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文档简介

第 11讲 免疫学检测技术的基本原理免疫学检测方法:依据 免疫学理论 设计的 测定抗原、抗体、免疫细胞及细胞因子的 实验方法 。 一、基本原理抗原与相应抗体特异性结合,并呈现某种反应现象,如凝集或沉淀,以此检测抗原或抗体。抗原抗体反应的特点 1.抗原抗体结合的特异性 抗原抗体结合除 空间构型 互补外,还以 氢键 、静电引力 、范 德华力 和 疏水键 等非共价方式结合, 一定条件下 复合物可 解离 成游离状态,且仍 保持原有性质 。 2.抗原抗体结合的可逆性 复合物 解离度 主要取决于特异性抗体 超变区与相应 抗原表位 三维空间构型的 互补程度 ,互补程度越高,分子间距越小,作用力越大,两者结合越牢固,不易解离;反之,则容易发生解离。 3.抗原抗体结合的比例与浓度 抗原与抗体结合 比例合适 ,则可形成肉眼可见的 大结合物 ;反之形成肉眼不可见 的 小结合物。 4.抗原抗体反应的阶段性 第二阶段: 可见反应阶段。数分钟、数小时至数日,因素影响多。 第一阶段: 特异结合阶段。仅几秒到几分钟、尚无可见反应;抗原抗体反应的主要影响因素抗原抗体反应的主要影响因素1.抗原和抗体浓度、比例抗原和抗体浓度、比例2.电解质电解质3.温度温度 4.酸碱度酸碱度二、血清学反应的种类二、血清学反应的种类 1.凝集反应凝集反应细菌、细胞等 颗粒性抗原 与 相应的抗体 ,或表面 包被抗原 的颗粒状物质与 相应的抗体 在电解质存在的条件下结合,出现肉眼可见 的 凝集团 现象。 2.沉淀反应沉淀反应毒素、组织浸液以及血清中的蛋白等可溶性抗原 与 相应抗体 反应后,出现肉眼可见 的 沉淀物 。3.免疫标记技术免疫标记技术用用 酶、荧光素、同位素酶、荧光素、同位素 等物质等物质 标记标记抗体或抗原进行抗原抗体反应,检抗体或抗原进行抗原抗体反应,检测测 抗原或抗体抗原或抗体 的技术。的技术。如免疫酶技术、免疫荧光技术、如免疫酶技术、免疫荧光技术、放射免疫测定。放射免疫测定。第一抗体第一抗体 抗原抗原第一抗体第一抗体 抗原抗原 第二抗体第二抗体生物酶生物酶第一抗体第一抗体 抗抗原原 -第二抗体第二抗体显色免疫细胞的检测:检测 T细胞、 B细胞和吞噬细胞等。第 12讲 免疫学防治 这部分是 “国防建设 ”。免疫学防治:应用免疫学理论预防和治疗疾病,包括免疫预防和免疫治疗。一、免疫预防一、免疫预防1.疫苗基本要求:安全、有效、实用疫苗应用:抗感染、抗肿瘤、计划生育防止免疫病理损伤 死疫苗与活疫苗细菌外毒素经 0.3-0.4%甲醛处理,使其毒性减弱而保留其免疫原性。 亚单位疫苗。 合成肽疫苗 基因工程疫苗 类毒素( Toxid) 新型疫苗人工主动免疫 :给机体接种 抗原性物质 如疫苗,类毒素等,刺激 机体免疫系统 产生特异性免疫力 的方法。2.人工主动免疫和人工被动免疫人工被动免

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