黄芩苷在大鼠肝微粒体ⅱ相代谢研究

-精选财经经济类资料- -最新财经经济资料-感谢阅读- 1 黄芩苷在大鼠肝微粒体相代谢研 究 【摘要】葡醛酸化代谢是中药成 分体内重要的代谢途径。黄芩苷为多酚 类化合物，具有多个羟基，在大鼠肝微 粒体能够生成葡醛酸化代谢产物，酶动 力学符合米氏酶动力学过程，Km 和 Vmax 分别为 101M、1371 pmol/min/mg protein。 中国论文网 /1/view-13038228.htm 【关键词】黄芩苷；相代谢； 大鼠微粒体 【中图分类号】R285 【文献标 识码】A 【文章编号 】2095- 6851（2017）07-01 尿苷二磷酸葡萄糖醛酸转移酶 -精选财经经济类资料- -最新财经经济资料-感谢阅读- 2 （UGT ） 是化学物质和中药成分在生 物体内进行第相生物转化时最重要的 一种酶。该酶能催化葡萄糖醛酸与大量 的内源性和外源性化学物质进行葡萄糖 醛酸结合反应，是药物在体内重要的解 毒途径。阐明中药成分的代谢变化对指 导临床合理用药很有意义。 黄芩（Scutellariae Radix）榇 叫慰浦参锘栖耍Scutellariae baicalensis Georgi）的干燥根，具有“ 清 热燥湿，泻火解毒，止血，安胎”功效， 临床上单用或与其他中药配伍使用，如 我院常用的院内制剂芩茜止血颗粒中主 要中药就为黄芩1。黄芩苷是黄芩中最 主要的有效黄酮类成分，具有多种药理 作用2。已有研究表明，黄芩苷为多酚 类化合物，具有多个羟基，易发生相 代谢结合反应3，其在体内的葡醛酸化 是主要的代谢途径之一。目前关于黄芩 苷在大鼠肝微粒体的相代谢变化未见 报道。 1.材料 -精选财经经济类资料- -最新财经经济资料-感谢阅读- 3 WatersAlliance 高效液相色谱系 统。美国 Finnigan 公司 LCQ 离子阱型 质谱仪。黄芩苷购自中国药品生物制品 检定所；大鼠肝微粒体购自瑞德肝脏 （上海） ；甲醇购自 Sigma 公司；超纯 水由 MilliporeMilli-Q 纯水仪制备；其 他试剂为分析纯。 2.方法 2.1 黄芩苷葡醛酸化产物测定条 件色谱条件 ThermoC18 柱 （2504.6mm，5m） ，流动相：A（0.1%磷 酸）和 B（甲醇） ，等度洗脱：50%B。 流速：1ml/min，柱温：40，检测波 长：277nm，进样量：10L。 2.2 代谢稳定性研究 将磷酸盐缓冲液、MgCl2、大鼠 肝微粒体、水解酶抑制剂和黄芩苷药液 混合，37振荡水浴中预孵育 5min， 加入 UDPGA 启动反应，37振荡水浴 中孵育，在 30min 时取样，同时做空白、 灭活、及无 UDPGA 样品，通过 HPLC -精选财经经济类资料- -最新财经经济资料-感谢阅读- 4 比较上述几种样品找出可能的代谢产物， 并通过 LCQ 离子阱型质谱仪确定分子 量。 2.3 黄芩苷葡醛酸化代谢动力学 研究 在肝微粒体温孵液中分别加入不 同浓度黄芩苷标准液，使黄芩苷的浓度 为 1-300M，经 37水浴温孵振荡 30min 后，应用 GraphPadPrism4.0 软件 对代谢产物生成速率与底物浓度进行非 线性拟合，计算酶动力学参数米氏常数 （Km）及最大反应速度（Vmax） 。 3.结果 3.1 代谢稳定性结果 通过比较可以发现孵育 30min 后 与阴性对照相比出现了 1 个新的色谱峰， 经 LC-MS/MS 分析确定其分子量均为 623，比原药的高 176Da，主要二级碎 片离子为 m/z447（-176Da） 。说明黄芩 苷在大鼠肝微粒体中能够发生葡萄糖醛 酸化代谢。 3.2 黄芩苷葡醛酸化酶动力学结 -精选财经经济类资料- -最新财经经济资料-感谢阅读- 5 果 黄芩苷（浓度 1-300M）在大鼠 肝微粒体中葡醛酸化代谢产物酶动力学 符合米氏酶动力学过程。Km 和 Vmax 分别为 101M、1371pmol/min/mgprotein。 4.讨论 葡萄糖醛酸化是黄酮类化合物的 重要代谢途径4，其原因是酚类和羧酸 类化合物易于葡萄糖结合，而黄酮类化 合物