第二章红细胞血型系统

第一章红细胞血型系统,程卫英QQ：545843808,目 录,第一节红细胞血型免疫学基础第二节ABO血型系统第三节H血型系统及Lewis血型系统第四节Rh血型系统第五节其他血型系统,第一节 红细胞血型免疫学基础,重点提示,红细胞抗原、抗体概念红细胞抗原、抗体特性红细胞抗原、抗体分类红细胞抗原抗体反应特点及其影响因素,抗原（Ag）,定义：是指能够刺激机体免疫系统产生免疫应答的物质，并能与相应的免疫应答产物在体内或体外发生特异性反应。免疫原性- Ag刺激机体使之产生抗体或致敏淋巴细胞。 反应原性-能与相应抗体或致敏的淋巴细胞发生特异性结合。,抗原（Ag）,分类：根据性质-完全Ag：免疫原性+反应原性 半Ag：反应原性与人类关系-同种Ag：人类个体之间自身Ag：个体本身 异种Ag：不同种属之间,抗原决定簇,定义：是呈立体排列的特殊化学基团，每一抗原可以有多个抗原决定簇（表位）。大多数存在于抗原表面。是抗原特异性的基础。糖分子的血型抗原：ABO、Lweis等多肽的血型抗原：Rh、MN等,抗体（Ab）,定义：是机体受到血型抗原刺激后，B细胞被活化、增殖分化为浆细胞，产生能与相应抗原特异性结合、并引起免疫反应的免疫球蛋白，免疫球蛋白广泛存在于血液及体液中。抗体都是免疫球蛋白(Ig)，但免疫球蛋白不一定都是抗体。 血型抗体主要是IgG和IgM。免疫球蛋白：是由浆细胞合成与分泌的，每种细胞克隆可以产生一种特异性抗体分子。,IgG结构,单体 (7S),IgM结构,五聚体 (19S)区域大 (CH4)J 链,抗原抗体反应特点,高度特异性：最主要的特点 可逆性：抗原抗体为非共价键结合，具有相对稳定性，在某种条件下可以解离，如热放散、乙醚放散等。 比例：抗体浓度过低 增加血清量 抗体浓度过高 前带现象,影响凝集反应的因素,温度：多数抗体有温度范围限制。 温度过高AgAb变性,过低降低生物活性IgM：427抗体活性较好。IgG：37抗体活性较好。 抗体检测程序可在不同温度下进行。冷抗体在37出现，多数无临床意义，即在体内不能缩短输入红细胞的寿命。,影响凝集反应的因素,离子强度：低离子强度反应介质能增加抗体附着速度和抗体连接数量，减少常规抗体检测中所要求的孵育时间。低离子强度可减少红细胞周围阳离子云，使带负电荷红细胞与带正电荷IgG充分反应。pH值：多数有临床意义的抗体最适pH还没有被最终确认。一般认为接近于生理pH。如抗D为6.57.0。特殊的如抗M为5.5。,影响凝集反应的因素,孵育时间：血型抗体不同，AgAb结合达到平衡时间也不同。所需时间视免疫球蛋白类型及反应条件而定。 显著性变量有免疫球蛋白类型、抗原构型与抗体Fab位点特异性相互作用。多数有临床意义抗体在37孵育30min。低活性抗体或抗原在30min内达不到平衡，可适当延长孵育时间；低离子溶液可减少孵育时间； 酶介质试验延长时间，可出现非特异性凝集。,第二节 ABO血型系统,最具有临床意义的血型系ABO血型系统Rh血型系统,ABO血型系统的发现,1900年Karl Landsteiner首先发现了人类红细胞的同种凝集现象，随后发现了人类第一个血型系统ABO血型。开创了免疫血液学研究和临床应用新纪元。 为常规血型鉴定方法的确立与发展奠定了基础。,ABO血型系统的独特性质,Landsteiner原则：红细胞上如果缺乏某种抗原，血清中则存在相应抗体。规则抗体。组织抗原：许多组织细胞上有规律地存在着A、B、H抗原（消化道、呼吸道、泌尿系统上皮细胞）以及分泌型人的分泌液（唾液、眼泪、尿液、消化液、胆汁、乳液、羊水、卵巢囊肿液、腹水等）中存在着A、B、H血型物质。,ABO血型的定型原则,凡红细胞上具有A抗原者为A型，有B抗原者为B型，A抗原和B抗原均无者为O型, A抗原和B抗原均有者为AB型。,ABO血型抗原,ABO血型基因位于第九对染色体。A基因和B基因编码的糖基转移酶，分别产生形成A抗原和B抗原的糖分子。O型人红细胞缺乏A抗原和B抗原，但带有大量H抗原，H抗原是A抗原和B抗原的前体物质。,N-乙酰葡萄糖胺,N-乙酰半乳糖胺,D-半乳糖,L-岩藻糖,L-岩藻糖,N-乙酰半乳糖胺,N-乙酰葡萄糖胺D-半乳糖,ABO抗原发育,在胚胎早期A抗原和B抗原就开始产生，到出生时，其抗原数目大约是成人2550%，与抗A和抗B试剂血清反应比成人弱，18个月后才能充分表现出抗原性。,ABO血型抗体,存在于缺少相应抗原的人血清中。新生儿ABO抗体很少；无抗体成人罕见。天然抗体：无明确的免疫途径所产生的抗体。有IgM类（主要是A和B型）和IgG类（主要是O型）。IgM可被唾液中血型物质中和。O型-抗A,B：识别A抗原和B抗原表位共同的结构部分，具有交叉反应性。,ABO抗体的发育,出生时正常的抗-A抗-B还没产生或较弱。 3个月左右开始发育。 56岁时具有较高效价。 老年人抗体水平一般低于年轻人。,ABO血型的亚型,ABO亚型的红细胞同属于一种血型抗原，但在结构上有细微差异，性能也不完全相同，由于抗原弱在用已知抗体检测抗原和用已知抗原检测血清抗体时，部分不符合ABO血型正反定型特点。例A亚型：A抗原减少，与抗A凝集强度减弱，H抗原活性明显增强。,A1与A2的区别,A1及A2红细胞与抗A试剂凝集反应结果均很强，凝集反应强度差别不明显。其血清学区别主要依据双花扁豆（Dolichos biflous)种子提取液制备的抗A1与红细胞的反应来确认。在相同试验条件下，抗A1能凝集A1红细胞而不能凝集A2红细胞。,其他亚型的特点,A3和B3：最大血清学特征是混合凝集外观。Ax 和Bx：与抗-A或抗-B标准血清凝集很弱，但与抗-A,B凝集反应增强。Am 和Bm：与抗-A或抗-B标准血清不出现凝集反应。,几种A亚型红细胞上的A抗原,cisAB,双亲中一人为O型，一人为AB型。A基因和B基因位于同一条染色体上。两个基因可同时继承和同时遗传。A抗原强度强于A2B，弱于A1B。B抗原弱，类似B3表型。H抗原性很强。,ABO血型遗传,ABO血型的遗传为复等位基因显性遗传，其遗传原则为：ABO血型是由两个遗传基因结合而成。遗传时绝大多数情况下，这两个遗传基因必然分开。,ABO血型遗传,ABO血型遗传学意义,诊断和预防由于母婴血型不合而引起的新生儿溶血病。组织和器官移植时需血型鉴定和配型。疑难血型鉴定时家系分析。人类学研究。,第三节 H及Lewis血型系统,H血型系统,本系统只有1个H抗原（H1）。 除了罕见的孟买血型（Oh）外，所有人红细胞表面都表达H抗原。H抗原是A抗原和B抗原的前体物质，只有H抗原无AB抗原的红细胞是O型红细胞。红细胞H抗原数量与ABO血型相关，O型红细胞H抗原数量最多，而A型、B型红细胞上的H抗原绝大部分已被转化，H抗原较弱。,孟买血型,非常少见。缺乏H基因（基因为hh）和分泌基因（基因为sese），不能形成H物质。与抗-A，抗-B，抗-H无凝集反应，正定型易误作O型。血清含抗-A、抗-B、抗-H，反定型与ABO细胞均出现凝集反应。只能输相同血型人的血液。,类孟买型,缺乏H基因，其基因为hh，至少有一个Se基因。虽然不能检测出红细胞表面H抗原，但有少量的A和/B抗原，记为Ah、Bh、ABh。正定型被检红细胞与抗-H无凝集反应，与抗-A、抗-B弱凝集反应，甚至用吸收放散试验才能检出A和/B抗原。类孟买型分泌液及血浆中含有型链A和（或）B血型物质，红细胞从血浆中吸附A和/B抗原，从而表达微弱的A和/B抗原。唾液中含有少量的ABH物质。血液中存在抗-H/抗-HI、抗-A或抗-B。,Lewis血型系统,Lea 和 Leb 是Lewis系统主要的抗原,抗原的发生：Lewis 抗原不是由红细胞产生的,而是存在于血浆中。是从血浆中吸附到红细胞表面。这两种抗原的表达由Le基因控制，只要有一个Le基因，该个体就可表达Lewis抗原, 而le/le型的个体不表达Lewis抗原.Le基因 (FUT3 基因) 能产生一种糖基转移酶,将L-岩藻糖结合到前体链的次末端GlcNAc上，形成Lea抗原。,Lewis 抗原,人类出生时Le 抗原缺失或极其微弱。脐带血样本主要 是Le(a-b-)。如果有Le及Se基因，则出生10天后RBC为Le(a+b-), 1218个月为Le(a+b+), 2或3岁为Le(a-b+)。Lewis 定型不能作为婴儿亲子鉴定的依据。,Lewis 抗原,妊娠期间Lewis 抗原变化。妊娠期间Lewis抗原量下降。孕妇可一过性出现Le(a-b-) ，可能产生Lewis抗体。生产后,随着正常Lewis表型的恢复,抗体逐渐消失。,Lewis 抗体,大多数是IgM，室温下表现明显凝集反应,甚至由于反定型细胞表达Lewis抗原，易导致ABO血型定型错误。Lewis 抗体只产生于Le(a-b-)个体的血清中 ,一般是自然产生的天然抗体。红细胞表型为Le(a-b+)者不产生Lea抗体, 因为唾液和血浆中含有少量的Lea.。常见抗-Lea , 抗-Leb发现少见。,Lewis 抗体,在Le(a-b-)个体的血清中容易同时发现抗-Lea和抗-Leb 。大多在室温下反应性良好,在37也可以观察到反应但是弱于室温反应。使用间接抗人球蛋白试验有时可检出IgG抗体，凝集反应可能更弱。Lewis抗体在体外可被血浆中可溶性的Lewis物质中和。由于 Lewis抗体不能通过胎盘，并且出生时Lewis抗原发育较差, 所以此抗体不会引起新生儿溶血病。,Lewis血型系统与输血,Lewis 抗原容易被红细胞膜吸附或者从膜上洗脱，输入的红细胞在进入血液循环几天之内可能会出现受血者的Lewis表型。受血者血浆中的Lewis抗体容易被供血者血浆中的Lewis血型物质中和。所以Lewis抗体极少在体内引起溶血。,在输血或交叉配血之前没有必要检测供血者是否具有Lewis抗原。因为与供者交叉配血相合就保证了输血的安全性。如果37或抗球蛋白法配血不合,应重新选择。,第四节 Rh血型系统,Rh血型系统,1939年Levine和Stetsen在一生产死胎的妇女血清中检测到的抗体，是人类发现的第一例Rh抗体。临床意义仅次于ABO血型系统。,Rh血型系统抗原,至今已发现Rh血型系统的抗原50余个。最具有临床意义的有5个，即D、C、c、 E、e及其相应的特异性抗体。Rh抗原只存在于红细胞膜，不存在于其他组织细胞膜上或体液中。,Rh血型系统抗原,Rh抗原的发育胎儿早期就开始发育并维持一生，脐带血或新生儿红细胞其Rh抗原性与成人相同。Rh血型抗原的免疫原性抗原强度仅次于A抗原和B抗原。Rh血型抗原中的免疫原性顺序 DE c C e。Rh抗原均显示剂量效应。,Rh血型阳性和阴性判定,根据红细胞上D抗原的有无可将人类红细胞分为Rh阳性和Rh阴性，即红细胞上缺乏D抗原的人是Rh阴性；红细胞有D抗原的人是Rh阳性。Rh阴性分布频率：白种人1520% 中国汉族约0.34%,RhD抗原,D：正常D抗原。弱D(weak D)：抗原数量少，抗原决定簇质量正常。不完全D(partial D)：抗原数目基本正常，缺少部分D抗原决定簇。增强性D：抗原数量增加，抗原性增强。,Rh抗体,大部分是IgG类抗体，通常情况下，用盐水法不与Rh阳性红细胞（-D-红细胞例外）出现凝集反应。偶尔有抗D及抗E血清含有IgM类抗体，室温能凝集相应抗原阳性红细胞，但通常伴有IgG类抗体。IgA性质的抗D十分罕见，并且只混合在IgG类抗体的血清中。,Rh抗体的产生,非免疫性Rh抗体极为罕见，Rh抗体主要通过输血或妊娠等免疫途径产生。一般初次免疫后26个月内出现抗体，经再次免疫后，3周内其水平可达到高峰。大约1/3的Rh阴性者，经Rh阳性抗原免疫后，不产生抗D。Rh阴性血输给阳性者不产生抗体。,Rh抗体临床意义,溶血性输血反应：受血者血浆中如有Rh抗体，输入含有相应抗原的血液后，将引起溶血性输血反应，严重者可导致死亡。新生儿溶血病：血液中含有Rh抗体的孕妇，如果Rh血型与胎儿不合，其中IgG类抗体可以通过胎盘进入胎儿体内，破坏胎儿红细胞，引起新生儿溶血病。Rh抗体具有十分重要的临床意义。,第五节 其它血型系统,概述,除了ABO、Rh血型抗原，人类红细胞上还可以检测到许多其它抗原。到目前为止ISBT发布红细胞血型系统共33个。大多数人的某个细胞系都表达的抗原称为高频抗原；极少数人群携带的抗原称为低频抗原或稀有抗原。许多血型抗原最初都是通过检测血清中的特异性抗体发现的。,概述,了解其它血型抗体血清学特点，有助于抗体鉴定。应重视：血型抗原与血型抗体的反应特点。综合考虑：抗体反应温度、抗体类型、新生儿溶血病和/溶血性输血反应的严重程度、疾病诊断等。,MN血型系统,多见抗M：干扰实验结果 抗M较常见，多数人无输血史，天然抗体。降低pH值可增强抗M的反应性。 抗M多为IgM类, 偶有部分IgG类，甚至全部为IgG抗体。M抗原在红细胞表面分布密集，即使IgG 抗体也可在盐水介质中出现凝集。 抗M一般无临床意义，但37或间接抗球蛋白试验出现凝集反应者，可能有一定意义。大多数与新生儿溶血病或溶血性输血反应