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文档简介

1、结核分歧杆菌检测新技术结核菌分泌蛋白抗原快速检测,1,我国流行概况,是全球22结核病高负担国家之一 活动性肺结核病人数居世界第二,仅次于印度 是我国重点控制疾病之一 目前估算全国活动性肺结核病人450多万,每年新发传染性肺结核患者150多万 全国约45%的人受过结核菌的感染,明显高于全球水平,2,2014年全国法定法定传染病发病率,3,煤矿行业结核比率,据北京京煤集团总医院结核病科孔冬青主任调查,肺结核科住院治疗的611例煤工尘肺合并肺结核患者,经筛查,检出痰菌阳性223例。即三分之一的人均患有肺结核。该数据逐年递增。,4,危害,5,WHO对结核个案定义,疑似结核个案 有呈现结核病征与症状(低

2、烧、全身乏力或消瘦、夜间盗汗、女性可导致月经不调或停经) 长期咳嗽超过2周 确诊结核个案 结核菌培养阳性的病人 不能有例行培养结核菌的国家,痰涂片耐酸染色结果两次都呈阳性,亦可考虑为确诊病人,6,一般临床结核检测方法,1.结核的常规检测 2.Y-干扰素 检测技术 3.T-SPOT.TB检测技术 4.GeneXpert检测技术,7,1.常规检测检测,8,2.Y-干扰素,原理:利用T细胞对结核菌的记憶,加入结核菌抗原,产生干扰素的多寡.判定是否为潜伏感染者.,缺 点,检测标本:血液(目前WTO已禁止使用血液标本检测),收费标准:500-800元,适用于高危险人群检测.不宜用于普查.,操作复雜.需要

3、专业人员及设备.,9,3.T-SPOT.TB(体外酶联免疫斑点技术),缺点,操作复杂繁琐,收费价格:500-800元,三甲大型实验室操作,10,4.GeneXpert检测技术,原理:分子生物检测技术,缺点,目前普及范围小,收费标准:约500元,配合仪器使用,仪器需约100万元,11,检出率低、费用低,检出率高、费用高,费用低、检出率高,12,结核检测新技术,结核菌分泌蛋白抗原快速检测试剂,13,结核菌分泌蛋白抗原快速检测试剂(胶体金法),是利用重组基因的技术制造结核菌的特异性蛋 白(抗体),纯 化后包被吸附于胶体金上,检测时,当样品有结核菌分泌性蛋白时,先和包被的胶体金标记物结合,产生反应。由

4、于层析作用,其反应复合物会沿着硝酸纤维膜向前移动。,原 理,81%,敏感性,85.9%,特异性,14,痰液检测结核杆菌 染色与TB抗原快速检测试剂之比较,痰液耐酸性染色,結核分枝桿菌 +,非結核分枝桿菌 +,培養確認,固態觀看 PCR 全自動化培養儀,結核分枝桿菌 +,非結核分枝桿菌 -,痰液(未經處理),結核分枝桿菌+,非結核分枝桿菌 -,培養確認,樣品緩衝液,結核分枝桿菌 +,非結核分枝桿菌 -,濟南杏恩 結核菌檢測試劑盒,濟南杏恩 結核菌檢測試劑盒,15,結核菌快速金標檢測試劑盒 簡易操作步驟,16,17,优势,检测结核菌分枝杆菌之特异性分泌性抗原 (Secreted specific

5、protein ) 可取代耐酸染色无法区别分枝(MTB)或非分枝结核(NTM)杆菌之困扰. 取代现行的非特异性纯化蛋白抗原 (PPD, purified protein derivative). 无交叉反应 ,故也适用于BCG接种的病人或感染非结核之病人. 高特异性及敏感度.(80%),18,可做非肺部结核病检验 建立一个快速且精确的检验方法(5-15分钟判读结果) 广泛用于一般人群普查(早期诊断,早期治疗) 可做为培养确认试剂是否为结核分枝杆菌(MTB)或非结核分枝杆菌(NTM)之区别 评价结核临床疗效及治疗方案 定位:筛查,优势,19,注意事項,服药治疗的结核病人, 可能会因为药物抑制蛋白分泌, 所以成阴性結果. 若是药物治疗的結核病人,进行疗程中追踪检测,成阳性反应. 应考虑可能为抗药性病患. 对于痰液的检测, 必須使用未处理的原痰, 加入试剂盒中的样品缓冲液后方可检测. 若是使用高浓度及高碱性的 NaOH 软化痰液, 则将破坏试纸条中的包被抗体和胶体金, 导致错误結果. 试剂盒中的样品缓冲液可以破坏菌体的蛋白酶, 使菌体失活, 但是不影响试验結果及检测.,20,胶体金免疫数字测试卡,21,HR201全自动金标分析仪,特点: 定性和模拟定量检测

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