045m纤维素滤膜过滤。芬必得布洛芬缓释胶囊，中美天津史克制药公司；布洛芬片，江西中兴汉方药业公司；布洛伪麻分散片，河北冀衡药业公司；倍得芬布洛芬软胶囊，石药集团恩必普药业公司；布洛芬混悬液，扬州市三药制药公司。布洛芬标准储备液：准确称量50mg布洛芬对照品，用适量的甲醇溶解，于50mL棕色容量瓶中

23、定容，配制成1000mgL1标准储备液置于4冰箱中保存13实验方法131毛细管冲洗方法每次进样前依次用水冲洗10min，01molL1NaOH溶液冲洗10min，再用水冲洗10min，最后用运行缓冲溶液冲洗5min，两次测定间用运行缓冲液冲洗毛细管3min。132CE测定参数及条件检测波长：220nm；压力进样：30mbar；进样时间：15s；分离电压：20kV；温度：25；缓冲溶液：10mmolL1的硼砂（pH92）；内标：20mgL1的间苯二酚1.4电泳样品前处理胶囊、片剂型药品：取一粒布洛芬缓释胶囊，研碎转移至烧杯中，称取02211g，适量甲醇溶解，转移至1000mL容量瓶中，并加入20

24、mL浓度为1gL1的间苯二酚，用超纯水定容，用滤膜过滤，取滤液作为分析液。溶液型药品：量取002mL的混悬液于100mL的容量瓶中，加入200mL浓度为1gL1的间苯二酚，用超纯水定容，用滤膜过滤，取滤液作为分析液2结果与讨论21检测波长与内标物的选择取布洛芬标准液在190400nm范围内扫描，其紫外吸收光谱见图1。从图1可知，目标物在220nm处有特征吸收峰，因而选220nm为检测波长。为减少进样误差等因素的影响，提高定量分析的精密度，考察了苯酚、间苯二酚、焦性没食子酸、对硝基苯酚的电泳行为，发现在10mmolL1的硼砂缓冲溶液中，间苯二酚的电泳淌度与被测组分相近，吸收灵敏度高，峰形好，是测

25、定布洛芬的良好内标线性范围、检测限及精密度分别配制浓度为10、50、100、200、400mgL1的布洛芬溶液（内含20mgL1的内标间苯二酚），在上述选定条件下进行电泳分析。以布洛芬的相对峰面积y（即被测物的峰面积与内标物的峰面积之比）对其质量浓度（mgL1）进行线性回归分析。实验发现，布洛芬在10400mgL1的浓度范围内具有良好的线性关系，线性回归方程为：y=0038500966，相关系数r=09997。以噪音的3倍（S/N=3）推算得布洛芬的检测限为053mgL1。在上述最佳的条件下，取200mgL1布洛芬的混合液（内含有20mgL1的间苯二酚）连续进样7次，迁移时间和峰面积的相对标准

26、偏差（RSD）如表1样品分析与加标回收率取布洛芬片、布洛伪麻分散片、布洛芬混悬液、布洛芬软胶囊、布洛芬缓释胶囊，经过14步骤预处理，添加内标物（进样浓度为20mgL1），配制成一定浓度的分析液。按实验方法测定，对照品和部分药品试样毛细管电泳谱图见图2，各药品目标物测定结果如表2。同时进行回收率试验，结果如表3通过实验测得布洛芬的平均含量为所测药品标示量的989%1048%，所测的药品含量与药品说明书基本一致。但与高效液相色谱法7相比，样品加标回收率波动较大。实验证明，HPCE作为处于不断发展中的定量方法，与高效液相色谱一样，可以用于药品中布洛芬的含量测定参考文献1涂逢樟，董雁，项小燕，姚辉梅，

27、许智超。高效毛细管电泳电堆积柱上富集法分离与测定5种药品中布洛芬的含量 2010年38卷第8期 广州化工/view/46e9c46d1eb91a37f1115ca8.html2.赵鑫，赵德春。毛细管气相色谱法测定布洛芬胶囊的含量 科技论坛/view/a5fbdb4dcf84b9d528ea7aec.html3.马淮凌，曹广秀，王晓娟 单扫描示波极谱法测定布洛芬4.柏学敏 文丽丽 尹传明，紫外分光光度法测定布洛芬片含量 黑龙江医药heilongjiang medicine journal vol.20 No.1 2007 /view/721fe2bdc77da26925c5b0de.html5.傅厚暾,周娇离子色谱法分