自身免疫性肝病血清学检测精要课件

自免肝血清学实验室检测技术与临床意义 概述： 自身免疫性肝病是以肝脏为相对特异性免疫病理损 伤器官的一类自身免疫性疾病，主要包括：自身免 疫性肝炎(AIH)、原发性胆汁性肝硬化(PBS)和原发 性硬化性胆管炎(PSC)以及这三种疾病中任何两者 之间的重叠综合征，常同时合并肝外免疫性疾病。 其诊断主要依据特异性生化异常，自身抗体及干组 织特征。 自身免疫性肝病 自身免疫性肝病发病情况（中国） 长期缺乏临床流行病学研究 病毒性肝炎高发国家 掩盖自免肝真实患者 临床对自免肝自身抗体检测 临床意义认识不足，开展不 普及，严重影响诊断、治疗 临床少见病 错误认识 AIH临床分类及特异性自身抗体 类型相关抗体靶抗原 I型抗平滑肌抗体（ASMA） 抗核抗体（ANA） 抗肝可溶性/肝胰抗原抗体（SLA/LP) F-肌动蛋白 细胞核抗原 UGA-丝氨酰tRNA蛋白复 合物 II型抗肝肾微粒体1型抗体（LKM-1） 抗肝细胞溶质抗原1型抗体（LC-1) 细胞色素P450 IID6 亚胺甲基转移酶和环化脱 氨酶 PBC相关自身抗体及抗原 荧光表现相关抗体对应靶抗原 胞浆颗粒 型 抗线粒体抗体（2型常见） （AMA-2） 丙酮酸脱氢酶复合物 核点型抗sp100抗体sp100 核膜型抗gp210抗体 抗Lamin蛋白及受体抗体 核孔复合体糖蛋白 Lamin蛋白及其受体 l PBC主要为女性高发（男女比例为1:9），且年龄在50岁左 右 l 90-95%患者可检测到AMA，而且抗体早于临床症状出现（ 50-60%患者通常无症状） l 2-4年后，2/3患者开始出现明显临床表现 l 应用重组抗原检测AMA阳出现阳性时，事实上可以诊断为 PBC或者至少可以提示该患者在5-10年内具有PBC发病的高 风险 AMA与PBC诊断 N Engl J Med 2005;353:1261-73. IFA：多个基质组合 大鼠肝大鼠肾大鼠胃 肾实质 肾髓质 肝组织 胃组织 LIA：靶抗原确认实验 l 几乎涵盖所有自免肝 相关抗体 l 每膜条对应一份样本 l 一次实验完成多个指 标检测 l 结果稳定可靠 l 可肉眼判读，也借助 软件实现数字化判读 微孔板ELISA 间接免疫荧光法（IFA）： 是检测自身免疫性肝病相关自身抗体的常规方法 ，结合多种不同组织基质的荧光表现，可区分多 种不同的自身抗体，但该方法要求实验工作人员 具有足够的荧光结果判读经验才能避免主观性和 随意性，还有荧光设备的要求。 实验室方法学比较（一） 条带酶免分析法(LIA)： 多个抗原同时包被在一个膜条上，一次血清温育实 现多个靶抗原的确认实验； 几乎涵盖了所有常见的自免肝相关抗体； 操作简单，易于判读； 每一膜条检测一份样本，最大限度降低试剂成本； 通过软件实现结果的数字判读和保存。 实验室方法学比较（二） 酶联免疫吸附法(ELISA)： 可特异性的开展靶抗原确认实验； 筛查产品在一个微孔中同时包被了6种抗原，一次 实验可完成6种最常见的抗体筛查检测； 操作简单，可实现定量结果； 实验室方法学比较（三） 姓名性别年龄科室采样时间 检测项目样本特点病案号申请医生送检时间 项目编号项目名称结果参考值单位标识 1AMA-2阳性阴性 2LKM-1阴性阴性 3LC-1阴性阴性 4SLA/LP阳性阴性 5sp100阴性阴性 6gp210阳性阴性 7Ro52阴性阴性 8CENP阴性阴性 正确解读自免肝实验报告单 抗核抗体（ANA）：是AIH最常见的自身抗体，主要出现在型AIH中 （阳性率75%），并且常与抗平滑肌抗体ASMA同时出现（85-90%） ；ANA对AIH不具有诊断特异性，可见于多种结缔组织疾病和其它自 身免疫性疾病。如果ANA与ASMA同时出现，则高度提示AIH。 抗平滑肌抗体（ASMA）：主要出现在型AIH中（阳性率40-90%） ，在AIH中，ASMA表现为高滴度（1:320），以IgG型为主，特异性 靶抗原为F-肌动蛋白。 抗可溶性肝抗原/肝胰抗原（SLA/LP）抗体：是自身免疫性肝炎（AIH ）最特异的诊断标志。虽然它的阳性率只有10-30%，但其阳性预告 值几乎为100%。如果出现相应的临床症状，每一个阳性结果基本上 可诊断AIH。 抗肝肾微粒体（LKM-1）抗体：已知的抗LKM抗体的靶抗原有3型（ LKM-1 、LKM-2、 LKM-3）.其中LKM-1抗体为型AIH的标志，阳性 率为7%，在儿童中的阳性率略高。 自免肝实验室检测意义（一） 抗肝细胞溶质抗原1型（LC-1）抗体：抗LC-1抗体为型AIH的另一 个特异性标志，在型AIH中的阳性率为48%，特异性高达99%，抗 LC-1抗体在型AIH中既可单独出现（30-40%），也可与抗LKM-1抗 体等其它自身抗体一起出现（60-70%），抗LC-1抗体对AIH的特异性 高于抗LKM-1抗体。 抗线粒体抗体M2：是诊断原发性胆汁性肝硬化（PBC）的高度特异 性和敏感的指标，阳性率为94%。 抗核点（sp100）抗体：通常间接免疫荧光法可在三分之一的PBC患 者中检测到ANA抗体，部分被确认为PBC患者特异性ANA靶抗原，包 括核点型荧光表现的早幼粒细胞白血病蛋白（PML）和Sp100，以及 与核膜型特异性相关的核孔复合体组分gp210. 抗GP210抗体的检测有助于PBC的早期诊断,并且与PBC的预后有关, 该抗体对PBC预后的影响与其持续的时间有关。 自免肝实验室检测意义（二） 抗SS-A（Ro52）抗体在自身免疫性疾病中是一个非特异性指标，与 多种自身免疫性疾病都有相关性，在很多疾病处于稳定期、控制好的 情况下会显示阴性；如果阳性会提示复发或者优先于其它指标预警， 起到预防提示作用。此指标合并其它指标阳性，常会提示预后不好。 抗着丝点抗体：1、为了从