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文档简介

香菇多糖提取,徐扬 2012274141 精化1221,一、认识产品 二、追根求源 三、生产工艺,一、认识产品,一.认识香菇多糖 (1)香菇多糖分子式: (2)分子结构,(3)、香菇多糖性质 1、物理性质,溶于碱溶液或甲酸,微溶于热水或二甲亚砜,不溶于冷水、醇、乙醚、氯仿、吡啶或六甲基磷酰胺。对硫酸和盐酸稳定。D20+13.5+14.5(2%氢氧化钠);D20+19.5+21.5(10氢氧化钠)。,2、化学性质,3、生物学性质: 1、香菇多糖的抗肿瘤活性:香菇多糖具有抗肿瘤作用,它没有化疗药物的毒副作用。香菇多糖进入抗体后诱导产生一种具有免疫活性的细胞因子,在这些细胞因子的综合作用下,机体免疫系统增强,对肿瘤细胞起防御与杀伤作用。香菇多糖通过激活巨噬细胞,增强抗体依赖性细胞诱导的细胞毒(ADDC),发挥抗肿瘤活性;此外,香菇多糖还能使肿瘤部位的血管扩张和出血,导致肿瘤出血坏死和完全退化 。 2.香菇多糖的免疫调节:香菇多糖的免疫调节作用是其生物活性的重要基础 ,香菇多糖是典型的T细胞激活剂,促进白细胞介素的产生,还能促进单核巨噬细胞的功能,被认为是一种特殊免疫增强剂。其免疫作用特点在于它能促进淋巴细胞活化因子(LAE)的产生,释放各种辅助性T细胞因子,增强宿主腹腔巨噬细胞吞噬率,恢复或刺激辅助性T细胞的功能。另外,香菇多糖还能促进抗体生成,抑制巨噬细胞释放。 3.香菇多糖的抗病毒活性 :香菇含有一种双链核糖核酸,能刺激人体网状细胞及白血球释放干扰素,而干扰素具有抗病毒作用。香菇菌丝体提取物可抑制细胞的吸附疱疹病毒,从而防治单纯疱疹病毒、巨细胞病毒引起的各类疾病。,(4)香菇多糖的功能,1.香菇多糖具有免疫调节和抗肿瘤的作用:香菇多糖对调节人体免疫功能的 T细胞有促进作用,刺激抗体的形成和活化巨噬细胞,降低甲基胆蒽诱发肿瘤的能力,故对癌细胞有强烈的抑制作用。香菇多糖被称为免疫学中的外周疗法(Scheme efferent)而应用于抗肿瘤的临床上,在人体中,香菇多糖能增加DNA的合成和外周单核细胞免疫蛋白的产生。,2.香菇多糖的护肝解毒作用:香菇多糖可显著降低 l4,硫代乙酰胺和强的松龙引起的升高,并可拮抗l4肝损伤肝糖元含量降低,具有保肝解毒作用。 3.香菇还含有双链核糖核酸,能诱导产生干扰素,具有抗病毒能力。香菇提取物具有抗血小板凝集作用。,(5)、香菇多糖的质量标准:,二 追根求源,1 诞生,1968 年日本千原吴郎首先利用热水从香菇子实体中浸提出6 种胞外LNT5 1970 年Chihard 和Sasaki 用热水浸提结合有机溶剂沉淀从香菇中提取到另外4 种多糖。 1986年获日本厚生省批准生产并外销。 1988年我国卫生部批准进口,现今我国已有几家国产LNT上市(如南京振中和福州梅峰等)。香菇多糖由于是单一组分,质量易于控制,且具有疗效高,剂量低,毒副作用小等优点,受到医生的青睐。 近年来,LNT的广泛药理作用研究取得了很大进展。,(2)产品及技术的发展过程:香菇是我国传统的食用菌品种,近年来产区由南到北分布较广,产量占全世界香菇总量的78,跃居榜首。产品远销欧美和东南亚等117个国家和地区。在全球香菇外销市场上占92。随着生活水平提高,世界卫生组织提出的“一荤、一素、一菌”的科学膳食导向,已被越来越多的人接受国人对绿色无公害食品的追求越来越高。历时800多年的原木砍花法,以其独到的砍花和“惊蕈”术及悠久的历史文化促进了中国与亚洲地区香菇业的发展;尤其是近半个世纪以来随着我国香菇产业“南菇北移”战略的实施,香菇产区由南向北不断延伸,种植面积不断扩大,形成了产业化、专业化、标准化的生产格局。各地在香菇省力、低耗、高产、优质栽培技术上形成了许多突破。,(3)产品的生产方法比较,1, 热水浸提发 2,稀酸浸提发 3,酶解法 4,微波法 5,超声波 6,深层发酵法 7,复合法 8,超临界CO2萃取,(3)产品的生产方法比较,通过对香菇多糖的热水浸提法,酸浸提法,复合酶浸提法,复合酶解、酸处理结合热水浸提法等几种提取方法进行了研究比较,实验结果表明:提取率高且浸提效果理想的方法是复合酶解、酸处理结合热水浸提法,此法能显著提高可溶于热水的多糖及还原性寡糖的浸提率,香菇多糖的浸提率达8.96%。同时,在单因素实验条件的基础上,针对复合酶解时溶液的pH值、复合酶解时间、热水浸提温度、热水浸提时间进行了四因素三水平的正交实验,并通过极差分析,确定了利用复合酶解、酸处理结合热水浸提法提取香菇多糖的最佳提取条件:复合酶解时溶液的pH值为5.0,复合酶解时间为80m in,热水浸提温度为90,热水浸提时间为90m in。,(4)、现在常用的生产方法,发酵法(利用纤维素酶、蛋白酶把细胞壁里面的香菇多糖流出),三、生产工艺,(1)、原谅及要求:以自然界的香菇为原料。氯仿.无水乙醇.丙酮 .乙醚.苯酚-硫酸试剂、苯酚3g浓硫酸5ml.溶于95ml无水乙醇中. (2)、生产原理:,利用深层液体发酵培养香菇菌丝体后,从发酵液中提取菌丝体,从而得到胞内香菇菌丝体,再从菌丝体中,利用它在酒精和水,及酶液的不同溶解度来提取胞内多糖。将菌丝体抽提、浓缩、离心,取上清液脱色透析,透析液再浓缩、离心,最后用溶液沉淀、洗涤干燥而成。,(3)、工艺流程图,下图:,3 工艺流程,(4)工艺流程说明及主要工艺参数 香菇菌丝生长的培养基分别为培养基A_8:马铃薯20%,葡萄糖2%,麸皮2%,玉米粉2%,蛋白胨0.2%,MgSO_47H_2O0.05%,KH_2PO_40.1%,维生素B_10.001%,琼脂2%和培养基A_(10):马铃薯20%,葡萄糖2%,麸皮5%,酵母膏0.25%,蛋白胨0.1%,MgSO_47H_2O 0.05%,KH_2PO_40.1%,琼脂2%。香菇生长的液体种子培养基为:玉米粉4%、蔗糖2.5%、酵母膏0.3%、KH_2PO_4 0.1%、MgSO_47H_2O 0.05%、维生素B_10.005%、pH5.25。选取2%葡萄糖和2.5%N溶性淀粉为最佳碳源,0.1%酵母膏为最适宜氮源。KH_2PO_4 0.1%、MgSO_47H_2O 0.05%和维生素B_1 0.001%最有利于液体发酵爪哇香菇菌丝体产胞内多糖。最终优化出的适于爪哇香菇菌丝体液体发酵产胞内多糖的培养基为:2%葡萄糖、2.5%可溶性淀粉、0.1%酵母膏、KH_2PO_4 0.1%、MgSO_47H_2O 0.05%和维生素B_1 0.001%。,(5)主要设备,100ml容量瓶、6个50ml容量瓶、玻璃棒、蒸馏装置(温度计、沸石、三口烧瓶、冷凝管)烧杯若干、锥形瓶若干、棕色瓶一个、抽滤瓶、1、2、5、10ml吸液管、电子天平、真空干燥管、恒温水浴锅、紫外分光光度计、粉碎机、超高压等静压机、真空泵、台式恒温振荡器、台式离心机。,(6)生产的关键过程及关键技术,通过一系列单因素试验考察了培养基起始pH、摇瓶装液量、摇床振荡频率以及培养天数对香菇液体发酵产胞内多糖的影响。试验结果表明,起始pH45、250ml三角瓶装液量50ml100ml、摇床振荡频率130r/min、培养9

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