γ谷氨酰转肽酶(ggt) 速率法

项 目 谷氨酰转肽酶（ GGT） 方 法 速率法 目 录 1. 检测原理 2. 标本采集与处理 2.1 受检者的准备 2.2 静脉采血 2.3 抗凝剂 2.4 标本处理 3. 试剂 3.1 试剂 3.2 校准血清 3.3 试剂的稳定性 4. 仪器 5. 操作 6. 计算 7. 操作性能 7.1 精密度 7.2 准确度 7.3 灵敏度 7.4 可报告范围 7.5 特异性 7.6 干扰 8. 参考值 9. 临床意义 附录 A: 参数 1. 检测原理 r-谷氨酰对硝基苯胺和双甘肽在 r-谷氨酰转肽酶作用下，生成对硝基苯胺及 r-谷氨酰双甘肽，所释放 出的对硝基苯胺与 r-谷氨酰转肽酶活力成正比，通过在 405nm 处测定对硝基苯胺的变化，可求出 r-谷氨 酰转肽酶活力。 r-GT r-谷氨酰-3 羧基-对硝基苯胺 + 双甘肽 - 对硝基苯胺 + r-谷氨酰双甘肽+ 2. 标本采集与处理 2.1 受检者的准备： 病人空腹 12h，不饮酒 24h 后采集血样。体检对象抽血前应有两周的的正常状况记录。注意有无应用 影响测试项目的药物。此外，对于体检者，采血的季节都应做相关记录，因为样本中各项目的含量有季节 性变动，为了前后比较应在每年同一季节检验。应嘱体检对象在抽血前 24 小时内不做剧烈运动。 2.2 静脉采血： 除非是卧床的病人，一般在采血时取坐位。体位影响水分在血管内外的分布，会影响测试项目的浓度 。在采血前至少应静坐 5 分钟，一般从肘静脉取血，使用止血带的时间不超过 1 分钟，穿刺成功后立即松 开止血带。 2.3 抗凝剂： 血浆使用肝素或 EDTANa2（1mg/mL）作为抗凝剂。 2.4 标本处理： 血标本室温放置 30min45min 后离心分离血清或血浆，在两小时内检测完毕；如两小时内不能检测 完毕，将离心分离血清或血浆置洁净试管加盖 2-8保存。 3试剂 3.1 试剂： 本科使用湖南永和阳光科技有限责任公司 GGT 试剂盒，为液体双试剂，各组分如下： 组 成 R1:R2=5:1 混合后溶液的浓度 R1: Tris 缓冲液: 100mmol/L PH=8.25 甘氨酰甘氨酸 150mmoll/L 稳定剂 R2: 起动液 r-谷氨酰-3 羧基-对硝基苯胺 2.9mmol/L 3.2：校准血清 使用湖南永和阳光科技有限责任公司提供的 40 项校准血清。 校准频次： 空白定标：每日需做试剂空白定标。 全点定标：试剂换批号使用时或质控结果超过规定的 2SD 范围，需要全点定标。 3.3 试剂的稳定性： 原包装试剂储存在 2-8至标签所示失效日期。 18-22 稳定 28 天，试剂应避免污染。当试剂空白吸光度高于 1.2 时，试剂按照失效处理。 多项校准血清在 2-8储存至标签所示失效日期，复溶后-20 保存，可稳定一个月，只可冻融一次， 避免反复冻融。参见校准血清说明书。 4仪器 KONELAB 30 型号仪器。 性能：波长 405nm，仪器测定吸光度的灵敏度应达到 0.001ABS 以上。 5操作 样品为血清或肝素/EDTA 抗凝血浆。本法为速率法。参数见后附，附录 A。 试剂参数设置、定标操作以及样本检测常规操作，见仪器操作规程。 6计算 A/minVt1000 GGT(U/L) = - = A/minF eVsd 式中：A/min 每分钟吸光度变化率； e 18.5 摩尔吸光系数； Vt 反应液总体积（ml）； d 1 比色杯光径（cm ）； 1000 变化因数； Vs 标本体积（ml）； 7操作性能 7.1 精密度： 批内 CV0.81%，批间 CV3.05%。 7.2 准确度： 检测结果的相对不准确度10%。 7.3 灵敏度： r-谷氨酰转肽酶浓度为：300U/L 时，吸光度变化率 A340nm/min 为 0.1260.154。 7.4 可报告范围： 血清与试剂用量之比为 1:24 时，测定上限为 500U/L。 7.5 特异性： 该方法测量值在给定值的 90%-110范围内。 7.6 干扰： 内源性干扰物溶血为 1000mg/ml、脂血 2000mg/ml、黄疸 30mg/ml、抗坏血酸 300mg/ml 对测试结 果无明显影响。 8参考值 男：1149U/L；女：732 U/L。 9临床意义 r-谷氨酰转肽酶是一种肽移换酶，它催化谷