DB32T 3863-2020 甘薯茎线虫病抗性鉴定技术规程

1、ICS65.020.01B23DB32江苏省地方标准DB 32/ T 38632020甘薯抗茎线虫病鉴定技术规程Technical regulation for evaluation on sweetpotato resistance to stem nematode disease 2020 - 10 - 13发布2020 - 11 - 13实施江苏省市场监督管理局发布DB32/T 3863-2020前言本标准按照GB/T 1.12009给出的规则起草。本标准由江苏徐州甘薯研究中心提出。本标准有江苏省农作物标准化技术委员会归口。本标准起草单位：江苏徐州甘薯研究中心。本标准起草人：孙厚俊、谢逸

2、萍、张成玲、杨冬静、徐振、赵永强、马居奎、谢睿寰、唐伟、孙井康。4甘薯抗茎线虫病鉴定技术规程1 范围本标准规定了甘薯品种（系）对茎线虫病抗性鉴定的鉴定方法、抗性评价标准和鉴定记载表格。本标准适用于甘薯品种（系）对茎线虫病抗病性的田间自然诱发鉴定和室内接种鉴定。2 规范性引用标准下列文件对于本文件的应用是必不可少的。凡是注日期的引用文件，仅注日期的版本适用于本文件。凡是不注日期的引用文件，其最新版本（包括所有的修改单）适用于本文件。GB 4406 种薯GB 7413 甘薯种苗产地检疫规程3 术语和定义下列术语和定义适用于本文件。3.1感病对照品种 susceptible control vari

3、ety为检验试验的可靠性，在品种抗病性鉴定时附加的已知抗性为感病的品种，本标准中感病对照品种为栗子香。3.2人工接种鉴定 evaluation of artificial inoculation用人工繁殖或收集病原线虫，按一定量接种，创造发病条件，根据茎线虫病发病程度确定品种抗病性。3.3高温愈合 heat treated to wound healing在甘薯入窖初期，采用人工加温方法促进伤口迅速愈合的一种措施。3.4相对病情指数 将供试品种（系）的病情指数与高感对照病情指数进行比较，经过公式计算而换算出的病情指数。 3.5体积比 人工接种鉴定时茎线虫侵染的体积与薯块体积的比值。4 鉴定方法

4、4.1 自然诱发鉴定4.1.1 病圃选择选择排灌方便，肥力中等，甘薯茎线虫病发生较重且均匀的田块作为鉴定圃。4.1.2 薯苗准备将符合GB 4406要求的种薯在无病苗床排种育苗，将待鉴定品种薯苗离苗床土层3 cm5 cm剪下，长度20 cm25 cm。外寄鉴定材料应按照GB 7413要求进行检疫。每品种剪取三组薯苗，每组6株8株，按名单编号分别挂上名称、编号、试验重复的牌子，备用。4.1.3 栽种及管理5月上中旬起垄栽种，垄宽75 cm85 cm，每垄划分成不同的小区，小区之间留隔离部分50 cm。采用“Z”字形方式栽种，试验设3次重复，随机区组排列，每重复供试品种（系）6株8株，株距23 c

5、m25 cm，选用栗子香为高感对照品种，每隔10个鉴定品种（系）栽种栗子香一垄，栽种后正常管理。4.1.4 病情调查与分级10月中旬进行调查薯块发病情况。人工将薯块刨出，用刀将薯块横切两刀，目测线虫侵染的面积，根据侵染横截面积进行分级，每个薯块均需调查，记载发病情况。分级标准如下： 0级：无病； 1级：0%为害面积占薯块横切面积比率25%； 3级：25%为害面积占薯块横切面积比率50%； 5级：50%为害面积占薯块横切面积比率75%； 7级：75%为害面积占薯块横切面积比率100%。4.1.5 病情指数及防治效果计算依据病情调查情况，按式（1）计算病情指数。 DI=（Nii）M7100（1）式

6、中： DI-病情指数； Ni-第i病害级别的薯块数； i -为害级别值； M- 调查的总薯块数。依据病情指数结果，按式（2）计算相对病情指数。相对病情指数=对照病情指数-供试品种病情指数对照病情指数100（2） 相对病情指数精确至0.1，对照品种病情指数为鉴定圃中所有对照的平均病情指数。4.1.6 鉴定有效性判断田间鉴定对照品种的平均病情指数大于60，鉴定结果判定有效。4.2 室内接种鉴定4.2.1 病原线虫分离及消毒人工采集病薯块，采用贝曼漏斗法分离线虫。将分离好的线虫用400目筛网过滤，筛网内收集线虫，用灭菌水冲洗3次，放入0.1%青霉素+0.1%链霉素的消毒液中，4 环境放置12 h，用

7、400目筛网过滤，灭菌水冲洗3次，灭菌水配成200条/ml的线虫悬浮液备用。4.2.2 鉴定材料准备选用大小300 g400 g薯块作为鉴定用薯块，每个供试品种（系）选3块，洗净晾干后编号备用。选用栗子香为高感对照品种。鉴定薯块随机或顺序排列在80 cm40 cm的塑料筐内，每筐放置对照品种薯块2个3个，每份鉴定材料重复3次，每重复2个薯块。接种前用75%酒精对薯块表面进行消毒处理。4.2.3 接种材料接种时需要5 mm螺纹打孔器，12 cm玻璃培养皿若干套，手术刀、手术镊各1把，1 ml移液枪一支及枪头若干，酒精灯1只，电磁搅拌器1台。将打孔器、培养皿、烧杯、手术刀、手术镊灭菌后备用。4.2

8、.4 接种方法用打孔器垂直在薯块中部打孔，深度至薯块中下部，用移液枪将1 ml配好的线虫悬浮液加入孔中，将打出的薯条切除下方1.5 cm，再用剩余薯条封住孔口，用融化的石蜡密封孔口缝隙，放入用75%酒精消毒过的塑料筐内。接种后将筐置于26 28 鉴定室内保湿培养。线虫悬浮液应处于搅拌状态，且每打孔一个薯块后打孔器需用酒精灯消毒。4.2.5 病情调查 接种后45 d调查薯块发病情况。先将薯块沿打孔部位横切，分别量取横切面薯块直径和线虫侵染直径，再将薯块沿中心纵切，量取薯块纵切面的薯块长度和线虫侵染长度。4.2.6 发病体积比计算依据病情调查结果，按式（3）计算茎线虫病发病体积比：发病体积比=病斑

9、直径2病斑长度薯块直径2薯块长度100%（3）按式（4）计算相对比：相对体积比=对照体积比-处理体积比对照体积比100%（4） 品种（系）体积比精确至0.1%。5 抗性评价标准5.1 自然诱发鉴定评价标准根据相对病情指数评价甘薯茎线虫病抗侵入性，将甘薯品种（系）划分为免疫、高抗、中抗、高感，4个类型，评定标准如下： 免疫：相对病情指数为100； 高抗：70相对病情指数100； 中抗：30相对病情指数70； 高感：0相对病情指数30。5.2 室内接种鉴定评价标准根据品种（系）侵染比评价甘薯茎线虫病抗扩展性，将甘薯品种（系）划分为免疫、高抗、中抗、高感，4个类型，评定标准如下： 免疫：相对体积比100% 高抗：70%相对体积比100%； 中抗：30%相对体积比70%； 高感：0相对体积比30%。6 鉴定记载表格甘薯抗茎线虫病鉴定记载表格见表1和表2。表1 甘薯抗茎线虫病鉴定记载表（自然诱发鉴定）编号品种（系名称）重复