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文档简介
基因组DNA的提取,原 理,细胞裂解液裂解组织匀浆,蛋白酶去除DNA结合蛋白,RNase去除RNA,饱和酚、酚/氯仿纯化DNA,无水乙醇沉淀获得DNA,DNA溶解于TE溶液,70%乙醇洗涤DNA、干燥,琼脂糖凝胶电泳鉴定,实验步骤,1、小鼠颈椎脱臼处死，取绿豆大肝组织，放入匀浆器，加入10倍体积TE于冰浴中匀浆后，分装至1.5ml EP管中（400l/支）。 2、加入10% SDS至终浓度为0.5%（20 l）。 3、加入RNase A (10mg/ml)至终浓度为20 g/ml（1 l）混匀，置37水浴60min。,4、加入蛋白酶K（20mg/ml）至终浓度为100g/ml (2 l)混匀，55 水浴2小时。 5、冷却至室温，加等体积饱和酚（450 l）充分颠倒混匀，12000rpm离心5min。 6、吸取上层水相移至另一干净EP管中，加入等体积酚/氯仿，颠倒混匀，12000rpm离心5min。,7、吸取上清移至另一干净EP管中，加入0.2倍体积5M KAc和2倍体积冷无水乙醇混匀，静置5分钟，12000rpm离心5min。 8、弃上清，用0.5ml 70% 乙醇洗涤DNA，弃上清，倒置干燥。 9、 加入10 l TE溶解DNA。 10、加入2 l 6loadi
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