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文档简介

第五章 病料的采集、保存与送检 第五章 病料的采集、保存与送检 n病理组织学检验材料的采集、 固定 n细菌学检验材料的采集、保存 n病毒学检验材料的采集、保存 n毒物检验材料的采集、保存 n各种病理检查病料的送检 一、概述 (一)“病料”的涵义 n狭义:用于疾病诊断的材料 n广义:动物科学、科研、实验等多方面 的材料。(动物生理、组织胚胎、药物 试验、疾病模型的建立与复制、动物营 养研究等) (二)正确采集、保存与送检病 料的重要性 n疾病诊断结果与正确正确采集、保存与 送检病料的关系 n科研结果与实验材料的正确采集、保存 与送检的关系 (三)病料的采集、保存与送检 三者之间的关系 n正确采集病料是保证正确结果的关键 n正确保存送检病料是获得正确结果的保 证 n三者均影响结果的正确性 (四)动物尸检技术在科研教 学中的重要作用 二、用于组织学检查病料的采 集、保存与送检 (一)病料的采集(取材) n取材应目的明确 n有病变的组织必取 n有目标时重点取 n目标不明确,全面取 n取材时间应尽早: 夏季不超过6小时,冬季不超过24小 时,立即固定 n取材部位典型(含病变、过渡、正常 组织)。组织结构完整(肾:被膜、 皮质、髓质;肠管:外膜、肌层、粘 膜) n取材大小及数量:以1.5-2cm1.5- 2cm0.3-0.5cm为好 n特殊组织取材: n柔软易变形组织:肠系膜、神经干 n扩张变薄的囊腔器官:肠、膀胱、胆囊等 n体积微小的器官:大、小鼠的垂体、视神经 n含气易漂浮的组织:肺脏 n液体状病料:血液、脓汁、渗出液(浓缩、涂 片) n防人为病变,取材用具要快,动作要轻,忌挤压 (二)病料的保存(固定) n固定的作用 n固定液的选择 n固定的时间 n固定容器及固定液的量 n固定温度 常用固定液的配制举例 n10福尔马林溶液:主要用于脂肪、 神经、及糖原的保存 n酒精:80-90为好,具有硬化、固定 、脱水作用 nA.F液:无水酒精或95酒精90ml, 40甲醛10ml。具有固定兼脱水作用 ,直接进入95酒精 nBouin液:苦味酸饱和水溶液75ml, 40甲醛水溶液25ml,冰醋酸5ml nCaroys液:无水酒精60ml,冰醋 酸10ml,氯仿30ml。适于糖原及尼 氏小体固定,显示DNA和RNA效果 很好。 (三)病料的送检 n及时: n新鲜病料:4小时内能运到 n已固定病料:密封,防震措施 n附送检单及说明 n专人送检 三、用于微生物检查的材料的采集、保 存与送检(细菌学、病毒学) v 微生物检查材料的特点:无菌、无污染 (一)病料的采集(取材) n实质脏器的取材:烧烙法灭菌 n液体病料的取材(血液、胆汁、渗出物、脓 汁等,烧烙包膜表面,灭菌注射器吸取,涂 片! n全血:抗凝血(无菌采取静脉血) v抗凝剂: n4枸櫞酸钠 0.1ml抗凝1ml血 n20枸櫞酸钠或是10EDTANa,2-3滴抗凝5ml血液 n肝素:1-2mg抗凝1ml血液,多用于病毒检查 n血清:自然凝固析出或是离心处理 (快速) n肠内容物:烧烙表面,吸出内容物 n皮肤、毛及皮屑:刀刮至真皮层, 收集皮屑 n脑、脊髓:常作病毒分离培养检查 (二)保存 n细菌学检查材料的保存 n液体材料:容器口密封 n组织块:A:饱和盐水 B:30甘油缓冲液 n各种涂片、触片、抹片等,自然干燥 v较长时间保存,根据不同要求,不同温度冷 藏。 n病毒学检查材料的保存 n实质脏器(组织块) n甘油缓冲液 n鸡蛋生理盐水 n液体材料同细菌的保存方法 v冷藏:病毒分离材料4只能保存数小时,故 长期保存应在-70 保存 四、用于毒物分析材料的收集 、保存与送检 n中毒的诊断临床症状尸检初步 诊断;须确诊时,需进行毒物化验, 分析 n毒物分析结果与材料采集关系密切 n样品量少(微量):不易检出 n易挥发:结果不准或是无毒 n容器不净:污染,误判 (一)样品采集 n总原则:采含毒量多而不易检出的材料 常采集:呕吐、排泄物、胃肠内容物、 血液、粪尿、肾、肝、脑、剩余食料, 饮水 n样品种类及量(见附表) 量要足够,多处取材,最好分开,也可 将胃肠内容物和心、肝、脑等实质脏器 混装 附表:常见毒物中毒的样品采取表 毒物剩余饲 料 呕吐物、胃及 胃内容物 肠内容 物 粪便尿液血 液 肝肾脑 氰化物+ 磷及磷化 锌 + 砷、铅+ 有机磷农 药 + 有机氯农 药 + 汞及有机 汞 + 生物碱+ 亚硝酸盐+ 毒鼠药+ + 样品采集的量和包装法 样品采样量包装法附注 剩余饲料500-1000g塑料袋 胃内容物250-500g广口瓶或塑料 袋 密封 肠内容物250g左右广口瓶或塑料 袋 密封 粪便250g左右广口瓶或塑料 袋 密封 实质脏 器100-250g/脏器广口瓶或塑料 袋 密封 血液50-100ml玻璃瓶或大试 管 密封 尿液200-500ml玻璃瓶密封 (二)保存 n保存容器要洁净,无化学物污染,忌用 金属制品,以玻璃、陶瓷器皿为好 n干物质可用干净的塑料袋、纸袋(牛皮 纸) n材料中不可用防腐剂,非用不可时可用 酒精,同时送对照 n所存材料要标明名称,取材时间,死亡 时间,送检要求等 (三)送检 n封装(严密) n尽快:防腐败变质(组织),挥发破坏,最好在 冷藏条件下 n提供中毒情况 n饲养管理及使疫情况:饲料、饮水、霉败否、群饲或 单饲 n周围环境:社会情况(投毒)、农药使用情况、化工 厂、废水等 n发病及死亡情况:时间、头数、症

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